產品名稱:重組牛(niu)腸激酶(mei)
產品型號:E8350
產品特點:索萊寶腸(chang)激酶(mei)是一種高(gao)純度(du)的(de)重組牛(niu)腸(chang)激酶(mei)。該(gai)酶(mei)經HPLC純化(hua),純度(du)高(gao),特(te)異性(xing)高(gao),并且(qie)不含(han)(han)其他蛋(dan)白酶(mei)。腸(chang)激酶(mei)(EC3.4.21.9)是一個特(te)定的(de)蛋(dan)白酶(mei),它(ta)可以切割前面含(han)(han)有四個天(tian)冬(dong)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)的(de)賴(lai)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)羧基端位(wei)(wei)點(dian):天(tian)冬(dong)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)-天(tian)冬(dong)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)-天(tian)冬(dong)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)-天(tian)冬(dong)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)-賴(lai)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)。腸(chang)激酶(mei)可去(qu)除(chu)位(wei)(wei)于(yu)蛋(dan)白質N-末端的(de)融合蛋(dan)白,以除(chu)去(qu)不需要(yao)的(de)融合標(biao)簽(qian)。
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索萊寶重組牛腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶。該酶經HPLC純化,純度高,特異性高,并且不含其他蛋白 酶。腸激酶(EC3.4.21.9)是一個特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點:天 冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-賴氨酸。腸激酶可去除位于蛋白質N-末端的融合蛋白,以除去不需要的 融合標簽。
來源:重組大腸桿菌 理論MW:25,850Da 活性:1U定義為在25℃,12h~16h之內,將50ug保存于25mMTris-HCl8.0緩沖液中的融合蛋白切割95%所 需的酶量。
高特異性
1)特定(ding)的蛋(dan)白(bai)酶,切割前面含有四個(ge)天冬氨(an)酸(suan)的賴(lai)氨(an)酸(suan)羧基端位點:天冬氨(an)酸(suan)-天冬氨(an)酸(suan)-天冬氨(an)酸(suan)-天冬 氨(an)酸(suan)-賴(lai)氨(an)酸(suan)(DDDDK)
2)不含(han)其他(ta)蛋(dan)白(bai)酶(mei),無非特異性切割
圖一:SDS-PAGE檢測結果,純化的腸激酶一個單一的主帶
圖二:1U的EK作用于50ug底物0min,10min,20min,30min,40min,50min,60min后的SDS-PAGE分析
圖三:1U,2U,5U,10U的EK作用于50ug底物4h后和1U的EK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析
在>200mM咪唑,或(huo)>200mMNaCl,或(huo)>5%甘油(you),酶切效(xiao)果受影響。
可(ke)參照以下推薦方法進行酶切:
1)為(wei)獲得理想酶切(qie)結果,請將(jiang)樣品(pin)透析到25mM Tris-HCl pH8.0緩沖液中,再進行酶切(qie)。
2)若不便透析,可將樣品稀釋,咪唑含量在(zai)100mM以(yi)下(xia)(xia),NaCl濃度在(zai)50mM以(yi)下(xia)(xia),甘油濃度小(xiao)于(yu)5%以(yi) 下(xia)(xia)進(jin)行酶(mei)切,酶(mei)的用量與(yu)蛋白的比例不變(即1U酶(mei)切50µg蛋白)。
3)如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種,且不便去除,此時適當增加酶量或延長酶切時間,也 可達到較好酶切效果。
具體參照索萊寶的使用說明
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