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Hoechst33342 熒光染料.

熒光染料在(zai)吸收(shou)紫外(wai)線或(huo)可見(jian)光(guang)后，能(neng)把短波(bo)(bo)長(chang)的(de)(de)光(guang)轉(zhuan)變為(wei)波(bo)(bo)長(chang)較長(chang)的(de)(de)可見(jian)光(guang)波(bo)(bo)而反射出來，呈(cheng)閃亮的(de)(de)鮮(xian)艷色彩。泛指吸收(shou)某(mou)一(yi)波(bo)(bo)長(chang)的(de)(de)光(guang)波(bo)(bo)后能(neng)發射出另(ling)一(yi)波(bo)(bo)長(chang)大于吸收(shou)光(guang)的(de)(de)光(guang)波(bo)(bo)的(de)(de)物質。它(ta)們大多是含有苯(ben)環(huan)或(huo)雜環(huan)并帶有共軛(e)雙鍵(jian)的(de)(de)化合物。

熒光染料的應用：

工業應用(yong)：熒(ying)(ying)光染料(liao)可用(yong)作洗衣粉(fen)中的增白劑、各(ge)種熒(ying)(ying)光路標漆(qi)等熒(ying)(ying)光染料(liao)產品的制備。此(ci)外(wai)還用(yong)于纖維織物印染和某些特(te)殊(shu)標志的制作。

科(ke)研(yan)應用(yong)(yong)：熒光染料(liao)在科(ke)研(yan)中(zhong)常用(yong)(yong)于熒光免疫、熒光探針、細(xi)胞(bao)染色(se)(se)等。包括特異性的(de)DNA染色(se)(se)，用(yong)(yong)于染色(se)(se)體分析(xi)、細(xi)胞(bao)周期(qi)、細(xi)胞(bao)凋亡等相關研(yan)究(jiu)。另有(you)很多核酸染料(liao)在多色(se)(se)染色(se)(se)系統中(zhong)是非常有(you)用(yong)(yong)的(de)復染劑，可作為(wei)背景對照，標記細(xi)胞(bao)核使細(xi)胞(bao)內結構的(de)空間關系一目了然。

在(zai)免疫分析中(zhong)熒光標記的(de)單克隆(long)抗(kang)體(ti)技術為流式(shi)細(xi)胞(bao)(bao)儀(yi)在(zai)研究細(xi)胞(bao)(bao)膜和細(xi)胞(bao)(bao)內各種功能性抗(kang)原、腫瘤(liu)基因(yin)蛋白等(deng)領(ling)域(yu)擴展了無限(xian)的(de)應用(yong)空間。熒光探針(zhen)可(ke)以通過(guo)蛋白質交聯劑共價結合在(zai)單克隆(long)抗(kang)體(ti)上。

在核酸(suan)檢測(ce)中(zhong)(zhong)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)染(ran)料對細(xi)胞(bao)核染(ran)色后定量(liang)測(ce)量(liang)細(xi)胞(bao)所發(fa)出的(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)強度，就(jiu)可以(yi)(yi)確定細(xi)胞(bao)核中(zhong)(zhong)DNA、RNA的(de)含量(liang)，并可以(yi)(yi)對細(xi)胞(bao)周期和(he)細(xi)胞(bao)的(de)增殖狀況進行分析(xi)。有多種熒(ying)(ying)光(guang)(guang)染(ran)料可以(yi)(yi)對細(xi)胞(bao)中(zhong)(zhong)的(de)DNA或RNA染(ran)色，常用的(de)DNA染(ran)料包括碘化丙啶(ding)(PI)、DAPI、Hoechst 33342等，RNA染(ran)料有噻唑橙、吖啶(ding)橙等。

常用熒光染料：

（一(yi)）免(mian)疫熒光標記常用(yong)的熒光染料

FITC（異(yi)硫氰酸(suan)熒光素(su)）：綠色530nm

PE（藻紅(hong)蛋白(bai)）：橙黃(huang)色575nm

PerCP（多甲(jia)藻黃素葉(xie)綠素蛋(dan)白）：深紅色675nm

PI（碘化丙啶）：橙(cheng)紅色(se)620nm488nm波長的氬離子(zi)激(ji)光激(ji)發

APC（別(bie)藻青蛋白）：紅(hong)色660nm630nm波長的氦氖激(ji)(ji)光(guang)或(huo)紅(hong)色二極管(guan)激(ji)(ji)光(guang)激(ji)(ji)發

Cy3：激發波(bo)長(chang)488nm，大(da)發射波(bo)長(chang)570nm。

1）其標記的抗體適用(yong)于(yu)所有配(pei)備488nm氬離子激(ji)光器的流式細(xi)胞儀；

2）FL2通道檢測(ce)；

3）為小分(fen)子(zi)染料，非常(chang)適合需小分(fen)子(zi)染料的流式細胞術，熒(ying)光強度低于PE。

Cy5：激發波長633/635nm，大發射(she)波長670nm。

1）其標記的(de)抗體適用于所有(you)配備(bei)633nm氬(ya)離子(zi)激(ji)光器的(de)流式(shi)細胞儀；

2）FL4通(tong)道檢測；

3）小(xiao)分(fen)子染(ran)料，非常適合需(xu)小(xiao)分(fen)子染(ran)料的流(liu)式細胞術，熒光強度低于APC。

4）與單核和粒細胞非特異性結(jie)合多，易出現(xian)假陽性結(jie)果。

（二）免疫熒光標記

常用的標(biao)記(ji)染色為直接(jie)免疫熒(ying)(ying)光染色和間接(jie)免疫熒(ying)(ying)光染色。在(zai)進(jin)行(xing)雙參數或多(duo)參數分析時，常常需(xu)要進(jin)行(xing)熒(ying)(ying)光抗體(ti)的組(zu)合標(biao)記(ji)，目前已經(jing)有雙色、三色以及四色標(biao)記(ji)。

（三）細胞自發熒光

自(zi)發熒(ying)光(guang)信號(hao)為噪(zao)聲信號(hao)，在(zai)多(duo)數(shu)情況下會干(gan)擾(rao)對(dui)特異熒(ying)光(guang)信號(hao)的(de)分辨和測(ce)(ce)量(liang)(liang)。在(zai)免疫細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)化(hua)學等(deng)測(ce)(ce)量(liang)(liang)中，對(dui)于結合水平不(bu)高(gao)(gao)的(de)熒(ying)光(guang)抗體來說(shuo)，如何提(ti)高(gao)(gao)信噪(zao)比是個(ge)關鍵。一般說(shuo)來，細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)成(cheng)分中能夠(gou)產生自(zi)發熒(ying)光(guang)的(de)分子（例如核黃(huang)素、細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)色素等(deng)）的(de)含(han)量(liang)(liang)越高(gao)(gao)，自(zi)發熒(ying)光(guang)越強(qiang)；培養細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)中死細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)／活細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)比例越高(gao)(gao)，自(zi)發熒(ying)光(guang)越強(qiang)；細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)樣品中所含(han)亮細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)比例越高(gao)(gao)，自(zi)發熒(ying)光(guang)越強(qiang)。

相關文獻:
《Hedgehog pathway inhibition causes primary follicle atresia and decreases female germline stem cell proliferation capacity or stemness》 作者:Yu Jiang, Dantian Zhu, Wenfeng Liu, Qiushi Qin, Zhi Fang and Zezheng Pan 期刊:Stem Cell Research & Therapy 影響因子:4.627 PMID:31277696
《IL-17A-stimulated endothelial fatty acid β-oxidation promotes tumor angiogenesis》 作者:Ruirui Wang,Xiaohan Lou,Guang Feng,Jinfeng Chen,Linyu Zhu,Xiaomeng Liu,Xiaohan Yao Pan Li,Jiajia Wan,Yi Zhang Chen Ni,Zhihai Qin 期刊:Life Sciences 影響因子:3.448 PMID:31085243
《Effect of sodium alginate on mouse ovary vitrification》 作者:Gang Liu，Shubin Li，Haihan Yuan，Mengrui Hao，Wurihan，Zhizhong Yun，Jie Zhao，Yuzhen Ma，Yanfeng Dai 期刊:Theriogenology 影響因子:2.299 PMID:29475128
 

Hoechst33342 熒光染料.