產品名稱：BCA蛋白濃度測定試劑盒(he)
產品型號：PC0020
產品報價：
產品特點：BCA蛋白濃度測定試劑盒產品簡介：堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡合物，測定其在562nm處的吸收值，并與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結果，但受螯合劑（EDTA, EGTA）、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，
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BCA蛋白濃度測定試劑盒
注意事項：
1. 長期不用時，Cu試(shi)劑(ji)(ji)與PBS稀(xi)釋液可置于2-8℃保存，如發現細菌(jun)污(wu)染則應丟(diu)棄。BCA試(shi)劑(ji)(ji)在低溫條件下出(chu)現結晶沉淀時，可37℃溫育使(shi)其*溶解, 不影(ying)響使(shi)用。
2. 樣品中(zhong)若含有較(jiao)多干(gan)擾物質時，請采(cai)用Bradford蛋(dan)白濃度測定(ding)試劑盒(he)。
3. ;為了您的安全和健康，請(qing)穿實驗服并戴(dai)一(yi)次性手(shou)套(tao)操(cao)作。
BCA蛋白濃度測定試劑盒
操作說明：
一. 微孔酶標儀法
1. 配制(zhi)工(gong)作(zuo)液(ye)：根據(ju)標準品和樣品數量，按50體積BCA試(shi)劑(ji)加1體積Cu試(shi)劑(ji)（50:1）配制(zhi)成(cheng)BCA工(gong)作(zuo)液(ye)，充分混(hun)勻(混(hun)合時可能會有渾(hun)濁，但混(hun)勻后就會消失)。BCA工(gong)作(zuo)液(ye)室(shi)溫24小時內穩定。
2. 稀(xi)釋(shi)標(biao)(biao)準品：取(qu)10μL BSA標(biao)(biao)準品用PBS稀(xi)釋(shi)100μL（樣(yang)品一(yi)般可用PBS稀(xi)釋(shi)），使終濃度為0.5mg/mL。將標(biao)(biao)準品按(an)0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加(jia)到96孔板的蛋白(bai)標(biao)(biao)準品孔中，加(jia)PBS補足20μL。
3. 將(jiang)樣品(pin)作適(shi)當稀釋(shi)（多做幾個梯度(du)，如作2倍、4倍、8倍稀釋(shi)），加(jia)20μL到96孔板的樣品(pin)孔中。由于移液器在取小量(liang)樣品(pin)時誤(wu)差偏大，標準(zhun)線(xian)前面的點可(ke)能(neng)不很準(zhun)確(que)，所(suo)以(yi)盡(jin)可(ke)能(neng)的讓樣品(pin)點落在標準(zhun)線(xian)1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液，37℃放置15-30分鐘。用酶標(biao)(biao)儀(yi)測定A562nm，根據(ju)標(biao)(biao)準曲線計(ji)算(suan)出蛋白濃度。使(shi)用溫(wen)箱(xiang)孵育(yu)時，應注意(yi)防止(zhi)因(yin)水分蒸發影響檢(jian)測結果。
二. 分光光度計法 如沒有酶標儀，可用分光光度計在離心管中混勻后加(jia)入(ru)比色皿中比色。 步驟(zou)如下：
1. 配制工(gong)作液: 根據標準(zhun)品和樣品數量，按50體(ti)積(ji)BCA試(shi)劑加1體(ti)積(ji)Cu試(shi)劑（50:1）配制成BCA工(gong)作液，充分混(hun)(hun)勻(混(hun)(hun)合時(shi)可能會(hui)有渾濁，但混(hun)(hun)勻后就(jiu)會(hui)消失)。BCA工(gong)作液室溫24小(xiao)時(shi)內穩(wen)定。
2. 稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品：取100μL BSA標準(zhun)品用PBS稀(xi)釋(shi)1mL（樣品一般可用PBS稀(xi)釋(shi)），使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取(qu)八支（或(huo)者更(geng)多(duo)）5mL離心管，標(biao)上(shang)號，按下(xia)表加(jia)入試劑。
4.37℃放(fang)置15-30分鐘。用分光(guang)光(guang)度計(ji)測562nm處吸光(guang)值，根據標(biao)準曲線計(ji)算出蛋白(bai)濃度。
參考文獻：
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji，Panpan Zhang，Yixiao Xing，Linglu Jia，Yunpeng Zhang，Tingting Jia，Xuan Wu，Bin Zhao，Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365053
《Rhein enhances the cytotoxicity of effector lymphocytes in colon cancer under hypoxic conditions》 作(zuo)者:Xiangfei Yuan,Wencong Tian,Yang Hua,Lijuan Hu,Jing Yang,Junmuzi Xie,Jiacai Hu,Feng Wang 期(qi)刊(kan):Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.448 PMID:30542494
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