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總糖含量檢測試劑盒

總糖含量檢測試劑盒說明書
可見(jian)分光光度(du)法
注意：正式測定(ding)前務(wu)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定(ding)。
英文名稱：Total sugar content test kit
關鍵詞：總糖含量檢測|總糖含量測定|總糖|總糖含量
貨號：BC2710
規格：50T/48S

產(chan)品內(nei)容：
試劑一：液(ye)體 50mL×1 瓶，4℃保存；
試(shi)劑二：液體(ti) 50mL×1 瓶(ping)，4℃保(bao)存；
試(shi)劑三：液體 13mL×1 瓶，4℃避光保存；
標準品：粉劑×1 支，10mg 無水葡萄(tao)糖，4℃保存；臨用(yong)前加 1mL 蒸餾水溶解(jie)為 10mg/mL 的葡萄(tao)糖標準品備(bei)用(yong)。

產品(pin)說明：
糖(tang)(tang)(tang)(tang)類物(wu)質是構成(cheng)植物(wu)體的(de)重要成(cheng)分之一，也是新(xin)陳(chen)代謝的(de)主(zhu)要原(yuan)料和(he)貯存物(wu)質。總糖(tang)(tang)(tang)(tang)主(zhu)要指具有還(huan)原(yuan)性的(de)葡(pu)萄糖(tang)(tang)(tang)(tang)，果(guo)糖(tang)(tang)(tang)(tang)，戊(wu)糖(tang)(tang)(tang)(tang)，乳糖(tang)(tang)(tang)(tang)和(he)在(zai)測(ce)定條(tiao)件下能(neng)(neng)水解為還(huan)原(yuan)性的(de)單糖(tang)(tang)(tang)(tang)的(de)蔗(zhe)糖(tang)(tang)(tang)(tang)，麥芽糖(tang)(tang)(tang)(tang)以及(ji)可能(neng)(neng)部分水解的(de)淀(dian)粉(fen)。
總(zong)糖(tang)(tang)酸水解為還原(yuan)糖(tang)(tang)，還原(yuan)糖(tang)(tang)在堿性條(tiao)件下與 DNS 試劑(ji)共熱(re)后被還原(yuan)成氨基化合物，在堿性溶(rong)液中(zhong)呈桔(jie)紅(hong)色，還原(yuan)糖(tang)(tang)的量(liang)與桔(jie)紅(hong)色物質顏色的深淺成正(zheng)比關系，以此(ci)測定樣品中(zhong)的總(zong)糖(tang)(tang)含量(liang)。

試驗(yan)中所需(xu)的儀器和試劑：
可(ke)見(jian)分光(guang)光(guang)度計、水浴鍋、可(ke)調式移液器、1mL 玻(bo)璃比(bi)色皿、研缽、蒸餾水。

操(cao)作步驟：
一、樣(yang)品中(zhong)總糖的提取：
組織：稱取(qu)約 0.1g 樣品，加(jia)入(ru) 1mL 試劑(ji)一，1.5mL 蒸餾水(shui)，勻漿，沸(fei)水(shui)浴(yu) 30min，加(jia)入(ru) 1mL
試(shi)劑(ji)二(er)，混勻，用(yong)蒸餾水定容 10mL，8000g 25℃離(li)心(xin) 10min，取(qu)上清液待(dai)測。（注(zhu)意稀(xi)釋，見注(zhu)意事(shi)項）
血(xue)清(qing)（漿(jiang)）、液(ye)體樣(yang)本：取 0.1mL 血(xue)清(qing)（漿(jiang)），加入 0.1mL 試劑(ji)一，0.15mL 蒸(zheng)餾(liu)水，勻(yun)漿(jiang)，沸水浴 30min，加入 0.1mL 試劑(ji)二，混勻(yun)，用蒸(zheng)餾(liu)水定容(rong) 1mL，8000g 25℃離心 10min，取上(shang)清(qing)液(ye)待測。（注(zhu)意(yi)稀釋，見注(zhu)意(yi)事(shi)項）

二、測定操作表(biao)：
1、分光光度(du)計預熱 30min 以(yi)上(shang)，調節(jie)波長 540nm，蒸餾水調零。
2、標(biao)準(zhun)品(pin)準(zhun)備：將標(biao)準(zhun)品(pin)用蒸餾水稀釋(shi) 1、0.8、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1mg/mL。
3、加樣表：
試劑(ji)（µL） 空白管(guan) 測定(ding)管(guan) 標準管(guan)
蒸(zheng)餾水      150
樣本               150
標準(zhun)品                    150
試劑三      150     150   150
混(hun)勻(yun)，沸水浴 10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻(que)室溫(wen)
蒸餾水      900     900   900
混(hun)勻，在(zai) 540nm 下測定吸光值(zhi)，并計算(suan)?A 測=A 測定管(guan)-A 空白(bai)管(guan)、?A 標=A 標準(zhun)管(guan)-A 空白(bai)管(guan)。
總糖含量計算：
1、標準曲線的繪(hui)制：
以(yi)標(biao)準管的(de)(de)濃度為(wei)x軸，對(dui)應的(de)(de)?A標(biao)為(wei)y軸繪制標(biao)準曲(qu)線，得到標(biao)準方程(cheng)y=kx+b，將?A測帶入方程(cheng)中計算得x（mg/mL）。
2、按樣本鮮重(zhong)計(ji)算：
總糖(tang)（mg/g 鮮重(zhong)）=（x×V 樣(yang)總）÷W×稀(xi)釋倍數(shu)=10×x÷W×稀(xi)釋倍數(shu)
3、按血清（漿）、液(ye)體(ti)體(ti)積計算(suan)：
總(zong)糖（mg/mL）=（x×V 提）÷V 樣×稀釋(shi)(shi)倍數(shu)=10×x×稀釋(shi)(shi)倍數(shu)
V 樣(yang)總(zong)(zong)：樣(yang)本體積總(zong)(zong)體積，10mL；
W：樣本鮮重(zhong)，g；
V 提(ti)：液體(ti)或血清樣(yang)本總體(ti)積，1mL；
V 樣：液體或(huo)血清體積，0.1mL。

注意(yi)：
1、空白(bai)管只需做一(yi)管。
2、如果?A 大于 1.2，需要將上清液用(yong)蒸餾水稀釋(shi)，計算公式中乘以相應稀釋(shi)倍數。
3、此試(shi)劑盒(he)對于(yu)纖(xian)維素的分解程度無法達(da)到 100%。
注意：低檢測限為(wei) 5mg/g 鮮重(zhong)。

相關文獻：
《Extraction of Extracellular Matrix in Static and Dynamic Candida Biofilms Using Cation Exchange Resin and Untargeted Analysis of Matrix Metabolites by Ultra-High-Performance Liquid Chromatography-Tandem Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry (UPLC-Q-TOF-MS)》 作者:Wenyue Da?, Jing Shao*?, Qianqian Li, Gaoxiang Shi, Tianming Wang, Daqiang Wu and Changzhong Wang* 期刊:FRONTIERS IN MICROBIOLOGY 影響因子(zi):4.259 PMID:31110494