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多聚半乳糖醛酸酶(PG)檢測試劑盒

多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
貨號: BC2660
規格:50T/24S

產品簡介：
多聚半乳糖醛酸酶（Ploygalacturonase, PG）屬果膠酶的一種，廣泛存在于植物、細菌及真菌中。其催化多聚半乳糖醛酸分解，在果實軟化、花粉授粉、種子發育成熟及器官脫落等方面具有重要作用，并且病原菌在侵染宿主植物時，可分泌多聚半乳糖醛酸酶來降解宿主細胞壁，進而導致病程發展。
PG 解多聚半乳糖(tang)醛酸(suan)生成(cheng)半乳糖(tang)醛酸(suan)，半乳糖(tang)醛酸(suan)與 DNS 試劑反應生成(cheng)在 540 nm 有特征吸收峰(feng)的棕紅色(se)物質，測定 540 nm 處吸光值(zhi)變化可計算得果膠酶活(huo)性。

試驗中所需的儀器和試劑：
可(ke)見分光光度計、低溫臺式離心(xin)機、水(shui)浴鍋、1 mL 玻(bo)璃比色皿、可(ke)調式移液(ye)槍(qiang)、研缽/勻漿器、冰和蒸(zheng)餾水(shui)。

產品內容：
提取液：液體 30 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 8 mL×1 瓶，4℃保存。若溶液中有晶體析出，37℃水浴溶解。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入 8 mL 蒸餾水，60℃水浴助溶。
試劑三：液體 20 mL×1 瓶，4℃避光保存。
標(biao)準(zhun)品：粉(fen)劑×;1 支，10 mg 半乳糖醛酸，4℃保存。臨用前加入 0.943 mL 蒸餾水，配(pei)成 50 μmol/mL的標(biao)準(zhun)液(ye)。

操作步驟：

一、粗酶液提取：
組織：按照質量（g）: 蒸餾水體積(mL)為 1 : 5~10 的比例（建議稱取約 0.1 g，加入 1 mL 提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于 4℃，16000 g，離心 10 min，取上清置于冰上待測。
細菌：先收集細菌到離心管內，離心后棄上清；按照細菌數量（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000︰1 的比例（建議 500 萬個細菌加入 1 mL 提取液），冰浴超聲波破碎細菌（功率 20%或 200 W，超聲 3 s，間隔 7 s，總時間 5 min）；然后 4℃，16000 g，離心 10 min 取上清置于冰上待測。
液體：直接(jie)檢測或用提取(qu)液稀釋后(hou)檢測。

二、測定步驟：
1、 分光光度計預熱 30 min 以上，調節波長 540 nm，蒸餾水調零。
2、 將 50 μmol/mL 標準液稀釋為 10、6、4、3、2、1.5、1.2 μmol/mL 的標準溶液備用。
3、 操作表：(在(zai) 1.5mL 離心管中(zhong))

相關文獻：

《Functional analysis of the exocyst subunit BcExo70 in Botrytis cinerea》 作者:Wenqing GuanJuan FengRongxia WangZhiwei MaWeixia WangEmail authorKun WangEmail authorTingheng Zhu 期刊:Current Genetics 影響因子:3.464 PMID:31183512
 

多聚半乳糖醛酸酶(PG)檢測試劑盒