產品名稱:海藻糖含量檢測試劑盒

產品(pin)英文名: Micro Trehalose Content Assay Kit

產品貨號：BC0335        產地(di)：北京市通(tong)州區馬駒橋聯東U谷8三樓

產品規格：100管/96樣        產品商(shang)標：solarbio
保存(cun)與運輸：4℃保存(cun)或-20℃保存(cun)；            參考價格：840
庫存狀態：現貨                          
關鍵字:    海(hai)藻糖檢測試劑盒| | 海(hai)藻糖|試劑盒

簡要介紹(shao)：
海(hai)藻(zao)糖(tang)(tang)存在于(yu)大量有(you)機(ji)體(ti)中，包括細(xi)菌、藻(zao)類(lei)、酵(jiao)母、植物(wu)(wu)、昆蟲和其他無脊(ji)椎動物(wu)(wu)。由于(yu)海(hai)藻(zao)糖(tang)(tang)具有(you)*的(de)不同(tong)于(yu)其他碳水化合物(wu)(wu)的(de)生物(wu)(wu)學特性，能在干(gan)旱、高溫、脫水、冷凍、高滲(shen)透壓及(ji)毒(du)性物(wu)(wu)質等惡劣環境下保護生物(wu)(wu)體(ti)細(xi)胞蛋白(bai)質、脂(zhi)肪、糖(tang)(tang)類(lei)、核酸(suan)等組(zu)分不受損害。

產品詳細描(miao)述
產(chan)品內容：
提取液(ye)：液(ye)體100mL×1瓶，4℃保存(cun)；
試劑(ji)一：粉劑(ji)×1瓶，4℃保存；
標準品：粉劑×1支，含10mg海藻(zao)糖。
產品說(shuo)明：
海藻糖存在于大(da)量(liang)有(you)機體(ti)中，包(bao)括細菌(jun)、藻類、酵母、植物、昆蟲和其他無脊椎動物。由于海藻糖具有(you)*的不(bu)同于其他碳水化合物的生(sheng)物學特性，能在干旱(han)、高(gao)溫、脫水、冷凍、高(gao)滲透壓及毒性物質等(deng)惡(e)劣(lie)環(huan)境下保護生(sheng)物體(ti)細胞(bao)蛋白質、脂肪、糖類、核酸等(deng)組(zu)分不(bu)受損(sun)害。
測定方法(fa)采用蒽酮比色法(fa)。具有(you)靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣(yang)品(pin)的(de)測定等(deng)優點。但是蒽酮比色法(fa)也(ye)存在一定(ding)(ding)缺陷，如(ru)果樣本中含有(you)可溶(rong)性(xing)糖(tang)(tang)，則會影響測(ce)定(ding)(ding)。本試劑盒建議用于除海藻糖(tang)(tang)外(wai)不含其(qi)他可溶(rong)性(xing)糖(tang)(tang)樣本的測(ce)定(ding)(ding)。
需自備(bei)的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋(guo)、可調式移(yi)液器、1mL玻璃(li)比色皿﹑研缽(bo)、濃硫酸和(he)蒸餾水。

操作步驟：
一、海(hai)藻糖(tang)提取：   

1. 細(xi)菌或(huo)細(xi)胞處理(li)：收集細(xi)菌或(huo)細(xi)胞到離心管(guan)內，離心后棄上清(qing)；按照(zhao)每500萬細(xi)菌或(huo)細(xi)胞加入1mL提取(qu)液，超聲波破(po)碎細菌或(huo)細胞（功率20％，超聲3秒，間(jian)隔(ge)10秒，重復30次），室溫(wen)靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后(hou)，8000g，常溫(wen)離心，取(qu)上清。
2. 組織的(de)處理(li)：稱取約0.1g樣本，常溫(wen)研碎，加入1mL提取液，室溫(wen)靜置45min，振(zhen)蕩3~5次，冷卻后，8000g，常溫(wen)離心(xin)，取上清。
3. 血(xue)清(qing)（漿）的處理：吸(xi)取約100μL血(xue)清(qing)（漿），加(jia)入0.9mL提取液(ye)，室(shi)溫(wen)靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后，8000g，常(chang)溫(wen)離(li)心，取上(shang)清。
4. 標(biao)準(zhun)品(pin)的處理：標(biao)準(zhun)品(pin)用1mL雙蒸水溶解(jie)，溶液濃度(du)為(wei)10mg/mL，稀釋到0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0mg/mL。

二、測定操(cao)作表：

1. 分光(guang)光(guang)度計或酶標儀預(yu)熱30min，波(bo)長調(diao)(diao)節620nm，蒸餾水調(diao)(diao)零。調(diao)(diao)節水浴鍋95℃。
2. 工作液(ye)的配(pei)制：臨用(yong)前在每瓶試(shi)劑一中加入7mL蒸餾水后(hou)，緩(huan)慢加入28mL濃(nong)硫酸，不斷攪拌(ban)，充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。
3. 標準(zhun)曲(qu)線(xian)的建立：取60mL標準液和240mL現配的工作液混(hun)勻，95℃水浴10 min，（蓋緊，防止(zhi)水(shui)分散失）自(zi)然(ran)冷(leng)卻室(shi)溫(wen)，取200mL比色皿或酶標(biao)板中，在620nm處測(ce)吸光值A。根據標(biao)準樣本的(de)濃度（y）和吸光度（x）建立(li)標(biao)準曲線(xian)。
4. 樣(yang)本(ben)測定(ding)：取60mL樣本和240mL現(xian)配的(de)工作液混(hun)勻，95℃水浴10 min，（蓋(gai)緊，防止水分散失）自(zi)然冷(leng)卻室溫，取200mL比色皿或酶標(biao)板(ban)中(zhong)，在620 nm 波長下測定(ding)吸光度值為A。

若吸光值大(da)于1，請(qing)將樣本用提取液適(shi)當稀釋。后計算時乘以(yi)相應的稀釋倍數。 
三、海(hai)藻(zao)糖含量計算：
使用微量比色皿時，計算公式如下：
1、根(gen)據標準曲線(xian)計算(suan)樣本中海藻糖的(de)含量y（mg/mL）。
2、按樣本鮮重計(ji)算：
海藻糖含量(mg/g 鮮重(zhong))= V1×y÷(W×V1÷V2)=y ÷W。
3、按樣(yang)本(ben)蛋白(bai)濃度計算(suan)：
海藻(zao)糖含量(mg/mg prot)=V1×y÷(V1×Cpr)=y÷Cpr。
4、按細菌(jun)或細胞(bao)數(shu)量計算：
海藻糖含量(μg/10⁴ cell)=1000 × V1 × y÷(500 × V1÷V2)=2× y
5、血(xue)清（漿）海藻糖含量(liang)計(ji)算
海藻糖含量(liang)（mg/mL）＝V1×y÷(V3×V1÷V2)=10×y
V1: 反應體系中樣本體積，0.06mL；V2：提取(qu)液總體積(ji)，1mL；V3：血(xue)清(qing)、血(xue)漿體積，0.1mL；Cpr：樣本(ben)蛋白濃度，mg/mL；W：樣(yang)本質量(liang)，g；500：細(xi)胞或細(xi)菌(jun)總數(shu)，500萬(wan)；1000:單位換算(suan)系數，1mg/mL=1000mg/mL。
 注意：低檢測限(xian)為10μg/g 鮮重或0.1μg/mg prot。

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海藻糖含量檢測試劑盒