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核酸純化柱(大柱)

核酸純化的方法及原理如下：

一、PC抽提法

PC 抽提(ti)(ti)(ti)是(shi)(shi)去(qu)(qu)除(chu)(chu)(chu)蛋白(bai)質(zhi)有效的(de)(de)(de)(de)(de)手段，但超(chao)過了該飽和度，裂(lie)解體系(xi)中的(de)(de)(de)(de)(de)蛋白(bai)質(zhi)不會(hui)(hui)被(bei)一(yi)次(ci)去(qu)(qu)除(chu)(chu)(chu)，必(bi)須靠多次(ci)抽提(ti)(ti)(ti)，方(fang)可*去(qu)(qu)除(chu)(chu)(chu)。且每次(ci)抽提(ti)(ti)(ti)都會(hui)(hui)損失部(bu)分(fen)核(he)酸。另外(wai)，體系(xi)太(tai)粘稠的(de)(de)(de)(de)(de)壞(huai)處(chu)是(shi)(shi)，蛋白(bai)質(zhi)難(nan)以(yi)(yi)*去(qu)(qu)除(chu)(chu)(chu)，以(yi)(yi)及基因組 DNA 會(hui)(hui)斷裂(lie)得更厲害，所以(yi)(yi)要(yao)注意裂(lie)解液(ye)與樣品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)(de)比例。PC 抽提(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)另外(wai)一(yi)個(ge)用途是(shi)(shi)，利用酸性酚可以(yi)(yi)部(bu)分(fen)去(qu)(qu)除(chu)(chu)(chu) DNA 的(de)(de)(de)(de)(de)特點，在(zai) RNA 抽提(ti)(ti)(ti)時獲得 DNA 殘留(liu)極少(shao)的(de)(de)(de)(de)(de) RNA。不過有一(yi)點要(yao)提(ti)(ti)(ti)醒的(de)(de)(de)(de)(de)是(shi)(shi)，某些(xie)植物(wu)樣品(pin)(pin)，在(zai)去(qu)(qu)除(chu)(chu)(chu)某些(xie)雜質(zhi)之前(qian)，是(shi)(shi)不能(neng)使用 PC 抽提(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)，否則核(he)酸必(bi)定降解。PC抽提(ti)(ti)(ti)大的(de)(de)(de)(de)(de)優勢是(shi)(shi)成本低廉，對實驗條(tiao)件要(yao)求較低，對于(yu)經費緊張的(de)(de)(de)(de)(de)實驗室較為實用。

二、高鹽沉淀法

高(gao)鹽沉淀(dian)蛋(dan)白質(zhi)/醇沉淀(dian)方(fang)(fang)(fang)法(fa)，同樣(yang)也是(shi)一個非常不(bu)(bu)錯的(de)(de)方(fang)(fang)(fang)法(fa)。與 PC 抽(chou)(chou)提方(fang)(fang)(fang)法(fa)相比(bi)，除了(le)純(chun)(chun)度(du)的(de)(de)穩(wen)定性可(ke)能(neng)要低一點外，該方(fang)(fang)(fang)法(fa)幾乎克服了(le) PC 抽(chou)(chou)提的(de)(de)所有(you)缺點。更快、更輕松的(de)(de)去除蛋(dan)白質(zhi)所可(ke)以用于大規模抽(chou)(chou)提，但其不(bu)(bu)足之處是(shi)純(chun)(chun)度(du) (蛋(dan)白質(zhi)殘留) 不(bu)(bu)夠(gou)穩(wen)定，蛋(dan)白質(zhi)的(de)(de)沉淀(dian)效(xiao)率在4℃會更好一些。

三、離心柱法

離(li)心(xin)柱純(chun)化法，是目前(qian)試劑盒提(ti)取廣(guang)泛應(ying)用的(de)(de)方法。其(qi)(qi)大特點是受人為操作因素影響小(xiao)，純(chun)度的(de)(de)穩定性很高 (雖然純(chun)度不一定比PC 純(chun)化方法更高)。加(jia)入(ru)(ru)的(de)(de)液(ye)體通過(guo)離(li)心(xin)后會進入(ru)(ru)另外(wai)一個離(li)心(xin)管中(zhong)，與含有核酸的(de)(de)柱子*是分開(kai)的(de)(de)，所(suo)以洗滌更*。其(qi)(qi)致命(ming)弱(ruo)點是樣品過(guo)量，提(ti)取效(xiao)率較低(di)，且需要反復離(li)心(xin)，操作復雜，成本也較高。

四、生物磁珠法

生物磁珠法(fa)是將(jiang)純化介質包被在納(na)米級生物磁珠表面，通過(guo)介質對核(he)酸(suan)的吸附(fu)(fu)，在外加磁場下使核(he)酸(suan)附(fu)(fu)著于(yu)磁珠定(ding)向移動，從而達到固液分離純化的作用。與其他幾(ji)種方法(fa)相(xiang)比，生物磁珠法(fa)具有(you)很多(duo)*的優勢，如(ru)：

①提(ti)取靈(ling)敏度高（微量(liang)材料即可提(ti)取）

②純化純度高（*與蛋白鹽等雜質分離）

③提取產量高（每mg磁珠能吸附(fu)500ug DNA）

核酸純化柱(大柱)

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