產品名稱:游(you)離(li)脂肪酸(suan)(FFA)含量檢(jian)測試劑盒
產品型號:BC0595
產品特點:游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒測定意義:FFA既是脂肪水解的產物,又是脂肪合成的底物。FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內分泌功能有關,也可反映食物貯藏中的品質變化。
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產(chan)品(pin)規格:100管(guan)/96樣 產(chan)品商標(biao):solarbio
保存與運輸(shu):4℃保存或-20℃保存; 參考價(jia)格:780
庫存狀(zhuang)態:現貨
關鍵字: : 游離(li)脂肪酸檢測試劑盒|FFA檢測試(shi)劑盒(he)| 游離脂(zhi)肪酸(suan)|試劑盒
簡要介紹(shao):
FFA既(ji)是脂肪(fang)水解的產物(wu),又是脂肪(fang)合成(cheng)的底物(wu)。血清(qing)中FFA的濃度與脂類代謝、糖(tang)代謝、內分泌功(gong)能有(you)關(guan)。
FFA與(yu)銅(tong)(tong)(tong)離(li)(li)(li)子(zi)結(jie)合形成脂(zhi)肪酸銅(tong)(tong)(tong)鹽,并溶于(yu)lv仿;利用銅(tong)(tong)(tong)試劑法測定銅(tong)(tong)(tong)離(li)(li)(li)子(zi)含(han)量,即(ji)可推(tui)算出游離(li)(li)(li)脂(zhi)肪酸含(han)量。
產(chan)品詳細描述
產品(pin)內容(rong):
提取液:液體(ti)100 mL×1瓶,室溫(wen)保存。
試(shi)劑一:自備。實驗前(qian),取(qu)一個玻(bo)璃瓶,按照正geng烷(wan):無水甲(jia)醇:lv仿=24:1:25的比例(li)配置(自備),蓋(gai)緊后混(hun)勻,室溫(wen)保存。
試(shi)劑二:液體(ti)6 mL×1瓶,室(shi)溫(wen)保(bao)存。
試劑三:粉劑×2瓶,4℃保存。臨用前在(zai)試劑瓶中加(jia)入13mL無水(shui)乙醇,充分溶解,4℃可(ke)保存一周。
標準品:粉劑×1瓶,10mg棕櫚酸,室(shi)溫保存。臨(lin)用前(qian)把試劑轉(zhuan)移到10 mL玻璃瓶中(zhong),加(jia)入7.8 mLlv仿充分溶解(jie),即為5μmol/mL的棕(zong)櫚酸(suan)標準溶液。
產(chan)品說(shuo)明:
FFA既是脂(zhi)肪水解的產物,又是脂(zhi)肪合成的底物。血清中FFA的(de)濃度與脂(zhi)類代(dai)謝(xie)、糖代(dai)謝(xie)、內分泌功能有關。
FFA與銅(tong)離子結合(he)形(xing)成脂肪(fang)酸(suan)銅(tong)鹽,并溶于(yu)lv仿;利用銅試劑法測定(ding)銅離(li)子含量(liang),即可(ke)推算出游離(li)脂肪(fang)酸含量(liang)。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺(tai)式離心機、可(ke)(ke)調(diao)式移液槍、可(ke)(ke)見分光光度(du)計/酶標儀、微量(liang)石英比色皿/96孔板、一個25 mL玻璃瓶、一個15mL玻璃瓶(ping)、正(zheng)geng烷、無水甲醇、lv仿、無(wu)水乙(yi)醇(chun)和蒸餾水。
操作(zuo)步驟:
一、樣品中(zhong)FFA提取:
1、血清(qing)中FFA測定:將所取血液,室溫靜置1 h 后,于(yu)4 ℃離心機3500 rpm離心15min,取(qu)上層血清(qing)置于(yu)-20℃冰箱保存,待(dai)測。
2、組織中FFA含量測(ce)定:組織(zhi)用(yong)生理鹽水(shui)沖(chong)洗干(gan)凈后,用(yong)吸(xi)水(shui)紙吸(xi)取表面水(shui)分,稱取約0.1g,加入1.0 mL提取液,勻漿(jiang)后,8000rpm,4℃離心10min,取上清液(ye),待測。
二(er)、測定:
1. 分光光度計預熱30 min以(yi)上,調節波長到550 nm,無(wu)水乙醇調零。
2. 試劑二(er)在(zai)37℃水浴中預熱(re)30 min以上(shang)。
3. 標準(zhun)品的(de)稀釋:將(jiang)標準(zhun)品稀釋成(cheng)1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。
4. 按(an)下(xia)表(biao)在(zai)1.5mL離心管中加入(ru)相應(ying)試劑(ji)
對照(zhao)管(guan) | 測定(ding)管 | 空(kong)白(bai)管 | 標準管 | |
蒸(zheng)餾水(shui)(μL) | 10 | |||
樣本(μL) | 10 | |||
lv仿(fang)(μL) | 10 | |||
標準品(μL) | 10 | |||
試劑一(μL) | 100 | |||
試(shi)劑二(μL) | 40 | |||
充(chong)分振蕩10min后(hou),3000rpm,離(li)心10min | ||||
上(shang)層溶(rong)液(μL) | 50 | |||
試劑三(μL) | 200 | |||
充分(fen)振蕩2min后,靜(jing)置(zhi)15min,取0.2mL于微(wei)量比色(se)皿/96孔(kong)板,在550 nm下測(ce)吸光值,分(fen)別記(ji)為A對照管、A測定管(guan)、A空白(bai)管、A標準(zhun)管。(對照(zhao)管和空(kong)白管各只做一管) |
三、FFA含量計算:
1.標準曲線的繪(hui)制(zhi):
以標準溶液(ye)的濃度(du)為(wei)x軸,以ΔA標準(zhun)(ΔA=A標(biao)準管-A空(kong)白(bai)管)為y軸,繪制(zhi)標(biao)準曲線(xian),得(de)到方程y=kx+b。將ΔA(ΔA=A測(ce)定管-A對照(zhao)管)帶(dai)入方程得到x。
2.血清中(zhong)FFA含量計算(suan)
FFA(μmol/L)=1000x
(1)按樣本(ben)蛋白濃度(du)計(ji)算
FFA含量(μmol/mg prot)=x÷Cpr
(2)按樣本鮮(xian)重計算
FFA(μmol/g鮮重)=x×V樣總÷W
V樣總:上清液總體積(ji),1 mL;Cpr:樣本蛋白(bai)質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g。
注意事(shi)項:
1.試(shi)劑(ji)三(san)配制應盡量晚配,可在操作到加入試(shi)劑(ji)二(er)時,再配制試(shi)劑(ji)三(san)。
2.必須保(bao)證(zheng)每管的(de)震蕩頻率及(ji)時間一(yi)致。
3.盡量在30min內(nei)完成測量,并且測完后要密(mi)封好再丟棄。
4.因所用試劑多數為有機(ji)溶(rong)劑,同一支吸(xi)頭(tou)多次(ci)吸(xi)取會造成體(ti)積不準確,建(jian)議更(geng)換吸(xi)頭(tou)。
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游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒
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