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膠原酶Ⅴ 酶類包(bao)含(han)少7種蛋(dan)白酶成(cheng)分，分子量(liang)從68-130KD不等。它可用于胰腺小島(dao)組(zu)織的分離，將(jiang)結締(di)組(zu)織分離成(cheng)單個細胞。

      膠原酶Ⅴ溶(rong)解性(xing)：可(ke)溶(rong)于(yu)TES緩沖液(ye)(ye)，Hank's平衡鹽(yan)和Earles平衡鹽(yan)等(deng)溶(rong)液(ye)(ye)。溶(rong)液(ye)(ye)在-20℃可(ke)穩定保存數月。

      （來(lai)源(yuan)溶(rong)組(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)梭菌(jun)）包含少 7 種(zhong)蛋白酶(mei)成(cheng)分(fen)(fen)，分(fen)(fen)子(zi)(zi)量(liang)從(cong) 68-130KD 不(bu)等。它可(ke)(ke)用(yong)(yong)于胰腺小島組(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)離(li)， 將結締組(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)分(fen)(fen)離(li)成(cheng)單個細(xi)胞(bao)(bao)(bao)。消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)軟骨組(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)濃(nong)度(du)一般(ban)為 1-2 mg/ml，消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)肝臟組(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)大約 1 mg/ml。 但是(shi)具體的(de)(de)(de)(de)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)濃(nong)度(du)因種(zhong)屬特異(yi)性而異(yi)。很多文獻指出膠原酶(mei)可(ke)(ke)以(yi)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)多種(zhong)組(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)，膠原酶(mei)的(de)(de)(de)(de)使用(yong)(yong)濃(nong) 度(du)一般(ban)為 0.1- 5 mg/ml，消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)過(guo)程中可(ke)(ke)以(yi)攪拌以(yi)促(cu)進酶(mei)的(de)(de)(de)(de)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)作用(yong)(yong)。膠原酶(mei)在消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)的(de)(de)(de)(de)過(guo)程中可(ke)(ke)以(yi)引(yin)起 細(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)少量(liang)死(si)亡，一般(ban)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時(shi)間為 15min 數(shu)小時(shi)。如果濃(nong)度(du)發生變化(hua)(hua)(hua)那么消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時(shi)間可(ke)(ke)能(neng)更(geng)長。消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)過(guo)程中一般(ban)選的(de)(de)(de)(de)緩(huan)沖液(ye)為含鈣離(li)子(zi)(zi)和 BSA 的(de)(de)(de)(de) Krebs Ringer Buffer。 在消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)的(de)(de)(de)(de)過(guo)程中如果細(xi)胞(bao)(bao)(bao)大量(liang)死(si)亡則(ze)需要降低酶(mei)量(liang)，同時(shi)可(ke)(ke)以(yi)加入0.5%BSA或(huo)5-10%血清來(lai)穩定細(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)狀態和消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)效果。膠原酶(mei)的(de)(de)(de)(de)滅菌(jun)先離(li)心或(huo)者用(yong)(yong)0.8µm的(de)(de)(de)(de)濾(lv)器去掉不(bu)溶(rong)物。然后再(zai)用(yong)(yong)0.2µm 的(de)(de)(de)(de)濾(lv)器過(guo)濾(lv)除菌(jun)。 對(dui)于組(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)培養方面(mian)的(de)(de)(de)(de)應用(yong)(yong)，膠原酶(mei)可(ke)(ke)以(yi)用(yong)(yong)不(bu)含鈣離(li)子(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)溶(rong)液(ye)配制(zhi)如hanks，ebss等。

       0.05 - 0.1 mg/ml 膠(jiao)原酶(mei)溶于50 mM TES buffer，pH 7.4 (37 ℃) 含(han) 0.36 mM 氯(lv)化鈣。反(fan)應體系 的終(zhong)濃度為50 mM TES，0.36 mM 氯(lv)化鈣，25 mg 膠(jiao)原，0.005-0.01 mg 膠(jiao)原酶(mei)。

       酶液在(zai)含有 0.3-0.5 mM 鈣離子的中性 PH 條(tiao)件下可以在(zai) 37 ℃維持活性 15 小時(shi)。在(zai)-20℃可以維 持數月。

相關文獻：

《Deoxynivalenol impairs proliferation and induces apoptosis in primary murine osteoblasts》 作者:Wu Huihui, Sun Xiao, Zhang Zhaoqiang, Zhuang Dongming, Wang Yu, Li Xiaoxia, Yu Guangfu, Lv Gang, Wang Na, Li Qiaoling, Yu Ailian, Zhao Yinghui 期刊:Toxicological & Environmental Chemistry 影響因子:0.971 PMID:
《Dihydrotestosterone synthesis in the sheep corpus luteum and its potential mechanism in luteal regression》 作者:Longfei Xiao  Liangli Song  Junjie Hu  Quanwei Zhang  Yuting Jiang  Hongwei Duan  Yong Zhang Xingxu Zhao  Yongli Hua 期刊:Wiley Online Library 影響因子: PMID:30671954
《Hypoxia-Inducible Factor 1-α (HIF-1α) Induces Apoptosis of Human Uterosacral Ligament Fibroblasts Through the Death Receptor and Mitochondrial Pathways》 作者:Xinrui Zhao, Lidong Liu, Rui Li, Xuan Wei, Wenqing Luan,Peishu Liu, and Jing Zhao 期刊:Medical Journal of Experimental 影響因子:1.42 PMID:
 

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