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葡聚糖凝膠G-50

說明：分離(li)試劑，層(ceng)析介質(zhi)。分離(li)范圍：1000-30,000。

化學和物理性質:

葡聚糖(tang)凝(ning)(ning)膠是一種珠狀的(de)(de)(de)凝(ning)(ning)膠，含有大量的(de)(de)(de)羥基(ji)，很容易在(zai)水中(zhong)和(he)電解(jie)質溶(rong)(rong)(rong)液(ye)中(zhong)溶(rong)(rong)(rong)脹。 G型(xing)的(de)(de)(de)葡聚糖(tang)凝(ning)(ning)膠有各種不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)交聯度(du)，因此(ci)它們的(de)(de)(de)溶(rong)(rong)(rong)脹度(du)和(he)分級分離范圍也有所不(bu)同(tong)。 葡聚糖(tang)凝(ning)(ning)膠的(de)(de)(de)溶(rong)(rong)(rong)脹度(du)基(ji)本上不(bu)因鹽和(he)洗滌劑的(de)(de)(de)存(cun)在(zai)而(er)受影響。

葡聚糖(tang)凝(ning)膠有(you)不同的(de)粒度。超細級的(de)葡聚糖(tang)凝(ning)膠是用于(yu)需要*分(fen)辨率的(de)柱(zhu)色(se)譜和薄層(ceng)色(se)譜。粗級和中(zhong)級的(de)凝(ning)膠用于(yu)制備性(xing)色(se)譜過程，可(ke)在較低(di)的(de)壓(ya)力下(xia)獲得較高的(de)流速。 另外(wai)，粗級也可(ke)用于(yu)批量工藝(yi)。

化學穩定性:

葡聚(ju)糖(tang)(tang)凝膠不(bu)溶(rong)于一切溶(rong)劑(除非它被化學降解(jie))。 它在(zai)水(shui)、鹽溶(rong)液(ye)、有(you)機溶(rong)劑、堿和弱酸(suan)性溶(rong)液(ye)中都是穩定(ding)的，在(zai)強(qiang)酸(suan)中凝膠骨架(jia)的糖(tang)(tang)昔鍵被水(shui)解(jie)。 長期接觸氧化劑將破(po)壞凝膠，因而應避免使用。

物理穩定性:

葡聚(ju)糖疑膠(jiao)并不(bu)熔融，可以在濕態(tai)、中性(xing)(xing)PH進行滅菌或在高壓滅菌器120℃、30分(fen)鐘(zhong)而(er)不(bu)影響(xiang)它(ta)的(de)色譜性(xing)(xing)質(zhi)。 干態(tai)的(de)凝膠(jiao)加(jia)熱120℃以上將(jiang)開(kai)始(shi)焦糖化(hua)。 葡聚(ju)糖凝膠(jiao)的(de)機械強度取決(jue)于交聯度。

使用方法:

1. 葡聚糖凝膠預處理(li)：

在室溫下，將葡聚(ju)糖凝膠干粉(fen)浸泡于蒸餾水中少24小(xiao)時，并(bing)不(bu)(bu)(bu)斷攪拌以保(bao)證凝膠溶(rong)脹(zhang)，或(huo)者(zhe)用熱水浸泡（不(bu)(bu)(bu)建(jian)議煮沸）少1小(xiao)時直充(chong)分溶(rong)脹(zhang)，凝膠體積不(bu)(bu)(bu)再變化。

注：在溶脹前(qian)，加入蒸餾(liu)水攪拌后(hou)使其自然沉降(jiang)，沉降(jiang)后(hou)若上層溶液(ye)中漂浮的(de)凝膠碎片顆粒(li)較多，需要重復多次漂洗將其除去，防(fang)止層析時阻塞凝膠柱，影響流速。

2. 裝柱：

將溶脹好的凝(ning)膠根據裝(zhuang)(zhuang)(zhuang)柱(zhu)(zhu)要(yao)求一次性置(zhi)入柱(zhu)(zhu)內，注意保(bao)持濕態(tai)裝(zhuang)(zhuang)(zhuang)柱(zhu)(zhu)，并(bing)避免柱(zhu)(zhu)內產生(sheng)氣泡或斷層; 裝(zhuang)(zhuang)(zhuang)柱(zhu)(zhu)要(yao)均勻，可(ke)在凝(ning)膠耐受的操作壓下裝(zhuang)(zhuang)(zhuang)柱(zhu)(zhu)，裝(zhuang)(zhuang)(zhuang)好的凝(ning)膠柱(zhu)(zhu)可(ke)以檢測(ce)柱(zhu)(zhu)效，檢測(ce)過濾柱(zhu)(zhu)裝(zhuang)(zhuang)(zhuang)填是否合(he)格。

凝膠層析(xi)分離度取決于(yu)柱(zhu)(zhu)高(gao)，為分離不同組(zu)分，凝膠柱(zhu)(zhu)床必須有適宜的高(gao)度：分級分離時(shi)，一般需(xu)要 100cm 左右長(chang)的層析(xi)柱(zhu)(zhu)，柱(zhu)(zhu)高(gao)與(yu)直(zhi)徑之比為 20:1-100:1，柱(zhu)(zhu)高(gao)過高(gao)時(shi)，凝膠擠壓變形阻塞(sai)會引起較大的反壓，應當盡可能避免；分組(zu)分離（例如脫鹽）時(shi)用(yong)短柱(zhu)(zhu)，柱(zhu)(zhu)高(gao)控制在40-50cm 以下，柱(zhu)(zhu)高(gao)與(yu)直(zhi)徑的比約為 5:1-10:1。

3. 平衡：

上樣前用平衡液(ye)平衡層析(xi)柱(zhu)少3-5個柱(zhu)體積直到記錄儀基(ji)線變(bian)得(de)平穩為止（例(li)如(ru)流出液(ye)的(de)PH值(zhi)等于上柱(zhu)的(de)Buffer的(de)PH值(zhi)）；

4. 上(shang)樣(yang)：

分級分離(li)時上樣量一般為5%的(de)柱(zhu)床(chuang)體積，我們(men)建(jian)議初(chu)次上樣控制在(zai)1-2%的(de)床(chuang)體積，視分離(li)情(qing)況可以調(diao)整;脫鹽時上樣量可以達到(dao)20%的(de)柱(zhu)床(chuang)體積。

樣品溶液如有雜質(zhi)或沉(chen)淀應過濾或離心除(chu)去，樣品的粘度不(bu)能過高，否則影響(xiang)分離效果。

5. 洗脫方法:

可以(yi)(yi)用(yong)無鹽水，也(ye)可以(yi)(yi)采用(yong)上柱(zhu)時的緩沖(chong)(chong)液(ye)洗脫；在(zai)上柱(zhu)緩沖(chong)(chong)液(ye)中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也(ye)可以(yi)(yi)*分離(li)純化；

6. 在位清(qing)洗(CIP)

凝膠(jiao)使用(yong)十次后(hou)作一次CIP，目的(de)是去除(chu)柱床內沉淀的(de)及頑固(gu)殘留的(de)蛋白。 方法是以40cm/h用(yong)1M氫氧化鈉(na)反向清洗四個(ge)柱體積，再以少三個(ge)柱體積平衡緩沖液再生。

7. 保(bao)存

凝膠(jiao)柱暫時不用，可(ke)將其回收(shou)，一般方法是(shi)將凝膠(jiao)用水沖洗干凈(jing)濾干，可(ke)加入0.02%疊dan化鈉防腐(fu)或用20%乙醇浸泡，以控制微生物生長。

備注：產品信(xin)息(xi)可(ke)能會有優(you)化升級。請以實際標簽信(xin)息(xi)為準。

葡聚糖凝膠G-50