產品名稱:游離膽固(gu)醇(FC)含量測(ce)定試劑盒 微量法(fa)
產品型號:BC1895
產品特點:游離膽固醇(FC)含量測定試劑盒 微量法品牌:Solarbio | 貨號:BC1895 檢測方法 : 微量法規格:100管/96樣
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游離膽固醇(FC)含量測定試劑盒 微量法
測定意義:FC是構成細胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。
測定原理: FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。
自備儀器和用品:水浴鍋、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
游離膽固醇(FC)含量測定試劑盒 微量法
分光光度法
注(zhu)意:正(zheng)式(shi)測定(ding)之(zhi)前(qian)選擇2-3個預(yu)期差異大(da)的樣本做(zuo)預(yu)測定(ding)。
貨號:BC1895
規格:100管/96樣
產品內容:
試劑一:異丙醇50mL(自(zi)備);
工作液:液體50mL×1瓶,4℃保(bao)存(cun);
標準品(pin):液體(ti)1mL×1支,濃(nong)度為5μmol/mL,4℃保存(cun)。
產(chan)品說(shuo)明: FC是構成細胞膜的主要(yao)(yao)成分,也是合成腎上(shang)腺(xian)皮質激素(su)、性激素(su)、膽汁酸及維(wei)生素(su)D等(deng)生理(li)活 性物(wu)質的重要(yao)(yao)原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。
測定原理: FC氧(yang)化酶催化FC生成△4-膽甾(zai)烯(xi) 酮和H2O2,過氧(yang)化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚(fen)生成紅色醌(kun)類化合物,在500nm有吸收(shou)峰, 其顏色深淺與FC含量成正(zheng)比。 自(zi)備儀器和用(yong)品: 水(shui)浴鍋、可調(diao)式移液槍、可見分(fen)光光度計、石英比色皿、異丙醇和蒸(zheng)餾水(shui)。
操作步驟:
一、FC的提取:
1. 組(zu)織:按照組(zu)織質(zhi)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(li)(建議稱取約0.1g組(zu)織,加入1mL 試劑一)進行冰浴勻(yun)漿。8000g,4℃離心10min,取上(shang)清(qing)置冰上(shang)待測。
2. 細(xi)(xi)菌、真菌:按照細(xi)(xi)胞數(shu)量(104個):試劑(ji)一體積(mL)為500~1000:1的比(bi)例(建議500萬細(xi)(xi) 胞加入(ru)1mL試劑(ji)一),冰浴(yu)超(chao)聲波破碎細(xi)(xi)胞(功率300w,超(chao)聲2秒,間隔3秒,總時(shi)間3min); 然后(hou)8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待(dai)測。
3. 血清(漿)樣品:直接測(ce)定(ding)。
二、測定操作:
1. 分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)預熱 30min,調節(jie)波長到 500nm,蒸(zheng)餾水調零。
2. FC 工作(zuo)液在(zai) 40℃水浴(yu)中預熱 30min。
3. 標(biao)準管(guan):依次在(zai) 1ml 玻璃比(bi)色皿(min)中加入 20μLFC 標(biao)準液和 980μLFC 工作液,5min 后于 500nm 測定 A 標(biao)準管(guan)。 標(biao)準管(guan)只需(xu)做 1-2 個。
4. 測(ce)(ce)定管(guan):依次在 1ml 玻璃比色(se)皿(min)中加入 20μLFC 測(ce)(ce)定液和(he) 980μLFC 工作液,5min 后于(yu) 500nm 測(ce)(ce)定 A 標準管(guan)。
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