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甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

操作步驟：

一、 TG 的提取：

1、 組織：按(an)照(zhao)組織質量（g）：試劑(ji)一體積(mL)為1：5~10的(de)比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑(ji)一）進行冰浴(yu)勻(yun)漿，8000g，4℃離心(xin)10min，取上清待測。

2、 細胞(bao)(bao)、細菌(jun)：先收集 400-500 萬細胞(bao)(bao)或細菌(jun)到離心管內，棄上(shang)(shang)清，加 1mL 試劑一(yi)，超聲波破(po)碎 1min（強度(du) 20％，超聲 2s，停 1s），8000g， 4℃離心 10min，取上(shang)(shang)清待測。

3、 血清（漿）等液(ye)體(ti)樣(yang)品(pin)：直接(jie)測(ce)定。

二、 測定操作：

1. 分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計預熱 30min，調(diao)節(jie)波長到(dao) 420 nm，蒸餾(liu)水調(diao)零。

2. 水(shui)浴鍋預熱(re)到 65℃。空白管(guan) 標準(zhun)管(guan) 測(ce)定管(guan)雙蒸水(shui)（μL） 40 標準(zhun)液（μL） 40 TG 待測(ce)液（μL） 40 試(shi)(shi)劑(ji)(ji)一（μL） 125 125 125 試(shi)(shi)劑(ji)(ji)二（μL） 25 25 25 加(jia)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)一后(hou)充分(fen)混勻，再加(jia)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)二，劇烈振蕩(dang) 30s，靜置，待分(fen)層(ceng)后(hou)取上層(ceng)溶液 30μL，置于新的 EP 管(guan)中(zhong)。

3．甘油三酯含量測(ce)(ce)(ce)定(ding)：空(kong)(kong)白管 標準管 測(ce)(ce)(ce)定(ding)管上層(ceng)溶(rong)液（μL） 30 30 30 試(shi)劑(ji)三 （μL） 100 100 100 試(shi)劑(ji)四（μL） 30 30 30 充分(fen)混勻，65℃水(shui)浴(yu) 3min 試(shi)劑(ji)五（μL） 100 100 100 試(shi)劑(ji)六（μL） 100 100 100 充分(fen)混勻，65℃水(shui)浴(yu) 15min 取(qu)出(chu) 200μL 于微(wei)量石英(ying)比色皿/96 孔板測(ce)(ce)(ce)定(ding) 420nm 處吸光度，記(ji)為 A 空(kong)(kong)，A 標和 A 測(ce)(ce)(ce)。注意：空(kong)(kong)白管和標準管只需測(ce)(ce)(ce)定(ding)一次。

甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

a.使用微量石英(ying)比(bi)色(se)皿測(ce)定的(de)計算公式如下

1. 血清(qing)（漿）中甘油三(san)酯(zhi)含(han)量： TG 含(han)量（mg/dL）=C 標(biao)準品×（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)）×100 mL =100×（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)） C 標(biao)準品：1mg/mL；100mL：血清(qing)體(ti)積，1dL=100 mL。

2. 組(zu)織(zhi)中(zhong)甘油三(san)酯含量(liang)： (1)按樣(yang)本(ben)蛋白濃度(du)(du)計(ji)算 TG 含量(liang)（mg/ mg prot）= C 標(biao)準品(pin)(pin)×（A 測(ce)(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)）÷Cpr =（A 測(ce)(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)）÷ Cpr (2)按樣(yang)本(ben)質量(liang)計(ji)算 TG 含量(liang)（mg/ g）=C 標(biao)準品(pin)(pin)×（A 測(ce)(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)）÷W =（A 測(ce)(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)）÷ W C 標(biao)準品(pin)(pin)：1mg/mL ；Cpr：樣(yang)本(ben)蛋白濃度(du)(du)，mg/mL；W：樣(yang)本(ben)鮮重，g/mL

3. 細(xi)胞、細(xi)菌中甘(gan)油(you)三酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 標準品×（A 測－A 空(kong)）÷（A 標－A 空(kong)）÷細(xi)菌或細(xi)胞（104 cell /mL） =（A 測－A 空(kong)）÷（A 標－A 空(kong)）÷細(xi)菌或細(xi)胞（104 cell /mL） C 標準品：1mg/mL。

b.使用 96 孔板測定的計算公式(shi)如下(xia)

1. 血清（漿）中甘(gan)油三酯含量： TG 含量（mg/dL）=C 標(biao)準品(pin)×（A 測(ce)－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)(kong)）×100 mL =100×（A 測(ce)－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)(kong)） C 標(biao)準品(pin)：1mg/mL；100mL：血清體積，1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含(han)量(liang)(liang)： (1)按(an)樣(yang)本(ben)(ben)(ben)蛋白濃(nong)度計(ji)算(suan) TG 含(han)量(liang)(liang)（mg/ mg prot）= C 標(biao)(biao)準品(pin)×（A 測(ce)(ce)(ce)－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)(biao)－A 空(kong)(kong)）÷Cpr =（A 測(ce)(ce)(ce)－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)(biao)－A 空(kong)(kong)）÷ Cpr (2)按(an)樣(yang)本(ben)(ben)(ben)質量(liang)(liang)計(ji)算(suan) TG 含(han)量(liang)(liang)（mg/ g）=C 標(biao)(biao)準品(pin)×（A 測(ce)(ce)(ce)－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)(biao)－A 空(kong)(kong)）÷W =（A 測(ce)(ce)(ce)－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)(biao)－A 空(kong)(kong)）÷ W C 標(biao)(biao)準品(pin)：1mg/mL ；Cpr：樣(yang)本(ben)(ben)(ben)蛋白濃(nong)度，mg/mL；W：樣(yang)本(ben)(ben)(ben)鮮重，g/mL

3. 細(xi)胞、細(xi)菌(jun)中甘(gan)油(you)三(san)酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 標(biao)準品×（A 測－A 空）÷（A 標(biao)－A 空）÷細(xi)菌(jun)或細(xi)胞（104 cell /mL） =（A 測－A 空）÷（A 標(biao)－A 空）÷細(xi)菌(jun)或細(xi)胞（104 cell /mL） C 標(biao)準品：1mg/mL。

注意事項：

1. 試(shi)劑(ji)盒中有易揮發性物質，實驗過程中需佩戴(dai)手套和口罩，試(shi)劑(ji)瓶蓋(gai)(gai)打開后應(ying)該及時蓋(gai)(gai)緊。

2. 加試(shi)劑(ji)二(er)后(hou)需劇(ju)烈震蕩，使(shi)待測液(ye)中甘(gan)油三酯(zhi)得到充分提取。

3. 檢出限為(wei) 100μ mol/L。

試劑一：自備，取玻璃(li)空瓶，加入 45mL 正(zheng)庚(geng)烷，80mL 異丙(bing)醇(chun)，蓋緊后混勻，4℃保存。

劑二：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。

試(shi)劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃保存(cun)。

試劑四(si)：液體 3mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑五(wu)：液(ye)體 10mL×1 瓶(ping)，4℃避光(guang)保存(cun)。

試(shi)劑六：液(ye)體(ti) 10mL×1 瓶(ping)，4℃避光保存。標(biao)(biao)準品：液(ye)體(ti) 5mL×1 瓶(ping)，1mg/mL 甘油(you)三酯標(biao)(biao)準溶液(ye)，4℃保存。

相關文獻:

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