谷胱甘肽S-轉移酶(GST)活性檢測試劑盒

產品名稱：谷胱甘肽S-轉移酶(GST)活性檢測試劑盒

產品英文名：Glutathione S-transferase （GST）Assay Kit

產(chan)品貨(huo)號：BC0350                產地：北京市通州區馬駒橋聯(lian)東U谷8三樓

產(chan)品規格：50管/48樣(yang)            產品(pin)商標：solarbio
保存與運(yun)輸(shu)：4℃保存或(huo)-20℃保存；            參考價格：260
庫(ku)存(cun)狀態：現貨     ;                     
關(guan)鍵字：谷胱甘(gan)肽(tai)S-轉移(yi)酶| GST活性檢測|試劑(ji)盒| 

簡要介紹：
GST是(shi)一(yi)種具(ju)有多種生(sheng)理(li)功能(neng)的(de)蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)(zhi)家族，主(zhu)要存在于(yu)細胞質(zhi)(zhi)內。GST是(shi)體內解毒酶(mei)系統的(de)重(zhong)要組成部分，主(zhu)要催化(hua)(hua)各種化(hua)(hua)學物(wu)質(zhi)(zhi)及(ji)其(qi)代謝產(chan)物(wu)與GSH的(de)巰(qiu)基(ji)共價結合，使親(qin)電化(hua)(hua)合物(wu)變為親(qin)水物(wu)質(zhi)(zhi)，易于(yu)從膽汁或尿液(ye)中(zhong)排泄，達到(dao)將體內各種潛在或具(ju)備毒性的(de)物(wu)質(zhi)(zhi)降(jiang)解并排出體外的(de)目的(de)。因此，GST在保護細胞免受(shou)親(qin)電子(zi)化(hua)(hua)合物(wu)的(de)損(sun)傷中(zhong)發揮著(zhu)重(zhong)要的(de)生(sheng)物(wu)學功能(neng)。此外，因為GST具(ju)有GSH-Px活性，亦稱(cheng)為non-Se GSH-Px，具(ju)有修(xiu)復氧化(hua)(hua)破壞的(de)大分子(zi)如DNA、蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)(zhi)等(deng)的(de)功能(neng)。注意，GST催化(hua)(hua)的(de)反應減少GSH含量，但是(shi)不增加(jia)GSSG含量。 
產品(pin)詳細描述(shu)

商(shang)品貨(huo)號：	商品品牌：	規格	基本售(shou)價：	選(xuan)擇規格
BC0350-50管/48樣	Solarbio	50管/48樣	260.00元

產品內(nei)容： 
試(shi)劑一：液(ye)體 50mL×1 瓶(ping)，4℃保存(cun)。
試劑二：液體 45mL×1 瓶，4℃保存。
試(shi)劑三：粉劑×1 瓶(ping)，4℃保存。臨用前加 5 mL 蒸餾水溶解。

產品(pin)說明： 
谷胱甘(gan)肽 S-轉移酶(mei)(mei)（glutathione S-transferase，GST）是(shi)一(yi)種(zhong)具有(you)(you)多種(zhong)生理功(gong)能(neng)的(de)(de)蛋白(bai)質家族， 主要存在于細胞質內。GST 是(shi)體(ti)內解毒酶(mei)(mei)系統的(de)(de)重要組(zu)成(cheng)部分，主要催(cui)化各種(zhong)化學物(wu)(wu)質及其代謝產 物(wu)(wu)與(yu) GSH 的(de)(de)巰基共價(jia)結合(he)，使(shi)親(qin)(qin)電(dian)化合(he)物(wu)(wu)變為親(qin)(qin)水物(wu)(wu)質，易于從膽(dan)汁或尿液中排(pai)(pai)泄，達到將體(ti)內 各種(zhong)潛在或具備(bei)毒性的(de)(de)物(wu)(wu)質降解并(bing)排(pai)(pai)出體(ti)外的(de)(de)目的(de)(de)。因此，GST 在保護細胞免受親(qin)(qin)電(dian)子化合(he)物(wu)(wu)的(de)(de)損 傷中發揮著重要的(de)(de)生物(wu)(wu)學功(gong)能(neng)。此外，因為 GST 具有(you)(you) GSH-Px 活性，亦稱為 non-Se GSH-Px，具有(you)(you) 修復氧化破壞的(de)(de)大分子如 DNA、蛋白(bai)質等的(de)(de)功(gong)能(neng)。注意(yi)，GST 催(cui)化(hua)的(de)反應減少 GSH 含量(liang)，但(dan)是不 增加(jia) GSSG 含量(liang)。 GST 催化 GSH 與 CDNB 結合，其結合產物的光吸收(shou)峰波(bo)長(chang)為 340nm；通(tong)過(guo)測(ce)定 340nm 波(bo)長(chang)處 吸光度上升速率，即可計算出 GST 活性。
自(zi)備(bei)儀(yi)器和用品： 紫(zi)外-可(ke)(ke)見(jian)分光(guang)光(guang)度計(ji)、低溫離心機、水浴鍋、可(ke)(ke)調節移(yi)液器、1mL 石英(ying)比色皿(min)和蒸餾水。

操作步(bu)驟： 
一、粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建(jian)議稱取約 0.1g 組織，加入(ru) 1mL 試劑一）進(jin)行冰(bing)浴勻漿(jiang)。8000g，4℃離(li)心(xin) 10min，取上清置冰(bing)上待測。
2. 細(xi)菌、真菌：按照細(xi)胞數(shu)量（10 4個）：試(shi)劑一(yi)體積（mL）為(wei) 500~1000：1 的比例(li)（建議 500 萬 細(xi)胞加(jia)入(ru) 1mL 試(shi)劑一(yi)），冰(bing)(bing)浴超聲波破(po)碎細(xi)胞（功率 300w，超聲 3 秒(miao)，間(jian)隔 7 秒(miao)，總時間(jian) 3min）； 然后(hou) 8000g，4℃，離心(xin) 10min，取上清置于(yu)冰(bing)(bing)上待(dai)測。
3. 血(xue)清等液體：直接測定。
二、測定：
1. 分(fen)光光度(du)計預熱 30 min 以上，調節波長到(dao) 340 nm，用蒸餾水調零。
2. 試劑(ji)二(er)、試劑(ji)三放在 25℃（一般物(wu)(wu)種(zhong)）或者 37℃（哺乳動物(wu)(wu)）保溫(wen)。
3. 空白(bai)管：取(qu)(qu) 1mL 石英(ying)比色皿，加入 100μL 試(shi)劑一(yi)，900μL 試(shi)劑二和 100μL 試(shi)劑三，迅速(su)混勻后(hou) 于 340nm 測定 10 s 吸光度記 A1，37℃水浴(yu) 5min 后(hou)，快速(su)取(qu)(qu)出(chu)測定吸光度記 A2。
4. 測定(ding)管：取 1mL 石英比色皿(min)，加入 100μL 上清液，900μL 試劑(ji)二和 100μL 試劑(ji)三，迅速混(hun)勻后(hou) 于 340nm 測定(ding) 10 s 吸(xi)光(guang)度記(ji) A3，37℃水浴 5min 后(hou)，快速取出測定(ding)吸(xi)光(guang)度記(ji) A4。
三(san)、GST 活性(xing)計算： 
（1）按蛋白濃度計(ji)算
活性(xing)(xing)單(dan)位定義(yi)：在 25℃或者 37℃中，每毫(hao)克蛋白(bai)每分(fen)鐘(zhong)催化 1μmol CDNB 與(yu) GSH 結(jie)合為一個(ge) 酶(mei)活性(xing)(xing)單(dan)位。
GST（U/mg prot）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷ε÷d×10 6×V 反總(zong)÷(Cpr×V 樣)÷T =0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)] ÷Cpr
（2）按樣本鮮重(zhong)計算
活(huo)性單(dan)位定義：在 25℃或(huo)者(zhe) 37℃中，每克樣品每分鐘催化(hua) 1μmol CDNB 與 GSH 結(jie)合為(wei)一個酶 活(huo)性單(dan)位。
GST（U/g 鮮重）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×10 6×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T =0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)] ÷W
（3）按細(xi)胞(bao)數量計(ji)算(suan)
活(huo)性單(dan)位(wei)定義(yi)：在 25℃或者 37℃中，每 10 4個細胞(bao)每分鐘催化 1μmol CDNB 與 GSH 結(jie)合(he)為一 個酶活(huo)單(dan)位(wei)。
GST（U/10 4 cell）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷ε÷d×10 6×V 反總÷(細(xi)(xi)胞數量×V 樣÷V 樣總)÷T =0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)] ÷細(xi)(xi)胞數量
（4）按液(ye)體體積計算
活(huo)性(xing)單位定義：在 25℃或者(zhe) 37℃中，每毫升液體每分(fen)鐘催化 1μmol CDNB 與 GSH 結合(he)為一個 酶活(huo)單位。
GST（U/mL）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷ε÷d×10 6×V 反(fan)(fan)總÷V 樣÷T =0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)] ε：產物摩(mo)爾(er)消光(guang)系(xi)數，9.6×10 3 L/mol/cm；d：比色皿光(guang)徑(jing)，1cm；10 6：1mol=1×10 6μmol；V 反(fan)(fan) 總：反(fan)(fan)應(ying)(ying)體(ti)系(xi)總體(ti)積，1100μL=0.0011 L；Cpr：上清液蛋白質濃度(du)（mg/mL），需要另外(wai)測(ce)定，建議 選用(yong)本公司生產的(de) BCA 蛋白質濃度(du)測(ce)定試劑(ji)盒；V 樣：加入反(fan)(fan)應(ying)(ying)體(ti)系(xi)中(zhong)上清液體(ti)積，100μL=0.1 mL； T：反(fan)(fan)應(ying)(ying)時間(jian)，5min；W：樣品(pin)鮮(xian)重，g；V 樣總：試劑(ji)一體(ti)積，1 mL。

注意(yi)事項： 
1. 樣品處(chu)理等過程(cheng)均需要(yao)在冰上進行，且須在當日(ri)測定(ding)酶活(huo)力；
2. 細胞(bao)(bao)中 GST 活性測定時(shi)，細胞(bao)(bao)數(shu)目(mu)須(xu)在 300 萬-500 萬之間，細胞(bao)(bao)中 GST 的提取時(shi)可加試劑一后 研磨或超聲波(bo)處(chu)理，不能用細胞(bao)(bao)裂解液處(chu)理細胞(bao)(bao)；
3. 測定前(qian)先用 1～2 個(ge)樣(yang)做預實驗，如 5min 內反(fan)應不成(cheng)線性，須(xu)對(dui)樣(yang)品用蒸餾水稀釋，計算結(jie)果乘 以(yi)稀釋倍數；
4. 若樣(yang)品測(ce)定吸光度(du)大于 1，建議對樣(yang)品用蒸餾水稀釋，計算時結果乘以(yi)稀釋倍數；
5. 測定反映的溫度對測定結果有影響，請控制在 25℃或者 37℃（哺乳動物）。

相關文獻：
《Systemic response of the stony coral Pocillopora damicornis against acute cadmium stress》 作者:Zhi Zhou,Xiaopeng Yua,Jia Tang,Yibo Wu,Lingui Wang,Bo Huang 期刊:Aquatic Toxicology 影響因子:3.794 PMID:29179148
《Transcriptome Sequence Analysis Elaborates a Complex Defensive Mechanism of Grapevine (Vitis vinifera L.) in Response to Salt Stress》 作者:Le Guan , Muhammad Salman Haider , Nadeem Khan , Maazullah Nasim , Songtao Jiu , Muhammad Fiaz , Xudong Zhu , Kekun Zhang  and Jinggui Fang  期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30545146
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《Acid stress induces cross-protection for cadmium tolerance of multi-stress-tolerant Pichia kudriavzevii by regulating cadmium transport and antioxidant defense system》 作者:Chunsheng Li,Ying Xu,Laihao Li,Xianqing Yang,Yueqi Wang 期刊:J. Hazard. Mater 影響因子:7.65 PMID:30513442