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         總膽固醇（TC）含量測定試劑盒 微量法

測定意義：血清TC是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。總膽固醇包括游離膽固醇和膽固醇酯。肝臟是TC合成和貯存的主要器官。膽固醇是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質的重要原料，也是構成細胞膜的主要成分，其血清濃度可作為脂代謝的指標。臨床上將血總膽固醇增高稱為高膽固醇血癥。

測定原理：酯酶催化膽固醇酯作用下水解成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），FC在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下，經過氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物，其顏色深淺與TC含量成正比。

總膽固醇（TC）含(han)量測(ce)定試劑盒 微量法

注意：正式測定(ding)之前選擇(ze)2-3 個預(yu)期(qi)差異大的樣本做(zuo)預(yu)測定(ding)。

貨號：BC1985

規(gui)格(ge)：100 管/96 樣(yang)

產品內容：

    試劑一：異丙醇100mL（自備）。

    TC 工作(zuo)液(ye)：液(ye)體20mL×1 瓶，4℃保(bao)存。

 ;   TC 標準(zhun)品：液體×1 支，0.5μmol/mL，4℃保存。

產品說明： TC 包括游(you)離膽(dan)(dan)(dan)(dan)固(gu)(gu)(gu)醇(chun)和膽(dan)(dan)(dan)(dan)固(gu)(gu)(gu)醇(chun)酯(zhi)。TC 是指組(zu)織中(zhong)所(suo)有脂蛋白(bai)所(suo)含(han)(han)膽(dan)(dan)(dan)(dan)固(gu)(gu)(gu)醇(chun)之總和。利用酯(zhi)酶催 化(hua)膽(dan)(dan)(dan)(dan)固(gu)(gu)(gu)醇(chun)酯(zhi)水解(jie)生成游(you)離膽(dan)(dan)(dan)(dan)固(gu)(gu)(gu)醇(chun)（FC）和游(you)離脂肪酸（FFA），從(cong)而把膽(dan)(dan)(dan)(dan)固(gu)(gu)(gu)醇(chun)酯(zhi)轉化(hua)為(wei)FC；進一(yi)步 利用膽(dan)(dan)(dan)(dan)固(gu)(gu)(gu)醇(chun)氧化(hua)酶催化(hua)FC 氧化(hua)，生成△4-膽(dan)(dan)(dan)(dan)甾烯酮和H2O2；后利用過氧化(hua)物(wu)酶催化(hua)H2O2 氧化(hua) 4-氨基安替(ti)比(bi)林(lin)和酚，生成紅色(se)醌(kun)類(lei)化(hua)合物(wu)；在500nm 有特(te)征吸收峰(feng)，其顏色(se)深淺與TC 含(han)(han)量成正 比(bi)。 自(zi)備(bei)儀(yi)器(qi)和用品： 可(ke)見分光光度計(ji)/酶標儀(yi)、可(ke)調式移液槍、微量石英比(bi)色(se)皿/96 孔板。

操作步驟:

一、TC 的提取：

1、 組(zu)織(zhi)(zhi)中TC 的提取(qu)：按(an)照組(zu)織(zhi)(zhi)質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取(qu)約0.1g 組(zu)織(zhi)(zhi)，加(jia)入1mL 試劑一）進行冰浴(yu)勻漿，8000g4℃離心10min，取(qu)上(shang)清，即(ji)TC待測(ce)液。

2、 細(xi)胞(bao)、細(xi)菌中TC 的提取：先收集400-500 萬細(xi)胞(bao)或細(xi)菌到離(li)心管內，棄上清，加1mL試劑(ji)一， 超聲波破碎1min（強(qiang)度20％，超聲2s，停1s），8000g4℃離(li)心10min，取上清，即TC 待(dai)測液。

3、 血清（漿）等樣(yang)品：直接測定。

二、測定操作：

1. 分光(guang)光(guang)度計(ji)預熱(re)30min，調(diao)節波長到500nm，蒸餾(liu)水(shui)調(diao)零。

2. TC 工(gong)作液(ye)置(zhi)于37℃水(shui)浴30min。

3. 標(biao)準(zhun)(zhun)管：在1mL 玻璃比(bi)色(se)皿中依次(ci)加入50μLTC 標(biao)準(zhun)(zhun)品和(he)150μLTC 工(gong)作液(ye)，混(hun)勻(yun)，靜置24h 后(hou) 于500nm 處比(bi)色(se)，記為A 標(biao)準(zhun)(zhun)管。

4. 測定管(guan)：在1mL 玻璃比色(se)皿中依(yi)次(ci)加入50μLTC 待(dai)測液和150μLTC 工作液，混勻，靜置24h后 于500nm 處比色(se)，記(ji)為A 測定管(guan)。

注意：標(biao)準管只(zhi)需(xu)測定一次。

相關文獻：

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