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土壤脫氫酶(S-DHA)活性檢測試劑盒

可(ke)見分光(guang)光(guang)度法

產地：北京市通(tong)州(zhou)區(qu)馬(ma)駒橋聯(lian)東U谷8三(san)樓
產品商(shang)標：solarbio
注意：正式(shi)測定前務(wu)必取2-3 個預期差異較(jiao)大的樣本做預測定
貨(huo)號：BC0390
規格(ge)：50T/24S
保存(cun)與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考(kao)價格：750
庫存狀態：現貨


產品簡(jian)介(jie)：
土壤脫(tuo)氫酶(mei)(Soil dehydrogenase, sDHA)的活(huo)性(xing)可以反(fan)映土壤體(ti)系內活(huo)性(xing)微生物量(liang)以及其對有機物(wu)的(de)降解活性，可以作為土(tu)壤(rang)微生物(wu)的(de)降解性能指標。
氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯(ben)(ben)基(ji)四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在細胞呼吸(xi)過(guo)程(cheng)中接受氫以后，被還原為三苯(ben)(ben)基(ji)甲臜（Triphenyl Formazone, TF），TF 呈(cheng)現紅色，在波長485nm 處有大吸(xi)收峰，采用分(fen)光(guang)光(guang)度法于485nm 測(ce)定其吸(xi)光(guang)值，即得土(tu)壤脫氫酶(mei)活性(xing)。

試(shi)(shi)驗(yan)中所需的儀器和試(shi)(shi)劑：
篩子、天平、恒溫培養箱或水浴(yu)鍋、低溫離心機、可見(jian)分光(guang)光(guang)度計、玻璃比色皿(min)，冰、蒸餾水、丙(bing)tong（不允許快(kuai)遞，請用戶自(zi)備）。

產(chan)品內容：
試劑一：粉劑×1 瓶，使用前加(jia)30ml 水溶解，4℃避(bi)光(guang)保存(cun)（盡量現(xian)配現(xian)用）。
試劑二(er)：液(ye)體50ml×1 瓶，4℃保存。
試劑三：丙tong，自(zi)備。

操作步驟(zou)：
一(yi)、樣本前處理：
1. 土壤樣品(pin)： 準確稱取過40 目篩的新鮮土壤樣品(pin)約(yue)0.1g（以保證TTC 與土壤顆(ke)粒充分接觸）。
2. 污泥樣品：污泥用蒸餾水洗滌，12000rpm，25℃，離心10 min，棄上清，反復(fu)3- 4 次。
二、測定操作(zuo)：
         ;           對照管(guan)       測定管(guan)
樣品（g）        0.1            0.1
試劑一（ml） 0.5
試劑二（ml） 1 0.5
充分(fen)混勻，37℃，暗培養6h，取(qu)出(chu)后立(li)即冰浴(yu)5min
試(shi)劑三(san)（ml） 0.5 0.5
反復震蕩數次，37℃保(bao)溫(wen)10min，12000rpm，4℃，離心5min，取上清1ml 于1ml 玻璃(li)比色皿，分(fen)光光度計(ji)提(ti)前30 分(fen)鐘預熱，蒸(zheng)餾(liu)水調零，測(ce)定對(dui)照(zhao)管(guan)和(he)測(ce)定管(guan)，計(ji)算△A。

脫氫(qing)酶活力的計算：
酶(mei)活單位定義：在(zai)37℃時(shi)，每克(ke)樣品每小時(shi)使(shi)每ml 反(fan)應體系OD 值每增加0.01 為(wei)一(yi)個酶活單位。
計算公式：sDHA 活(huo)性（U/g）=0.01△ A÷培養時(shi)間(jian)（6h）÷樣品(pin)質(zhi)量（0.1g）×V 反總(zong)（1.5ml）= 250×A485

注意事項：
1. 配制好的(de)試劑(ji)一(yi)避光保存于4℃，在一(yi)周內(nei)使用，若出現紅色，則不(bu)能使用。
2. 試劑三易揮發(fa)，有毒(du)，為了您的健康，請穿實驗服，戴口罩(zhao)，戴乳膠手套操作。
3. 反應(ying)完成后立即冰浴以(yi)終止反應(ying)。
4. 如果測定出來(lai)的吸(xi)光值(zhi)較(jiao)大，減少樣品用量再(zai)進行(xing)測定，若吸(xi)光值(zhi)過(guo)小則延長培養時間(jian)。
5. 試劑盒2-8℃保存。

相關文獻：
《SIRT5-mediated SDHA desuccinylation promotes clear cell renal cell carcinoma tumorigenesis》 作者:Yuanzhen Ma,Yijun Qi,Lei Wang,Zhaoxu Zheng,Yue 期刊:Free Radic. Biol. Med. 影響因子:5.657 PMID:30703481
 

土壤脫氫酶(S-DHA)活性檢測試劑盒