產品名稱:FDA水解酶活性(xing)檢測試(shi)劑盒
產品型號:BC0485
產品特點:FDA水解酶活性檢測試劑盒測定意義:FDA水解反應能很好的反應土壤中微生物活性和土壤質量的變化以及生態系統中有機質的轉化,是土壤質量研究中的重要生物學指標之一。測定原理:FDA是一種無色化合物,在介質中能被許多土壤酶所催化水解,并經脫水反應,產生酶解終產物熒光素,穩定不易被分解,并在490nm處有強吸收峰,通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。
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FDA水解酶活性檢測試劑盒
操作步驟:
一、 樣本處理稱取(qu)風干過 30-50 目篩(shai)土(tu)壤約 0.1g,備(bei)用。
二、 測(ce)定(ding)操(cao)作表(biao)空白管(guan)(guan)(guan) 標(biao)準(zhun)管(guan)(guan)(guan) 對照管(guan)(guan)(guan) 測(ce)定(ding)管(guan)(guan)(guan)樣本(g) 0.05 0.05 標(biao)準(zhun)液(ye)(μL) 40 雙(shuang)蒸水(μL) 40 試(shi)劑(ji)一(μL) 200 200 240 200 試(shi)劑(ji)二(μL) 40 充(chong)分混勻,30℃,震蕩 1h 試(shi)劑(ji)三(san)(mL) 160 160 160 160 10000g,25℃,離(li)心(xin) 5min,取(qu) 200μL 上清(qing)于(yu)微(wei)量石(shi)英比色皿/96 孔板中(zhong)測(ce)定(ding) 490nm 處吸光值 A,△ A1=A 標(biao)準(zhun)管(guan)(guan)(guan)-A 空白管(guan)(guan)(guan),△ A2=A 測(ce)定(ding)管(guan)(guan)(guan)-A 對照管(guan)(guan)(guan)
注意(yi):空(kong)白(bai)管和標準管只需測(ce)定一次。
FDA水解酶活性檢測試劑盒
標準液:液體 4mL×1 瓶,4℃保存(cun)。
試劑一:液體 40mL×1 瓶,4℃保(bao)存。
試劑二:粉劑 1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加(jia) 4mL 試劑三溶解。
試劑三:液體 40mL×1 瓶,4℃保存。
酶活性計算公式
a. 用微量石英(ying)比色皿(min)測定(ding)的計(ji)算(suan)公(gong)式如(ru)下
酶活性定義:每克土壤每天產生(sheng) 1μmol 熒光素的量為(wei)一個(ge)酶活力(li)單(dan)位(wei)。 FDA 活性(μmol/d/g)=(△ A2÷△ A1×C 標準品)×V 反總÷W = 2.4×(△ A2÷△ A1)÷W
b. 用 96 孔板測定的計(ji)算公式如下
酶(mei)活(huo)性定義(yi):每克土(tu)壤每天產(chan)生 1μmol 熒光素的量為(wei)一個酶(mei)活(huo)力單(dan)位。 FDA 活(huo)性(μmol/d/g)=(△ A2÷△ A1×C 標準品)×V 反總÷W = 2.4×(△ A2÷△ A1)÷W C 標準品:標準品濃度 100μmol/L;V 反總:反應總體積,0.4mL;W:樣本質量,g
注意事項:
1. 盡量采用新鮮土樣(yang)或者短期(qi)低溫保存(cun)樣(yang)品,否則(ze)很難準確反映酶的活性(xing)。
2. 測(ce)定(ding)之前進行預實驗,若吸光(guang)值較高,請(qing)進行適當(dang)的稀釋(shi)再測(ce)定(ding),并(bing)在計算公(gong)式中乘以(yi)稀釋(shi)倍數。
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