脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒

產品名(ming)稱:脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒

產品英文名(ming): Proline (PRO) Content Assay Kit

產品(pin)貨(huo)號：BC0290           產地：北京市通州區馬駒(ju)橋(qiao)聯東U谷8三樓

產品規格：50管/48樣        產(chan)品商標：solarbio
保(bao)(bao)存(cun)與運輸(shu)：4℃保(bao)(bao)存(cun)或-20℃保(bao)(bao)存(cun)；            參考(kao)價格：720
庫存(cun)狀態(tai)：現貨                          
關鍵字: ：  脯氨酸(suan)檢測試劑盒|PRO檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒|脯氨(an)酸|試劑(ji)盒

簡要(yao)介紹：
Pro 廣泛存在于動(dong)物(wu)、植(zhi)物(wu)、微生物(wu)和(he)培養(yang)細胞中，逆(ni)境條件(jian)下(xia)，植(zhi)物(wu)體內Pro 含量(liang)顯著增(zeng)加(jia)(jia)。Pro 增(zeng)加(jia)(jia)量(liang)在一定程(cheng)度上(shang)反映了抗(kang)逆(ni)性(xing)(xing)，抗(kang)旱性(xing)(xing)強的品(pin)種往往積累較多的脯(fu)氨(an)酸(suan)。因此，脯(fu)氨(an)酸(suan)增(zeng)加(jia)(jia)量(liang)可以作為抗(kang)逆(ni)育種的生理指(zhi)標之一。
    用磺(huang)基水楊酸（SA）提(ti)取Pro，加熱處理后(hou)，Pro 與酸性茚三酮溶液反應生(sheng)成紅(hong)色；加甲(jia)苯萃取后(hou)，在520nm 測定吸(xi)光度(du)。

產品詳(xiang)細描(miao)述
產品內(nei)容(rong)：
提取(qu)液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一(yi)：冰乙(yi)酸4℃保存。（自備）
試劑二：液體45 mL×1瓶， 4℃保存。
試劑(ji)三：甲苯4℃保(bao)存。（自(zi)備）
標準品(pin)：脯氨酸 10mg，4℃保(bao)存。

產(chan)品說明：
脯氨(an)酸(suan)(Pro)廣泛存在于(yu)動物、植(zhi)物、微生物和(he)培(pei)養細(xi)胞中，逆境條件下，植(zhi)物體內(nei)Pro含量顯著增加。Pro增(zeng)加(jia)量在一定(ding)程(cheng)度上反映了抗(kang)逆性，抗(kang)旱性強的(de)品種往往積累(lei)較(jiao)多的(de)脯(fu)氨(an)酸。因(yin)此(ci)，脯(fu)氨(an)酸增(zeng)加(jia)量可以作為抗(kang)逆育種的(de)生理指(zhi)標之一。 
用(yong)磺基水楊酸（SA）提取Pro，加熱處理后，Pro與酸性茚三酮溶(rong)液反應生成(cheng)紅色(se)；加甲(jia)苯(ben)萃取后(hou)，在520nm測定吸光度。
實驗(yan)需自備的儀器和用品：
 可(ke)見分光光度計、水浴鍋(guo)、臺式離心機、可(ke)調(diao)式移液器、1 mL玻璃比色(se)皿、冰乙酸、甲苯(ben)、研缽(bo)、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一(yi)、樣品測定(ding)的(de)準(zhun)備 
1、細胞、細菌或組織樣品的制備(bei) ： 
細(xi)菌(jun)或細(xi)胞：先收集細(xi)菌(jun)或細(xi)胞到離心管內，棄上清；按照每(mei)100萬細菌(jun)或細胞加入(ru)1mL提取液，超聲(sheng)波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3秒，間隔(ge)10秒，重復30次），之后置(zhi)沸水浴振蕩提取10min；10000g，常溫(wen)離心(xin)10min，取上(shang)清，冷卻后待測(ce)。
組織(zhi)：稱(cheng)取約0.1g組織，加(jia)入(ru)1mL提取(qu)液進(jin)行冰(bing)浴勻漿(jiang)；之后置沸水浴振(zhen)蕩(dang)提取(qu)10min，10000g，常溫離心(xin)10min，取(qu)上清，冷卻后待測。
2、血清（漿）樣品：取100μL血清(qing)（漿）加(jia)入(ru)0.9mL提取(qu)液，充分(fen)混勻，之后置沸水(shui)浴振(zhen)蕩提取(qu)10min，10000g，常溫離心(xin)10min，取上清，冷卻后待測。
3、標準品的處理：稱取1mg，將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/mL。
 

• 測定步驟(zou)

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長520nm，甲苯調零。
2、取(qu)0.5mL上清(qing)液（或稀釋后的標準品）+0.5mL試劑一+0.5mL試劑(ji)二于有蓋試管中(zhong)，置沸水浴中(zhong)保溫30min（蓋緊，防(fang)止水分散失），每10min振蕩(dang)一次(ci)。
3、待冷(leng)卻后，在試管中加入(ru)1mL試劑(ji)三，振(zhen)蕩30s，靜置片(pian)刻，使(shi)色素轉試劑三中(zhong)；吸取0.8mL-1mL上(shang)層溶液于1mL玻(bo)璃比色皿(min)中，于520nm波長處比(bi)色，記錄吸光值。
4、根據標準(zhun)品吸光(guang)值和濃度，建立標準(zhun)曲(qu)線。

三、Pro含量計(ji)算：
1、通過標(biao)準曲線(xian)計算(suan)樣品脯氨(an)酸含量(y為(wei)脯氨酸含量(liang)，μg/mL；x為OD值)
2、按(an)照細(xi)菌(jun)、細(xi)胞個數或者(zhe)組織鮮重計算，先根據標準曲線求得y值：
細胞或細菌中(zhong)脯氨酸含量(μg/10⁴ cell)= y÷細胞濃度(du)(10⁴ cell/mL)
Pro含量(μg/g mass) =y÷樣本鮮重(zhong)(g/mL)
3、血(xue)清（漿(jiang)）中脯(fu)氨酸(suan)含量，先根據標準(zhun)曲線求得y值：
Pro含量[μg/mL血清(qing)（漿）] = y÷0.1mL血清（漿）/mL
注意：提(ti)取液中含有蛋白沉淀劑，提(ti)取的上清(qing)液不(bu)能用于蛋白濃度的測定。
 

相關文獻：

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