微量法 淀粉含量檢測試劑盒

產品名稱: 淀(dian)粉含量檢測試劑盒 微量法

產品英文名: Micro Starch Content Assay Kit

產品(pin)貨號：BC0705        產地(di)：北京市(shi)通州區(qu)馬駒橋聯東U谷(gu)8三樓(lou)

產品規格：100管(guan)/96樣(yang)     產品商標：solarbio
保(bao)(bao)存與運輸：4℃保(bao)(bao)存或-20℃保(bao)(bao)存；            參(can)考價格：560
庫(ku)存狀態：現貨(huo)                          
關鍵字: 淀粉含(han)量檢測試劑盒|淀粉(fen)檢(jian)測試劑盒|淀(dian)粉|試劑盒

簡要介紹：
淀粉是植物中糖(tang)的主要(yao)儲存(cun)形式，其含(han)(han)量(liang)測(ce)定(ding)對(dui)于評(ping)價食(shi)品營養(yang)價值和調查植物體內糖(tang)代謝(xie)都有重(zhong)要(yao)意義。利用80％乙(yi)醇可以把樣品中可溶性糖(tang)與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為(wei)葡萄糖(tang)，采用蒽酮比色(se)法測(ce)定(ding)葡萄糖(tang)含(han)(han)量(liang)，即可計(ji)算淀粉含(han)(han)量(liang)。

產品詳(xiang)細描述(shu)
產品內容：
試(shi)劑一：液體100mL×1瓶(ping)，4℃保存；
試劑二(er)：液體35mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。

產品(pin)說明：
淀粉是植物中(zhong)糖的主(zhu)要儲存(cun)形(xing)式，其含量測定對于(yu)評價食品營養(yang)價值和調(diao)查植物體內糖代謝都有重要意義。
利用(yong)80％乙(yi)醇可(ke)以把樣品中可(ke)溶性糖與淀粉分開，進(jin)一(yi)步(bu)采用(yong)酸(suan)水(shui)解法(fa)分解淀粉為葡(pu)萄糖，采用(yong)蒽(en)酮比色法(fa)測定葡(pu)萄糖含量，即可(ke)計(ji)算淀粉含量。
需自備的儀器和用品：
可(ke)見分(fen)光光度計、水浴鍋、可(ke)調式移液(ye)器(qi)、玻璃比色皿、研缽、冰(bing)、濃硫(liu)酸和蒸餾水。

操作步(bu)驟(zou)：
一、淀粉提取(qu)：

1. 稱取0.1g-0.2g樣(yang)品（建(jian)議稱取約0.1g樣(yang)本）于研缽中研碎(sui)，加入1mL試劑一，充(chong)分勻(yun)漿(jiang)后轉移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，常溫離心(xin)5min，棄上清，留沉淀。
2. 沉(chen)淀中加入0.5mL蒸餾(liu)水，放入95℃水浴中糊(hu)化15min（蓋緊，以(yi)防止水分散失）。
3. 冷卻后(hou)，加(jia)入0.35mL試劑二，25℃提(ti)取(qu)15min，振蕩3-5次。
4. 加入0.85mL雙蒸水(shui)，混勻，3000g，25℃離(li)心10min，取上清液待(dai)測(ce)。

二、測定操作(zuo)表：

1. 分(fen)管光度計(ji)預熱30min以上，調(diao)節(jie)波(bo)長620nm，蒸餾水調(diao)零。
2. 調節水浴鍋 95度。
3. 工(gong)作液的(de)配制：臨用前在(zai)試(shi)劑三(san)中加(jia)入3.75mL蒸餾水后，緩慢加(jia)入21.25mL濃硫酸(suan)，不斷攪拌(ban)，充分溶(rong)解，待用。用不完(wan)的(de)試(shi)劑4℃保存一周(zhou)。
4. 樣(yang)本測定(ding)：取50μL樣(yang)本和250μL工作(zuo)液EP管中，95度水(shui)浴10min（蓋緊(jin)，防(fang)止(zhi)水(shui)分(fen)散失），自然冷卻室溫，取200μL微量石(shi)英比色皿或96孔板中，在620nm波(bo)長下(xia)記錄測定(ding)吸光值A。

三、淀粉含量計算：
A、用微量石英比色皿測定的計算公式(shi)如下(xia)
標準條件下(xia)測定的回(hui)歸方程為(wei)y = 5.872x - 0.0295；x為(wei)標準品濃度（mg/mL），y為(wei)吸(xi)光(guang)值。

1. 按照蛋白(bai)濃度計算

淀粉(fen)含量(liang)（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷(V1×Cpr) =0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2. 按樣本鮮(xian)重計算

淀粉含量（mg/g 鮮重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷ (W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反應體系中樣本(ben)體積，0.05mL；V2：加入(ru)提取液體(ti)積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhi)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhi)量，g。
B、用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回(hui)歸方程為y = 2.936x - 0.0295；x為(wei)標準品濃(nong)度（mg/mL），y為(wei)吸光(guang)值。

3. 按(an)照蛋(dan)白濃(nong)度計算

淀(dian)粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷(V1×Cpr) =0.34×(A+0.0295) ÷Cpr

4. 按樣本鮮重計算

淀粉含(han)量（mg/g 鮮(xian)重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷ (W×V1÷V2) =0.578×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反應體(ti)系中樣本體(ti)積，0.05mL；V2：加入提取液體(ti)積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度(du)，mg/mL；W：樣本質量，g。
注意(yi)事項：

1. 由于工作液具有強腐蝕性，請謹慎操作。
2. 若吸(xi)光值大于(yu)1，請將樣本用(yong)提取液稀(xi)釋(shi)后再測定，計算公式(shi)中乘以相(xiang)應的稀(xi)釋(shi)倍數。
3. 提(ti)取(qu)液的配置：0.35mL試劑(ji)二+1.35mL水。用多(duo)少按照此比(bi)例(li)配多(duo)少。
4. 低(di)檢測限為10μg/g 鮮重或100ng/mg prot。

相關文獻：
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《Giant Pandas Are Macronutritional Carnivores》 作者:Yonggang Nie,Fuwen Wei 5,Wenliang Zhou,Yibo Hu,Alistair M. Senior,Qi Wu,Li Yan,David Raubenheimer 期刊:Curr. Biol. 影響因子:9.193 PMID:31056385

 

微量法 淀粉含量檢測試劑盒