糖代謝 β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒 

產品(pin)名稱(cheng): β-1,3葡(pu)聚(ju)糖酶(β-1,3-GA)活性檢測試劑盒

產品英文名: β-1,3-glucanase （β-1,3-GA）Assay Kit

產(chan)品貨號：BC0360      產(chan)地(di)：北京(jing)市(shi)通州(zhou)區馬駒橋(qiao)聯東(dong)U谷(gu)8三樓

產品規格：50管/24樣         產品商(shang)標：solarbio
保存(cun)(cun)與運輸：4℃保存(cun)(cun)或-20℃保存(cun)(cun)；            參(can)考價格：650
庫存狀態(tai)：現(xian)貨                          
關鍵字: 葡聚糖(tang)酶檢測(ce)試劑盒|β-1,3-GA檢測試劑盒|葡聚(ju)糖酶|試(shi)劑盒

簡(jian)要(yao)介紹(shao)：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在(zai)植(zhi)物中，催(cui)化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染(ran)病或處(chu)于其他逆境條件下，可(ke)誘導細胞大量合成β-1,3-GA，因(yin)此β-1,3-GA 活性測定廣泛應用(yong)于植物病理(li)和逆境生(sheng)理(li)研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，內切(qie)β-1,3-葡萄糖(tang)苷(gan)鍵，產(chan)生還原末端(duan)，通過測定(ding)還原糖(tang)生成速率，來計算(suan)其酶活性(xing)。


產品詳(xiang)細(xi)描述
產品內容：
提取液(ye)：液(ye)體(ti)50mL×1 瓶，4℃保存；
  試劑一：粉(fen)劑×1 瓶，4℃保(bao)存；臨用前加入3mL 蒸餾水，充分(fen)溶解待用；用不完的(de)試(shi)劑4℃保(bao)存；     
試劑二：液體42mL×1 瓶，4℃保存；
  標準品：粉(fen)劑×1支，4℃保存(cun)，含10mg無水葡萄糖（干燥失重<0.2%），臨用前加入1mL蒸餾水溶(rong)解(jie)，配(pei)制成10mg/mL葡萄糖溶(rong)液備用，4℃可保存1周，或(huo)者用飽和苯甲酸(suan)溶液溶解，可(ke)保存更長時間。
標(biao)準品準備：將標準品用蒸餾(liu)水稀(xi)釋1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/mL。

產品說明：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主(zhu)要(yao)存在(zai)植物中，催(cui)化β-1,3-葡(pu)萄糖苷(gan)鍵水解。在(zai)植物染病或處(chu)于其他逆境條件下，可(ke)誘導細胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性(xing)測(ce)定廣泛應用于植物病(bing)理和逆境生理研(yan)究(jiu)。
β-1,3-GA 水解昆(kun)布多糖，內切β-1,3-葡萄糖苷(gan)鍵，產生還原末端(duan)，通過測定還原糖生成速(su)率，來計算(suan)其(qi)酶活性。
需自備的(de)儀(yi)器和用品(pin)：
可見分光(guang)光(guang)度(du)計、臺式離(li)心機、水浴鍋、可調式移液器(qi)、1mL 玻(bo)璃比色皿、研(yan)缽、冰和蒸餾(liu)水。
操作(zuo)步驟：
一、粗(cu)酶(mei)液提取：
組織：按照組織質量（g）：提取液(ye)體積(mL)為(wei)1：5~10 的比例（建議(yi)稱取約0.1g 組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。12000g，4℃離(li)心10min，取上清，置(zhi)冰(bing)上待測。
    細菌或細胞：收集細(xi)菌或(huo)細(xi)胞到離心管(guan)內，離心后棄上清；按(an)照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液，超(chao)聲波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復30次）；12000g 4℃離心10min，取上清，置(zhi)冰上待測。
二、測定(ding)步驟：

1. 分光(guang)光(guang)度計預熱30min 以上(shang)，調節波長(chang)540nm，蒸餾(liu)水(shui)調零。
2. 樣本測定（在1.5mL EP 管中(zhong)依次加入下列試劑）：

充分(fen)混(hun)勻(yun)，沸水浴5min（蓋緊，防止水分(fen)散(san)失），流水冷(leng)卻，540nm 處記(ji)錄各(ge)管吸光值A，
如果吸光值大于2，可以用(yong)提取液(ye)對樣(yang)本(ben)稀釋后測定（計算公(gong)式乘以相應稀釋倍數），ΔA=A 測定-A對照(zhao)。每個測定管需設一個對照(zhao)管。
三(san)、β-1,3-GA 活(huo)性計算：
根據標準管(guan)吸光度x（A標準管-A空(kong)白(bai)管）和濃(nong)度（y，mg/mL）建立標準曲線(xian)，將ΔA帶(dai)入公式(shi)中計算出樣品(pin)中產生的還(huan)原(yuan)糖的含量y值（mg/mL）

1. 按蛋白濃(nong)度計算(suan)

單位(wei)的定(ding)義：每mg 組織蛋白每小時產(chan)生1mg 還原(yuan)糖定義為一個酶活(huo)性單(dan)位。
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y&times;V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr

1. 按(an)樣(yang)本鮮重計算

單位(wei)的(de)定義：每g 組織(zhi)每小時產生1mg 還原糖定義為一個酶(mei)活(huo)性單位。
β-1,3-GA(U/g 鮮重(zhong))=(y×V1)&divide;(W×V1&divide;V2)=y ÷W
(3) 按細菌或細胞數量計(ji)算
單位的定義：每1萬個細胞或細菌每小時產生1mg 還(huan)原糖定義為一個酶活性單位。
β-1,3-GA(U/10⁴ cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1：加(jia)入反應(ying)體(ti)系(xi)中(zhong)樣本體(ti)積(ji)，0.1mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋(dan)白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重(zhong)，g；500：細(xi)菌或細(xi)胞總數，萬。
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相關文獻：
《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影響因子:0.967 PMID:

糖代謝 β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒