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鈣熒光探針 Fluo 3-AM 細胞檢測

鈣熒光探針 Fluo 3-AM 細胞檢測產品說明

Ø Fluo-3 AM 是常用(yong)的檢測細胞內(nei)鈣離子濃度的熒(ying)光(guang)探針之一。分子式為 C₅₁H ₅₀Cl ₂N ₂O ₂₃，分子量為

1129.85。

Ø Fluo-3 和 Fura-2 相比，其優(you)點是：一方面可(ke)以被氬(ya)離子激光(argon-ion laser) 的(de) 488nm 激(ji)發(fa)光激(ji)發(fa)，便于(yu)檢測；另一方面，Fluo-3 和鈣離(li)子(zi)結(jie)合后(hou)熒光變化更(geng)強(qiang)，即對鈣離(li)子(zi)濃度變化的檢測更(geng)加靈敏(min)；同時，Fluo-3 和鈣離子的結合能力較弱，這樣可以比 Fura-2 檢測到(dao)細胞內更高濃度的鈣(gai)(gai)離子(zi)水平；此外，對于細胞內的鈣(gai)(gai)離子(zi)的即時變化反應得更加準確，減小了因為(wei)和鈣離子解離速(su)度(du)慢而導致的熒光變化滯后。

Ø 本 Fluo-3 AM (鈣離子熒光探針) 是配制于無(wu)水DMSO (anhydrous DMSO)中的儲(chu)存液，濃度(du)為 5mM。

Ø Fluo-3 AM 是一種可以穿透(tou)細胞膜的熒光染(ran)料。Fluo-3 AM 的熒光非常弱，其熒光不會隨鈣離子濃度升(sheng)高而增強。

Fluo-3 AM 進入細(xi)胞后(hou)可以被(bei)細(xi)胞內的酯酶剪切形成 Fluo-3，從而被滯留在細胞內。Fluo-3 可以和鈣離子結合，結合鈣離子后可以產生較強的熒光，大激發(fa)波長(chang)為 506nm，大(da)發射波長為 526nm。實際檢測(ce)時(shi)推薦使(shi)用的(de)激發波長(chang)為(wei) 488nm 左右，發射波長為 525-530nm。

用于細胞(bao)內鈣離子檢測時，Fluo-3 AM 的常用濃(nong)度為 0.5-5μM 。通常用含有 0.5-5μM 的 Fluo-3 AM 的(de)適當溶液和細(xi)胞一起在 20-37℃孵育 15-60 分鐘進行(xing)熒光探針裝載，隨(sui)后適當洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)后可以(yi)考慮適當再孵(fu)育20-30 分鐘以確保Fluo-3 AM 在細胞(bao)內*轉(zhuan)變成(cheng) Fluo-3。

Ø 本(ben) Fluo-3 AM 在 4℃、冰(bing)浴等(deng)較低(di)溫度情況下會(hui)凝固而粘在(zai)離心(xin)管(guan)管(guan)底、管(guan)壁或管(guan)蓋內，可以 20-25℃水浴溫育片刻(ke)全部融(rong)解(jie)后使用。

Ø 熒光染料均存在淬滅問(wen)題，請盡量(liang)注意避光，以(yi)減緩熒光淬滅。

為了您的(de)安全(quan)和健康，請穿實驗(yan)服(fu)并戴(dai)一次性手套(tao)操作