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Solarbio 葡聚糖凝膠G-50

說明：分離試劑，層析介質(zhi)。

應    用：利用分子篩作用，進行多肽分離(li)、脫鹽、清洗生物提(ti)取液、分子量(liang)測定(ding)

性(xing)    狀(zhuang)：白色微球，多孔

凝(ning)(ning)膠(jiao)類型：凝(ning)(ning)膠(jiao)過濾(lv)填(tian)料，親水型凝(ning)(ning)膠(jiao)

結構成(cheng)分(fen)：交聯(lian)右旋糖酐

粒(li)    徑：細顆粒(li)20-80µm，中顆粒(li)50-150µm，粗顆粒(li)100-300µm

工作PH值：2-10

操(cao)作溫度(du)：4-40℃

球蛋白分離(li)范圍：1500-30000

保存條件：4-25℃

化學和物理性質:

葡(pu)聚糖(tang)凝膠(jiao)是一種(zhong)(zhong)珠狀的(de)(de)凝膠(jiao)，含有(you)大(da)量的(de)(de)羥基(ji)，很容易在水中(zhong)和(he)電解質(zhi)溶液中(zhong)溶脹(zhang)。 G型的(de)(de)葡(pu)聚糖(tang)凝膠(jiao)有(you)各種(zhong)(zhong)不同的(de)(de)交聯度(du)，因(yin)此(ci)它們(men)的(de)(de)溶脹(zhang)度(du)和(he)分級分離范圍也有(you)所(suo)不同。 葡(pu)聚糖(tang)凝膠(jiao)的(de)(de)溶脹(zhang)度(du)基(ji)本上不因(yin)鹽和(he)洗滌劑的(de)(de)存在而(er)受(shou)影響。

葡聚(ju)糖凝膠有不同的(de)(de)粒(li)度。超(chao)細級(ji)的(de)(de)葡聚(ju)糖凝膠是用(yong)于需(xu)要*分辨率(lv)的(de)(de)柱色譜和薄層色譜。粗級(ji)和中級(ji)的(de)(de)凝膠用(yong)于制備性色譜過程，可在較(jiao)(jiao)低(di)的(de)(de)壓力下獲得較(jiao)(jiao)高(gao)的(de)(de)流速。 另外，粗級(ji)也可用(yong)于批(pi)量工藝。

化學穩定性:

葡(pu)聚糖凝膠不溶(rong)于一切溶(rong)劑(除非(fei)它被(bei)化學(xue)降解)。 它在水(shui)、鹽溶(rong)液(ye)、有機溶(rong)劑、堿和弱酸性溶(rong)液(ye)中都(dou)是穩定(ding)的，在強酸中凝膠骨架的糖昔鍵(jian)被(bei)水(shui)解。 長期接觸氧化劑將破(po)壞凝膠，因而應(ying)避免使用。

物理穩定性:

葡聚糖疑膠(jiao)(jiao)并不熔融，可以(yi)在濕態(tai)、中性PH進(jin)行滅(mie)菌或在高壓(ya)滅(mie)菌器120℃、30分鐘而不影(ying)響它的色譜性質(zhi)。 干(gan)態(tai)的凝膠(jiao)(jiao)加(jia)熱(re)120℃以(yi)上將(jiang)開(kai)始焦糖化。 葡聚糖凝膠(jiao)(jiao)的機械強度取(qu)決于交聯度。

使用方法:

1. 葡(pu)聚(ju)糖凝膠(jiao)預處理：

在室溫下，將(jiang)葡聚糖(tang)凝(ning)膠(jiao)干(gan)粉浸泡于蒸餾水中少24小時(shi)，并不(bu)(bu)(bu)斷攪拌以保證凝(ning)膠(jiao)溶脹(zhang)，或者用熱水浸泡（不(bu)(bu)(bu)建議煮沸）少1小時(shi)直充(chong)分溶脹(zhang)，凝(ning)膠(jiao)體積不(bu)(bu)(bu)再變化。

注：在溶(rong)(rong)脹(zhang)前，加入蒸餾水(shui)攪拌(ban)后使其(qi)自然沉(chen)(chen)降(jiang)，沉(chen)(chen)降(jiang)后若上層溶(rong)(rong)液中漂浮(fu)的凝膠碎片顆粒(li)較多(duo)，需要重復多(duo)次漂洗將(jiang)其(qi)除去，防(fang)止(zhi)層析時(shi)阻塞凝膠柱，影響流速。

2. 裝柱：

將溶(rong)脹好的(de)(de)凝(ning)膠根據裝柱(zhu)(zhu)要求一次(ci)性置(zhi)入柱(zhu)(zhu)內，注意(yi)保持濕態裝柱(zhu)(zhu)，并避免柱(zhu)(zhu)內產(chan)生氣泡或斷層; 裝柱(zhu)(zhu)要均勻(yun)，可(ke)在凝(ning)膠耐受(shou)的(de)(de)操作壓下裝柱(zhu)(zhu)，裝好的(de)(de)凝(ning)膠柱(zhu)(zhu)可(ke)以檢測(ce)柱(zhu)(zhu)效，檢測(ce)過濾柱(zhu)(zhu)裝填是否(fou)合格(ge)。

凝(ning)膠層(ceng)析分(fen)(fen)離度取決于柱(zhu)高，為(wei)分(fen)(fen)離不同(tong)組分(fen)(fen)，凝(ning)膠柱(zhu)床必須(xu)有適宜的(de)(de)高度：分(fen)(fen)級分(fen)(fen)離時(shi)，一般需要 100cm 左右長(chang)的(de)(de)層(ceng)析柱(zhu)，柱(zhu)高與直徑之比為(wei) 20:1-100:1，柱(zhu)高過高時(shi)，凝(ning)膠擠壓變形阻(zu)塞會引(yin)起(qi)較大的(de)(de)反壓，應當(dang)盡可能避免(mian)；分(fen)(fen)組分(fen)(fen)離（例如脫鹽(yan)）時(shi)用短(duan)柱(zhu)，柱(zhu)高控(kong)制在40-50cm 以下，柱(zhu)高與直徑的(de)(de)比約為(wei) 5:1-10:1。

3. 平衡：

上樣前用平(ping)(ping)衡(heng)液平(ping)(ping)衡(heng)層析柱(zhu)少3-5個(ge)柱(zhu)體積直到記錄儀基線變得平(ping)(ping)穩為止（例如(ru)流(liu)出液的(de)PH值(zhi)等于(yu)上柱(zhu)的(de)Buffer的(de)PH值(zhi)）；

4. 上樣(yang)：

分級分離時上(shang)樣量(liang)(liang)一般(ban)為5%的(de)柱床體積(ji)，我(wo)們建議初(chu)次上(shang)樣控(kong)制在1-2%的(de)床體積(ji)，視分離情況(kuang)可以(yi)調整;脫鹽時上(shang)樣量(liang)(liang)可以(yi)達到20%的(de)柱床體積(ji)。

樣品溶液(ye)如有雜質或(huo)沉(chen)淀應過濾或(huo)離心(xin)除去，樣品的(de)粘度不(bu)能(neng)過高，否則影(ying)響分離效果。

5. 洗脫方法:

可以(yi)用無鹽水，也(ye)可以(yi)采用上(shang)柱時的緩(huan)沖(chong)液(ye)洗(xi)(xi)脫(tuo)；在上(shang)柱緩(huan)沖(chong)液(ye)中(zhong)加(jia)入NaCl等(deng)梯度洗(xi)(xi)脫(tuo)或鹽梯度洗(xi)(xi)脫(tuo)也(ye)可以(yi)*分離純化；

6. 在位清(qing)洗(CIP)

凝膠使用十次后作一次CIP，目(mu)的(de)是去除(chu)柱床內(nei)沉淀的(de)及頑固殘留的(de)蛋白。 方法是以(yi)40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗四個柱體積(ji)，再(zai)以(yi)少(shao)三個柱體積(ji)平衡緩沖液再(zai)生(sheng)。

7. 保存(cun)

凝膠柱暫時(shi)不用(yong)，可(ke)(ke)將其回(hui)收(shou)，一般方法是將凝膠用(yong)水沖洗干凈濾干，可(ke)(ke)加入0.02%疊(die)dan化鈉防腐或用(yong)20%乙(yi)醇浸泡，以控制(zhi)微生物(wu)生長。

Solarbio 葡聚糖凝膠G-50