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Solarbio 葡聚糖凝膠G-25

說明：分離試劑，層析介質(zhi).

應(ying)    用：利(li)用分(fen)子(zi)篩作(zuo)用，進行緩沖液交換、脫鹽，分(fen)離小(xiao)分(fen)子(zi)，去除小(xiao)分(fen)子(zi);工業脫鹽。

性    狀：白色(se)微(wei)球，多孔

凝(ning)膠類型：凝(ning)膠過濾填料，親水型凝(ning)膠

結構成(cheng)分：交聯右旋糖(tang)酐

粒    徑(jing)： 細顆(ke)粒20-80µm，中(zhong)顆(ke)粒50-150µm，粗顆(ke)粒100-300µm

工作PH值：2-13

操作(zuo)溫度(du)：4-40℃

球蛋(dan)白(bai)分(fen)離范圍(wei)：1000-5000

保(bao)存條件(jian)：4-25℃

化學和物理性質:

葡聚(ju)糖凝膠是一(yi)種珠(zhu)狀的(de)(de)(de)凝膠，含有大量的(de)(de)(de)羥基(ji)，很容易在水中和(he)電(dian)解質溶(rong)液(ye)中溶(rong)脹(zhang)(zhang)(zhang)。 G型的(de)(de)(de)葡聚(ju)糖凝膠有各種不同的(de)(de)(de)交(jiao)聯度，因此(ci)它(ta)們的(de)(de)(de)溶(rong)脹(zhang)(zhang)(zhang)度和(he)分(fen)級分(fen)離(li)范圍(wei)也有所不同。 葡聚(ju)糖凝膠的(de)(de)(de)溶(rong)脹(zhang)(zhang)(zhang)度基(ji)本上不因鹽(yan)和(he)洗滌劑的(de)(de)(de)存在而受影響。

葡聚糖(tang)凝膠(jiao)有不同(tong)的(de)(de)粒度。超細級(ji)的(de)(de)葡聚糖(tang)凝膠(jiao)是用于需要*分辨率的(de)(de)柱(zhu)色譜(pu)和薄層色譜(pu)。粗級(ji)和中級(ji)的(de)(de)凝膠(jiao)用于制備性色譜(pu)過程(cheng)，可在(zai)較低的(de)(de)壓力下獲得較高的(de)(de)流(liu)速。 另外，粗級(ji)也可用于批(pi)量工藝。

化學穩定性:

葡聚糖凝(ning)(ning)膠(jiao)不溶(rong)(rong)(rong)于(yu)一切溶(rong)(rong)(rong)劑(除非它(ta)被(bei)化學降解(jie)(jie))。 它(ta)在水、鹽溶(rong)(rong)(rong)液、有機溶(rong)(rong)(rong)劑、堿和弱(ruo)酸(suan)性溶(rong)(rong)(rong)液中都是穩(wen)定(ding)的，在強酸(suan)中凝(ning)(ning)膠(jiao)骨(gu)架的糖昔鍵被(bei)水解(jie)(jie)。 長(chang)期接觸氧(yang)化劑將破壞凝(ning)(ning)膠(jiao)，因而應避免(mian)使用。

物理穩定性:

葡聚糖疑膠(jiao)(jiao)(jiao)并不(bu)熔融，可(ke)以(yi)(yi)在濕態(tai)、中(zhong)性PH進行(xing)滅(mie)菌或在高壓滅(mie)菌器120℃、30分鐘而(er)不(bu)影(ying)響它的色(se)譜性質。 干態(tai)的凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)加熱(re)120℃以(yi)(yi)上將開始焦糖化。 葡聚糖凝(ning)膠(jiao)(jiao)(jiao)的機械強度取決于交聯度。

使用方法:

1. 葡聚糖凝膠預處理：

在室溫(wen)下，將(jiang)葡聚糖凝(ning)(ning)膠干粉(fen)浸(jin)泡于(yu)蒸餾(liu)水(shui)中少24小時(shi)，并不斷攪拌(ban)以保證凝(ning)(ning)膠溶(rong)(rong)脹，或(huo)者(zhe)用熱水(shui)浸(jin)泡（不建議煮沸）少1小時(shi)直(zhi)充(chong)分溶(rong)(rong)脹，凝(ning)(ning)膠體積不再變化。

注(zhu)：在溶脹前(qian)，加入蒸(zheng)餾(liu)水攪拌后使其自然沉(chen)降，沉(chen)降后若上層溶液中漂浮的凝(ning)膠碎(sui)片顆粒較(jiao)多，需要重復(fu)多次漂洗將其除去，防止層析時阻塞凝(ning)膠柱，影響(xiang)流速(su)。

2. 裝柱：

將溶脹好(hao)的凝(ning)膠根據裝(zhuang)柱(zhu)要求(qiu)一次性(xing)置入柱(zhu)內，注意(yi)保持(chi)濕態裝(zhuang)柱(zhu)，并避免柱(zhu)內產(chan)生氣泡(pao)或(huo)斷層; 裝(zhuang)柱(zhu)要均勻，可(ke)在凝(ning)膠耐(nai)受的操作壓(ya)下裝(zhuang)柱(zhu)，裝(zhuang)好(hao)的凝(ning)膠柱(zhu)可(ke)以檢(jian)測(ce)柱(zhu)效，檢(jian)測(ce)過濾柱(zhu)裝(zhuang)填(tian)是否合格。

凝膠層析分(fen)(fen)離(li)度(du)取決(jue)于柱(zhu)高(gao)(gao)，為(wei)(wei)分(fen)(fen)離(li)不同組(zu)(zu)分(fen)(fen)，凝膠柱(zhu)床必(bi)須有(you)適宜(yi)的(de)(de)(de)高(gao)(gao)度(du)：分(fen)(fen)級(ji)分(fen)(fen)離(li)時(shi)，一般需要 100cm 左右長的(de)(de)(de)層析柱(zhu)，柱(zhu)高(gao)(gao)與(yu)直(zhi)徑之比為(wei)(wei) 20:1-100:1，柱(zhu)高(gao)(gao)過高(gao)(gao)時(shi)，凝膠擠壓變(bian)形阻塞會引起較大的(de)(de)(de)反壓，應當盡可能避免(mian)；分(fen)(fen)組(zu)(zu)分(fen)(fen)離(li)（例如脫鹽）時(shi)用(yong)短柱(zhu)，柱(zhu)高(gao)(gao)控制在40-50cm 以下(xia)，柱(zhu)高(gao)(gao)與(yu)直(zhi)徑的(de)(de)(de)比約為(wei)(wei) 5:1-10:1。

3. 平衡：

上(shang)樣前用平(ping)衡(heng)液平(ping)衡(heng)層析柱少3-5個柱體積(ji)直到(dao)記錄儀基線變得平(ping)穩為止(zhi)（例(li)如流出液的PH值等于(yu)上(shang)柱的Buffer的PH值）；

4. 上(shang)樣：

分(fen)級(ji)分(fen)離(li)時上(shang)樣量一般(ban)為5%的(de)柱(zhu)床體積(ji)(ji)，我們建(jian)議(yi)初次上(shang)樣控制在1-2%的(de)床體積(ji)(ji)，視分(fen)離(li)情況可(ke)以調整;脫鹽時上(shang)樣量可(ke)以達到20%的(de)柱(zhu)床體積(ji)(ji)。

樣品溶液如有雜質或(huo)沉(chen)淀應過(guo)濾(lv)或(huo)離心(xin)除去，樣品的粘(zhan)度不(bu)能過(guo)高，否則影響分離效(xiao)果。

5. 洗脫方法:

可以用無鹽水，也可以采用上柱時的(de)緩沖液洗脫(tuo)；在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫(tuo)或鹽梯度洗脫(tuo)也可以*分離純化；

6. 在位清洗(xi)(CIP)

凝(ning)膠使用(yong)十次后作一次CIP，目(mu)的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留(liu)的蛋(dan)白。 方法是以40cm/h用(yong)1M氫氧化鈉反向清洗四個(ge)柱體積，再以少(shao)三個(ge)柱體積平衡緩沖液(ye)再生。

7. 保存

凝膠柱(zhu)暫時不(bu)用(yong)，可(ke)將其(qi)回收，一般方(fang)法(fa)是(shi)將凝膠用(yong)水沖洗干凈濾干，可(ke)加入0.02%疊dan化(hua)鈉防腐或用(yong)20%乙醇浸泡，以控制微(wei)生物生長。

Solarbio 葡聚糖凝膠G-25