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鈣熒光探針 Fluo 3-AM
貨號：F8840
規格：100ug/1mg
CAS：121714-22-5
別名 : 鈣熒光探針 鈣離子探針 
分子式 : C51H50Cl2N2O23 
分子量 : 1129.85 
儲存條件 : -20°C干燥避光保存，有效期12個月 
純度 : ≥90%(HPLC) 
外觀（性狀） :  紅色粉末 
單位 : 瓶

Fluo-3AM的理化性質(zhi)

    吸收(shou)波長/發射波長：506nm /526nm(低/高鈣(gai))

    建議使用(yong)DMSO作為溶(rong)媒。在溶(rong)解前，FLUO-3AM和DMSO均須放置室(shi)溫(wen)。溶(rong)解過程(cheng)可能會比(bi)較慢。用(yong)無水(shui)的(de)DMSO溶(rong)解的(de)FLUO-3AM長期保存(cun)，應(ying)嚴格密封(feng)，并(bing)保存(cun)于-20度。使用(yong)前，將保存(cun)液(ye)放置室(shi)溫(wen)后再打開(kai)。可避免(mian)AM探(tan)針(zhen)在長期的(de)保存(cun)過程(cheng)中水(shui)解。

Fluo-3AM的工作(zuo)原理(li)

    FLUO-3廣泛用(yong)(yong)于長(chang)波(bo)(bo)長(chang)的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)鈣(gai)指示劑(ji)。其(qi)(qi)在(zai)506NM處被吸收(shou)，可(ke)以(yi)被氬離(li)子激(ji)光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)488nm激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)激(ji)發(fa)(fa)，便于檢(jian)測。FLUO-3在(zai)沒有同(tong)鈣(gai)結(jie)(jie)合的(de)(de)情況下，無熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)產(chan)生。但是，在(zai)與鈣(gai)結(jie)(jie)合后，熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)（526nm）增強(qiang)少(shao)40倍。Fluo-3 AM是一(yi)種可(ke)以(yi)穿透(tou)細(xi)胞(bao)膜(mo)的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)染料。Fluo-3 AM的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)非常弱，其(qi)(qi)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)不會隨鈣(gai)離(li)子濃度升高而(er)增強(qiang)。Fluo-3 AM進(jin)入細(xi)胞(bao)后可(ke)以(yi)被細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)(de)酯酶剪切形成Fluo-3，從而(er)被滯(zhi)留在(zai)細(xi)胞(bao)內(nei)。Fluo-3可(ke)以(yi)和鈣(gai)離(li)子結(jie)(jie)合，結(jie)(jie)合鈣(gai)離(li)子后可(ke)以(yi)產(chan)生較(jiao)強(qiang)的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)，大激(ji)發(fa)(fa)波(bo)(bo)長(chang)為506nm，大發(fa)(fa)射波(bo)(bo)長(chang)為526nm。實際檢(jian)測時推薦使(shi)用(yong)(yong)的(de)(de)激(ji)發(fa)(fa)波(bo)(bo)長(chang)為488nm左右，發(fa)(fa)射波(bo)(bo)長(chang)為525-530nm。

Fluo-3AM的應用

1、過(guo)程概述

     用(yong)于細胞內鈣離子檢測(ce)時，Fluo-3 AM的常(chang)用(yong)濃度為5μM。通常(chang)用(yong)含有(you)5μM的Fluo-3 AM的適當溶液(ye)和(he)細胞一起在37℃孵育(yu)30-60分鐘進(jin)行(xing)(xing)熒光探針裝載，隨后(hou)適當洗滌(di)，洗滌(di)后(hou)可以考(kao)慮適當再孵育(yu)20-30分鐘以確保(bao)Fluo-3 AM在細胞內*轉變成Fluo-3。然后(hou)在流式細胞儀上進(jin)行(xing)(xing)檢測(ce)。

2、Fluo-3AM使用液的配置

     100ug的(de)(de)Fluo-3AM，分子量是1219.9。按實際需要的(de)(de)摩爾濃(nong)度(du)折算(suan)，無水(shui)DMSO溶(rong)解(jie)。一般配置成1~5mM的(de)(de)DMSO儲存液。如(ru)出現(xian)難(nan)溶(rong)現(xian)象，可(ke)以用(yong)20%的(de)(de)F127的(de)(de)DMSO溶(rong)液助溶(rong)。

相關文獻：

《Epigenetically upregulated oncoprotein PLCE1 drives esophageal carcinoma angiogenesis and proliferation via activating the PI-PLCε-NF-κB signaling pathway and VEGF-C/ Bcl-2 expression》 作者:Yunzhao Chen, Dandan Wang, Hao Peng, Xi Chen, Xueping Han, Jie Yu, Wenjie Wang, Lirong Liang, Zheng Liu, Yi Zheng, Jianming Hu, Lan Yang, Jun Li, Hong Zhou, Xiaobin Cui and Feng Li 期刊:Molecular Cancer 影響因子:10.679 PMID:30609930、
 

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