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Solarbio 葡聚糖凝膠G-200

性    狀：白色微球，多(duo)孔

凝膠類(lei)型：凝膠過濾(lv)填料，親水型凝膠

結構(gou)成(cheng)分：交聯右旋糖酐

粒    徑： 40-120µm

工作PH值：2-10

操作溫(wen)度：4-40℃

球(qiu)蛋白分離范(fan)圍(wei)：3000-600000

保存(cun)條件(jian)：4-25℃

應    用(yong)：利用(yong)分(fen)(fen)子篩作用(yong)，進行多肽分(fen)(fen)離、脫鹽、清(qing)洗生物提取液、分(fen)(fen)子量(liang)測定

化學和物理性質:

葡聚(ju)糖凝(ning)膠(jiao)是一種珠(zhu)狀的(de)(de)(de)(de)凝(ning)膠(jiao)，含有大(da)量(liang)的(de)(de)(de)(de)羥(qian)基，很容易在水中(zhong)和(he)電解質溶(rong)液中(zhong)溶(rong)脹。 G型的(de)(de)(de)(de)葡聚(ju)糖凝(ning)膠(jiao)有各(ge)種不同(tong)的(de)(de)(de)(de)交(jiao)聯度(du)(du)，因此它(ta)們(men)的(de)(de)(de)(de)溶(rong)脹度(du)(du)和(he)分級(ji)分離范圍也(ye)有所不同(tong)。 葡聚(ju)糖凝(ning)膠(jiao)的(de)(de)(de)(de)溶(rong)脹度(du)(du)基本上(shang)不因鹽和(he)洗(xi)滌劑的(de)(de)(de)(de)存在而受(shou)影(ying)響(xiang)。

葡聚(ju)糖(tang)(tang)凝(ning)膠有(you)不同的(de)(de)粒度(du)。超細級(ji)的(de)(de)葡聚(ju)糖(tang)(tang)凝(ning)膠是用(yong)于需(xu)要(yao)*分辨(bian)率(lv)的(de)(de)柱色(se)譜(pu)和薄層(ceng)色(se)譜(pu)。粗級(ji)和中級(ji)的(de)(de)凝(ning)膠用(yong)于制備性色(se)譜(pu)過程，可在較(jiao)低的(de)(de)壓(ya)力下獲得較(jiao)高(gao)的(de)(de)流(liu)速。 另(ling)外，粗級(ji)也可用(yong)于批量工(gong)藝(yi)。

化學穩定性:

葡(pu)聚糖(tang)凝膠(jiao)不溶(rong)(rong)于一(yi)切溶(rong)(rong)劑(ji)(除(chu)非它(ta)(ta)被(bei)化(hua)學降解(jie)(jie))。 它(ta)(ta)在水(shui)、鹽溶(rong)(rong)液、有機(ji)溶(rong)(rong)劑(ji)、堿和弱(ruo)酸性溶(rong)(rong)液中都是穩定(ding)的(de)，在強酸中凝膠(jiao)骨架的(de)糖(tang)昔鍵被(bei)水(shui)解(jie)(jie)。 長(chang)期接觸(chu)氧化(hua)劑(ji)將破壞凝膠(jiao)，因而應避免使(shi)用(yong)。

物理穩定性:

葡(pu)聚糖疑膠并不(bu)(bu)熔融(rong)，可以(yi)在濕(shi)態、中(zhong)性PH進行滅菌(jun)(jun)或在高壓滅菌(jun)(jun)器120℃、30分鐘(zhong)而(er)不(bu)(bu)影響(xiang)它的(de)(de)色譜性質。 干態的(de)(de)凝膠加熱(re)120℃以(yi)上將(jiang)開(kai)始焦(jiao)糖化。 葡(pu)聚糖凝膠的(de)(de)機械強度(du)取(qu)決于交聯度(du)。

使用方法:

1. 葡聚(ju)糖凝膠預處理：

在室溫下，將(jiang)葡聚糖凝(ning)膠干粉浸(jin)泡于(yu)蒸餾水中(zhong)少24小(xiao)(xiao)時，并不斷(duan)攪拌以保證凝(ning)膠溶(rong)脹，或者用(yong)熱水浸(jin)泡（不建議煮沸）少1小(xiao)(xiao)時直充分溶(rong)脹，凝(ning)膠體積不再變化。

注：在溶脹(zhang)前，加入蒸(zheng)餾水(shui)攪拌后(hou)使其自然沉(chen)(chen)降，沉(chen)(chen)降后(hou)若(ruo)上層溶液中漂(piao)浮(fu)的凝膠碎片顆粒較多，需要重(zhong)復(fu)多次漂(piao)洗將其除去(qu)，防止層析時(shi)阻(zu)塞凝膠柱，影響流速。

2. 裝柱(zhu)：

將溶脹(zhang)好(hao)的(de)(de)凝膠根據裝(zhuang)柱(zhu)要(yao)求一次(ci)性置入柱(zhu)內，注意(yi)保持濕態裝(zhuang)柱(zhu)，并避免(mian)柱(zhu)內產生氣泡或斷層; 裝(zhuang)柱(zhu)要(yao)均(jun)勻(yun)，可在凝膠耐受的(de)(de)操作壓下裝(zhuang)柱(zhu)，裝(zhuang)好(hao)的(de)(de)凝膠柱(zhu)可以檢測柱(zhu)效，檢測過濾(lv)柱(zhu)裝(zhuang)填是否合格。

凝膠層析分(fen)離(li)(li)(li)度取決于柱(zhu)(zhu)高，為(wei)分(fen)離(li)(li)(li)不(bu)同組分(fen)，凝膠柱(zhu)(zhu)床必(bi)須有適宜的(de)高度：分(fen)級分(fen)離(li)(li)(li)時(shi)，一般需(xu)要(yao) 100cm 左右長的(de)層析柱(zhu)(zhu)，柱(zhu)(zhu)高與直徑之比為(wei) 20:1-100:1，柱(zhu)(zhu)高過(guo)高時(shi)，凝膠擠(ji)壓變(bian)形阻塞會引(yin)起較(jiao)大的(de)反(fan)壓，應當盡可能避免(mian)；分(fen)組分(fen)離(li)(li)(li)（例如脫鹽）時(shi)用短(duan)柱(zhu)(zhu)，柱(zhu)(zhu)高控制在40-50cm 以下，柱(zhu)(zhu)高與直徑的(de)比約為(wei) 5:1-10:1。

3. 平衡：

上樣前用平(ping)(ping)衡液平(ping)(ping)衡層析柱(zhu)少3-5個(ge)柱(zhu)體積直到記錄儀(yi)基(ji)線(xian)變(bian)得平(ping)(ping)穩為止（例如流出液的(de)PH值等于上柱(zhu)的(de)Buffer的(de)PH值）；

4. 上(shang)樣：

分級分離時(shi)上樣量一般(ban)為5%的柱(zhu)床(chuang)體積，我們建議初次上樣控制(zhi)在1-2%的床(chuang)體積，視分離情況可(ke)以調整(zheng);脫鹽(yan)時(shi)上樣量可(ke)以達到20%的柱(zhu)床(chuang)體積。

樣品(pin)溶液如有雜質(zhi)或沉淀(dian)應過(guo)濾(lv)或離(li)心除去，樣品(pin)的粘度不能(neng)過(guo)高，否則影(ying)響分(fen)離(li)效果。

5. 洗脫方法:

可以用(yong)無鹽水(shui)，也可以采用(yong)上柱時(shi)的緩沖液洗脫(tuo)(tuo)；在上柱緩沖液中加入NaCl等(deng)梯度洗脫(tuo)(tuo)或鹽梯度洗脫(tuo)(tuo)也可以*分離(li)純(chun)化；

6. 在(zai)位清洗(xi)(CIP)

凝膠使用十次后(hou)作一次CIP，目(mu)的(de)是(shi)去除柱(zhu)床內沉淀的(de)及頑固殘留的(de)蛋白。 方法是(shi)以(yi)40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗(xi)四(si)個柱(zhu)體積(ji)，再(zai)以(yi)少三(san)個柱(zhu)體積(ji)平衡緩(huan)沖液(ye)再(zai)生。

7. 保存

凝膠柱暫時(shi)不用(yong)，可(ke)(ke)將其(qi)回收，一般方法(fa)是將凝膠用(yong)水沖(chong)洗干(gan)凈濾干(gan)，可(ke)(ke)加入0.02%疊(die)dan化鈉防腐或用(yong)20%乙醇浸泡，以控制微生物生長。

Solarbio 葡聚糖凝膠G-200