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外周血(xue)中單個核細(xi)(xi)胞(bao)(bao)包括淋(lin)巴(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)單核細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，其(qi)體積(ji)、形態和(he)密(mi)(mi)度(du)與其(qi)他細(xi)(xi)胞(bao)(bao)不同，紅細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)粒(li)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)密(mi)(mi)度(du)較大，為(wei)1.090 g/ml 左右，而淋(lin)巴(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)單核細(xi)(xi)胞(bao)(bao)密(mi)(mi)度(du)為(wei)1.075～1.090 g/ml，血(xue)小板為(wei)1.030～1.035 g/ml。為(wei)此，將(jiang)葡(pu)聚糖(右旋(xuan)糖酐)和(he)泛影酸葡(pu)甲(jia)胺按(an)一定(ding)(ding)比例混合(he)，調(diao)整比重、pH 值和(he)滲透壓(ya)，經過(guo)澄清及(ji)過(guo)濾除菌后制成(cheng)一種密(mi)(mi)度(du)在1.077g/ml 并且近于等滲的溶(rong)液（分層液），經過(guo)密(mi)(mi)度(du)梯度(du)離心使一定(ding)(ding)密(mi)(mi)度(du)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)按(an)相應密(mi)(mi)度(du)梯度(du)分布，從而將(jiang)各種血(xue)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)加以分離。

本品為帶有乳(ru)光(guang)或微乳(ru)光(guang)的注射(she)水溶(rong)液，主要(yao)組成(cheng)成(cheng)份是(shi)葡聚糖(tang)（右旋糖(tang)酐）與泛影酸葡甲胺。適用于從人抗(kang)凝血液中分(fen)離(li)單(dan)個核細(xi)胞(bao)(bao)（主要(yao)為淋巴細(xi)胞(bao)(bao)），無菌條件下所分(fen)離(li)的細(xi)胞(bao)(bao)可用于免(mian)疫學檢測。

分離方法說明及圖(tu)例(li)：

取新鮮抗(kang)凝血(xue)1ml，與生(sheng)理(li)鹽(yan)水1:1 混勻后，小心(xin)(xin)加于2ml細(xi)胞(bao)(bao)分(fen)離液之(zhi)液面上(shang)；以400g（約1500轉/分(fen)，半徑15cm水平(ping)轉子）離心(xin)(xin)20分(fen)鐘，此時離心(xin)(xin)管中(zhong)由上(shang)下(xia)細(xi)胞(bao)(bao)分(fen)四層(ceng)。*層(ceng)：為(wei)血(xue)漿層(ceng)。第(di)二(er)層(ceng)：為(wei)環(huan)狀乳白色淋(lin)巴細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)。第(di)三(san)層(ceng)：為(wei)透明分(fen)離液層(ceng)。第(di)四層(ceng)：為(wei)紅細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)。收(shou)集(ji)第(di)二(er)層(ceng)細(xi)胞(bao)(bao)放入含生(sheng)理(li)鹽(yan)水4-5ml的試管中(zhong)，充分(fen)混勻后，以400g（約1500轉/分(fen)）離心(xin)(xin)20分(fen)鐘。沉淀經2次洗(xi)滌后即得所需淋(lin)巴細(xi)胞(bao)(bao)。

注： 提取(qu)率約(yue)為80%。

注意事項：

A．本分離(li)液要求血液為新鮮抗凝血，避(bi)免(mian)冷凍和(he)(he)冷藏；在收集血液和(he)(he)分離(li)過程(cheng)中(zhong)，應注意無菌操(cao)作，避(bi)免(mian)微生物污染(ran)。

B．本實驗要求，在(zai)正常大氣壓下(xia)，分(fen)(fen)離(li)(li)液、分(fen)(fen)離(li)(li)樣本以(yi)及分(fen)(fen)離(li)(li)環境溫(wen)度(du)為20℃±2℃。分(fen)(fen)離(li)(li)液在(zai)低溫(wen)時呈較高密度(du)，在(zai)高溫(wen)時呈較低密度(du)。細胞分(fen)(fen)離(li)(li)液從冰箱取出后，不可立即使(shi)用，操作前(qian)可將(jiang)樣本和分(fen)(fen)離(li)(li)液置于20℃水浴(yu)中復溫(wen)20分(fen)(fen)鐘(zhong)以(yi)保證分(fen)(fen)離(li)(li)溫(wen)度(du)。

C．由(you)于各品(pin)牌離(li)心機的性能(neng)不(bu)同(tong)，國(guo)內南北地區溫(wen)度環境和四季的差(cha)異，可能(neng)影響分(fen)離(li)效果，用(yong)戶可以調節離(li)心轉數(shu)和離(li)心時間，摸索佳(jia)的分(fen)離(li)條件（具體分(fen)離(li)條件各實驗室自定）。

D．好使用無(wu)靜電反應的(de)(de)離心管(guan)，推薦使用未經過堿(jian)處理的(de)(de)玻璃(li)離心管(guan)。

E．優抗凝劑(ji)選(xuan)擇：EDTA、枸櫞酸、肝素。應(ying)注意(yi)在(zai)血液稀(xi)釋過程中應(ying)去除抗凝劑(ji)體積。

產品性能指標：

密度 1.077±0.001g/ml

pH                             7.0-7.5

滲(shen)透壓                         280-340mOsmol/kg

內(nei)毒素                         ≤0.5EU/ml

無菌(jun)                           直接(jie)接(jie)種培養(yang)14天后培養(yang)基澄(cheng)清

澄(cheng)明度及(ji)不(bu)溶性(xing)顆粒物           每50ml 溶液中(zhong)含(han)10μm 以上的不(bu)溶性(xing)微粒20 粒以下，

含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下

貯藏及保存期限：

本(ben)分離液(ye)是敏(min)光(guang)型的，應在18℃-25℃避光(guang)保(bao)(bao)(bao)存，有效(xiao)期兩年。啟封后(hou)置4℃保(bao)(bao)(bao)存，若保(bao)(bao)(bao)證無微(wei)生(sheng)物(wu)污染， 4℃可長期保(bao)(bao)(bao)存。保(bao)(bao)(bao)存溫度較低(di)（10℃以下）時(shi)本(ben)分離液(ye)易出現白色結晶，影響分離效(xiao)果。