產品名稱:谷草轉氨酶(GOT)活性檢測試劑盒

產品英文名: Glutamic-oxalacetic Transaminase（GOT）Assay Kit

產品(pin)貨號：BC1560               產(chan)地：北京市(shi)通州區(qu)馬駒橋(qiao)聯東U谷8三樓(lou)

產品(pin)規格：50管/24樣            產(chan)品商(shang)標：solarbio
保存(cun)與運輸(shu)：4℃保存(cun)或-20℃保存(cun)；            參考價格(ge)：130
庫存狀態(tai)：現貨                          
關鍵(jian)字: ：  谷草轉氨酶(mei)檢測試劑(ji)盒(he)|GOT檢測試劑盒|谷(gu)草(cao)轉氨(an)酶(mei)|試(shi)劑盒

簡要介紹：
GOT（ 2.6.1.1）廣泛存在(zai)于動物(wu)、植物(wu)、微(wei)生(sheng)物(wu)和培養細(xi)胞(bao)中，催化可逆轉(zhuan)氨(an)基(ji)反應，是氨(an)基(ji)酸代謝的重要酶(mei)。此外，GOT 在(zai)心(xin)肌細(xi)胞(bao)中含量高(gao)，臨床上一般常作為心(xin)肌梗塞和心(xin)肌炎的輔助檢(jian)查。肝臟損害時(shi)其(qi)血(xue)清濃度也(ye)可升高(gao)。
    GOT 催(cui)化 α-同戊二(er)酸和(he)天門冬氨酸發生(sheng)(sheng)轉氨基(ji)反應，生(sheng)(sheng)成(cheng)谷氨酸和(he)草酰乙(yi)酸，草酰乙(yi)酸進一步自行脫羧(suo)生(sheng)(sheng)成(cheng)丙(bing)tong酸；丙(bing)tong酸可(ke)與2,4-二(er)硝基(ji)ben肼反應生(sheng)(sheng)成(cheng)2,4-二(er)硝基(ji)ben腙，在堿性條(tiao)件下顯棕紅色(se)；測定(ding)505nm 吸(xi)光度的變(bian)化，即可(ke)計算GOT 酶活(huo)力。

產品詳(xiang)細描述
產品內容：
提取(qu)液：液體30mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液(ye)體8 mL×1瓶(ping)， 4℃保(bao)存；
試劑二：液體8mL×1瓶， 4℃保存；
試劑三：液體(ti)80 mL×1瓶，4℃保存；
標準品：液體1mL×1支，20μmol/mL丙tong酸鈉(na)標準品，4℃保(bao)存。
產品(pin)說明(ming)：
GOT（ 2.6.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞(bao)中，催化(hua)可逆(ni)轉氨(an)基反(fan)應，是氨(an)基酸代謝的(de)重要酶。此(ci)外，GOT在心肌細(xi)胞中含量高，臨床上(shang)一般常(chang)作為(wei)心肌梗塞和心肌炎(yan)的(de)輔助(zhu)檢查。肝臟損害時其(qi)血清濃度也可升高。
GOT催化 α-酮戊二(er)酸(suan)(suan)(suan)和(he)天門冬氨酸(suan)(suan)(suan)發生(sheng)轉氨基(ji)反應(ying)，生(sheng)成(cheng)谷氨酸(suan)(suan)(suan)和(he)草酰乙(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)，草酰乙(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)進一步(bu)自(zi)行(xing)脫羧生(sheng)成(cheng)丙tong酸(suan)(suan)(suan)；丙tong酸(suan)(suan)(suan)可與(yu)2,4-二(er)硝基(ji)ben肼(jing)反應(ying)生(sheng)成(cheng)2,4-二(er)硝基(ji)ben腙，在堿性(xing)條件下顯(xian)棕紅色；測定505nm吸光度的變化，即可計算GOT酶活力。
實驗需(xu)自備的儀器和(he)用品：
可見分光(guang)光(guang)度計、水浴(yu)鍋、臺(tai)式(shi)離心機、可調式(shi)移(yi)液器、1 mL玻璃比色皿、研缽(bo)、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品測定的(de)準備 
1、 細(xi)胞或微生物樣品(pin)的制備 ：
先收集細胞或(huo)微生物樣品(pin)到(dao)離心管內，棄上清，按照(zhao)每(mei)500萬細胞或(huo)微生物加入1mL提(ti)取液(ye)，超(chao)(chao)聲波破碎細菌或(huo)細胞（功率20％，超(chao)(chao)聲3s，間隔(ge)10s，重復30次）。3500g，4℃離心10min，取上(shang)清，置冰上(shang)待測。
2、組織：
稱(cheng)取約0.1g組(zu)織，加(jia)入1mL提取液進冰浴行(xing)勻漿(jiang)。3500g  4℃離心10min，取上清，置冰上待測(ce)。
3、血清（漿）樣品：直(zhi)接檢測。
二、測定(ding)操作表

1. 分光光度計預熱30min以(yi)上，調節(jie)波長505nm，蒸(zheng)餾水(shui)調零。
2. 標準曲線的測定

先將標準品(pin)稀釋20μmol/mL，按下(xia)表 混合(he)標準品(pin)和試劑一(yi)得(de)到相(xiang)應(ying)濃度標準管：

3、在EP管中加入下列試劑(ji)

混(hun)勻(yun)后，37℃（哺乳動物）或25℃（其它(ta)物(wu)種）預熱(re)30min

混勻(yun)后，37℃（哺(bu)乳動物）或25℃（其它(ta)物種）準確水(shui)浴20min

混(hun)勻，室(shi)溫放置10min，在(zai)505nm波長處，測各管吸光度(du)。
注：0μmol/mL 標(biao)準(zhun)管(guan)為空白管(guan)。
三(san)、計算

1. 標準(zhun)曲線的(de)繪(hui)制：

以各標準(zhun)溶液濃度為x軸，以?A（A標準(zhun)管(guan)-A空白管(guan)）為y軸做標準(zhun)曲線，得到方(fang)程y=kχ+b。將（A測定(ding)管(guan)-A對照(zhao)管(guan)）帶入方(fang)程求x值。

1. GOT活性計(ji)算：

（1）按樣本鮮重(zhong)計算：
單(dan)位(wei)定義(yi)：每小時每g鮮重樣品催(cui)化(hua)產(chan)生1μmol丙tong酸的(de)量為一個GOT活力單(dan)位(wei)。
GOT（U/g鮮(xian)重(zhong)）=x×（V樣(yang)本+V試劑一）÷（W×V樣(yang)本÷V樣(yang)總(zong)）÷T=12x÷W。
（2）按(an)樣本蛋白(bai)濃度計算：
單位(wei)定義：每小(xiao)時每mg組織(zhi)蛋白催化產生1μmol丙tong酸的量為一個GOT活力單位(wei)。
GOT（U/mg prot）=x×（V樣(yang)本+V試劑(ji)一(yi)）÷（Cpr×V樣(yang)本）÷T=12x÷Cpr。
（3）按(an)血(xue)清體(ti)積計(ji)算：
單(dan)位定義：每小時每mL血清(qing)樣品(pin)催化(hua)產生1μmol丙(bing)tong酸的量(liang)為一(yi)個GOT活(huo)力單(dan)位。
GOT（U/mL）=x×（V樣本+V試劑一）÷V樣本÷T=12x。
（4）按細胞數量計(ji)算：
單位定義(yi)：每(mei)小時每(mei)10⁴個細胞樣(yang)品催化產生1μmol丙tong酸的(de)量為一個GOT活力單位。
GOT（U/10⁴ cell）=x×（V樣本+V試劑一）÷（V樣(yang)(yang)本÷V樣(yang)(yang)總×500）÷T=0.024x。
V樣(yang)(yang)本(ben)(ben)：吸(xi)取(qu)樣(yang)(yang)本(ben)(ben)體(ti)積(ji)(ji)，0.02mL；V試劑一(yi)：吸(xi)取(qu)試劑一(yi)體(ti)積(ji)(ji)，0.1mL；V樣(yang)(yang)總：吸(xi)取(qu)提取(qu)液體(ti)積(ji)(ji)，1mL；W：樣(yang)(yang)本(ben)(ben)鮮重，g；Cpr：樣(yang)(yang)本(ben)(ben)蛋白質濃度，mg/mL；T：反應(ying)時(shi)間，0.5h；500：細(xi)胞個數，以萬計。

相關文獻：
《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影(ying)響(xiang)因子:5.646 PMID:30373678

谷草轉氨酶(GOT)活性檢測試劑盒