產品名稱：土壤中性蛋(dan)白酶活性檢測(ce)試劑盒 微量法
產品型號：BC0275
產品報價：
產品特點：土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法測定意義：土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化，其水解產物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性環境下催化蛋白質水解，與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。
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土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法
土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
產(chan)地(di)：北京市通州(zhou)區馬(ma)駒橋(qiao)聯東U谷8三樓
英文名稱：Soil neutral protease activity detection kit
產品商標：solarbio
注意：正式測定之前(qian)選擇2-3 個預期差異大的樣(yang)本做預測(ce)定。
貨(huo)號：BC0275
規格：100T/48S
保存與運輸(shu)：4℃保存(cun)或-20℃保存(cun)；
參考價(jia)格：1380
庫(ku)存狀態：現貨
關鍵詞：土壤中性蛋白酶|土壤中性蛋白酶活性檢測|蛋白酶活性檢測
產品(pin)內容：
試劑一(yi)：液體20mL×1 瓶(ping)，4℃保存；
試劑(ji)二(er)：粉劑(ji)×1 瓶，4℃保(bao)存；臨用前加(jia)入10mL試(shi)劑一，沸水浴攪拌溶解后待用；
試(shi)劑三：粉劑×1 瓶(ping)，4℃保存(cun)；臨用(yong)(yong)前加入10mL 蒸(zheng)餾水充分溶解待用(yong)(yong)；
試劑四：液體20mL×1 瓶，4℃保(bao)存；
試(shi)劑(ji)五：液體5mL×1 瓶，4℃保存；
標準品：液體1mL×1 支(zhi)，0.2 μmol/mL 酪氨酸溶(rong)液(ye)，4℃保存。
產品說明：
土(tu)壤蛋(dan)白(bai)(bai)酶(mei)參(can)與(yu)土(tu)壤中存在(zai)(zai)的(de)(de)氨基酸、蛋(dan)白(bai)(bai)質以及其(qi)他含蛋(dan)白(bai)(bai)質氮的(de)(de)有機化合(he)物的(de)(de)轉化，其(qi)水解(jie)產物是高(gao)等植物的(de)(de)氮源之一。土(tu)壤中性蛋(dan)白(bai)(bai)酶(mei)在(zai)(zai)中性環(huan)境下(xia)催化蛋(dan)白(bai)(bai)質水解(jie)，與(yu)土(tu)壤有機質含量(liang)、氮素(su)及其(qi)他土(tu)壤性質有關。中性條(tiao)件下(xia)，土(tu)壤中性蛋(dan)白(bai)(bai)酶(mei)可將酪蛋(dan)白(bai)(bai)水解(jie)產生酪氨酸；在(zai)(zai)堿性條(tiao)件下(xia)，酪氨酸還原磷(lin)鉬(mu)酸化合(he)物生成鎢藍，在(zai)(zai)680nm 有特征吸收峰。
實驗(yan)中所需(xu)儀器及設(she)備：
可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計/酶(mei)標儀、水(shui)浴(yu)鍋、可調式移(yi)液槍、微(wei)量比色皿/96孔板、甲苯、蒸(zheng)餾水(shui)、50目篩（或(huo)更小）。
樣(yang)品處理：
新鮮土樣自然風干或37℃烘(hong)箱風干(gan)，過30~50 目(mu)篩(shai)。
操作步驟(zou)：
1、分光光度計(ji)/酶(mei)標(biao)儀預(yu)熱30min 以上，調節(jie)波長680nm，蒸餾(liu)水調零(ling)。
2、樣(yang)本測(ce)定(ding)：
試劑名稱 測定管(guan)(guan) 對照(zhao)管(guan)(guan) 標準管(guan)(guan) 空(kong)白管(guan)(guan)
風干土樣（g） 0.05 0.05 - -
試劑(ji)一（μL） 50 50 - -
試劑(ji)二（μL） 100 - -
混勻后，37℃反(fan)應(ying)24h，期(qi)間振蕩5-6 次，使土樣與反(fan)應(ying)液充分接(jie)觸。
試劑三(san)（μL） 100 100 - -
試劑(ji)二（μL） - 100 - -
混勻(yun)，10000rpm 室(shi)溫離心(xin)10min，取(qu)上(shang)清液
上(shang)清液（μL） 44 ; 44 - -
標準液（μL） - - 44 -
蒸餾水(shui)（μL） - - - ; 44
試劑四（μL） 130 130 130 130
試劑五（μL） 26 26 ; 26 26
混勻，40℃水浴10min，10000rpm 室溫離心(xin)10min，取上清液于680nm 下讀取各管(guan)(guan)吸光值A，分別記為(wei)A 測(ce)定(ding)管(guan)(guan)、A 對照管(guan)(guan)、A 標(biao)準(zhun)管(guan)(guan)、A 空白管(guan)(guan)，計算ΔA 測(ce)定(ding)=A 測(ce)定(ding)管(guan)(guan)-A 對照管(guan)(guan)，ΔA 標(biao)準(zhun)=A 標(biao)準(zhun)管(guan)(guan)-A 空白管(guan)(guan)。
注意：標(biao)準管(guan)、空白管(guan)只需測一(yi)(yi)次。每個測定管(guan)設一(yi)(yi)個對照管(guan)。
土壤中性蛋白(bai)酶活性計算：
單位(wei)定(ding)義：每天每g土(tu)樣中(zhong)產生1μmol 酪氨(an)酸為一個(ge)土(tu)壤中(zhong)性蛋白酶活力單(dan)位。土(tu)壤中(zhong)性蛋白酶(U/g)=C標準×ΔA測(ce)定÷ΔA標準×V 反總(zong)÷W÷T= 0.05×ΔA測(ce)定÷ΔA標準÷W。
C 標(biao)準(zhun)管(guan)：標(biao)準(zhun)管(guan)濃(nong)度(du)，0.2 μmol/mL；
V 反總(zong)：反應(ying)體系總(zong)體積，0.25mL；
T：反(fan)應時間，1d；
W：樣本質量(liang)，g。
注意事(shi)項：
1、當(dang)吸光(guang)值大于1.5時，建議(yi)將上清液(ye)稀釋后進行測(ce)定，計(ji)算(suan)時注意(yi)乘(cheng)以(yi)稀釋倍數。
相關文獻：
《Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi》 作(zuo)者(zhe):Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, Ying Teng,Zhihong Xu 期刊:Environmental Science and Pollution Research 影響因子(zi):2.914 PMID:29860689
土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法
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