色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

Solarbio-細菌基因組DNA提取試劑盒
本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和*的緩沖液系統，提取細菌基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司*新型材料，能夠高效專一吸附DNA. 可大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規操作，包括酶切、 PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、取細菌培養液1ml，12000rpm離心1min.，盡量吸除上清。
2、向菌體中加入200ul溶液A，振蕩或用移液器吹打使菌體充分懸浮（如果是革蘭氏陽性菌，可在此步驟加入終濃度為20mg/ml的溶菌酶），向懸浮液中加入20ul的RNase A (10mg/ml)，充分顛倒混勻，室溫放置15-30min。
3、向管中加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml)，充分混勻，55℃消化30-60min，消化期間可顛倒離心管混勻數次，直樣品消化*為止，此時可見菌液呈清亮粘稠狀。
4、向管中加入200ul溶液B，充分顛倒混勻，如出現白色沉淀，可于75℃放置15-30min，沉淀即會消失，不影響后續實驗。如果溶液未變清亮，說明樣品消化不*，可能會導致DNA的提取量以及純度降低，還可能堵塞吸附柱。
5、向管中加入200ul無水乙醇，充分混勻，此時還可能會出現絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入到吸附柱中，靜置2min。
6、12000rpm離心2min. 棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇)。12000rpm離心1min，棄廢液，將吸
附柱放入收集管中。
8、向吸附柱中加入600ul漂洗液， 12000rpm離心l min， 棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
9、12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續實驗如酶切、PCR等。
10、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心1min。
11、離(li)心所得(de)洗脫(tuo)液(ye)再加入吸附(fu)柱中，室溫(wen)放置2min ，12000rpm離(li)心2 min，即可得(de)到高質量的細菌(jun)基(ji)因(yin)組DNA。

Solarbio-細菌基因組DNA提取試劑盒
注意事項:
1、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA段較小且提取量下降。
2、若試劑盒中的溶液出現沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。
3、如果實驗中的離心步驟出現柱子堵塞的情況，可適當延長離心時間。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul，體積過小會影響回收效率；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調此范圍)， pH值低于7. 0會降低洗脫效率。DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。
5、 DNA濃(nong)度(du)(du)及純度(du)(du)檢測：得(de)到的基(ji)因組DNA片(pian)段(duan)的大小(xiao)與樣品(pin)保存時間、操作過程(cheng)中的剪切力等因素(su)有關。回(hui)收得(de)到的DNA段(duan)可用瓊脂糖凝膠電泳(yong)和紫外分光(guang)光(guang)度(du)(du)計檢測濃(nong)度(du)(du)與純度(du)(du)。DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為(wei)1.0相當于大約50μg/ml雙(shuang)鏈DNA、40μg/ml單鏈DNA。OD260/0D280比(bi)值應為(wei)1.7-1.9，如果洗脫(tuo)時不使用洗脫(tuo)緩沖液，而使用去(qu)離子(zi)水(shui)，比(bi)值會偏(pian)低，因為(wei)pH值和離子(zi)存在會影(ying)響(xiang)光(guang)吸收值，但(dan)并不表(biao)示(shi)純度(du)(du)低。

相關產品：
E1020 EB染色液
D1010 6×DNA Loading Buffer
T1060 50×TAE 緩沖液
T1050 5×TBE 緩沖液
M1060 D2000 DNA Ladder
M1400 1kb DNA Ladder
G8142 GoldView II型核酸染色劑(5000×)
D1100 質粒小量提取試劑盒

相關文獻：

《Apatite nanoparticles mediate intracellular delivery of trehalose and increase survival of cryopreserved cells》 作者:Bin Wang,Gaoli Liu,Vasudevan Balamurugan,Yulong Sui,Guannan Wang,Yisheng Song,Qing Chang 期刊:Cryobiology 影響因子:2.141 PMID:30458174
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu  期刊:Cell Death & Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587