β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測試劑盒

產品名稱(cheng): β-葡(pu)萄糖苷酶(mei)(β-GC)活性檢測試劑盒

產品(pin)英文名: β-glucosidase（β-GC） Assay Kit

產品貨號(hao)：BC2560               產地：北京市通州區馬駒橋聯東(dong)U谷8三樓

產(chan)品(pin)規格：50管/24樣(yang)             產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：650
庫存(cun)狀態：現貨                          
關(guan)鍵(jian)字: β-葡萄糖苷酶檢測試劑盒|β-GC檢測試劑盒(he)|β-葡萄糖苷(gan)酶|試劑(ji)盒(he)

簡(jian)要介紹(shao)：
β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在(zai)于動物(wu)、植物(wu)、微生物(wu)和培養細胞中(zhong)，催化β-糖苷鍵水解，具有多方面生理作用(yong)：在(zai)纖維素的糖化作用(yong)中，β-GC負責進一(yi)步水解纖維(wei)素(su)二糖(tang)和纖維(wei)素(su)寡糖(tang)生成(cheng)葡(pu)萄糖(tang)；β-GC水解萜烯類(lei)香氣前(qian)驅體，使(shi)糖苷(gan)鍵合態變成游離(li)態。從而產生香味(wei)；β-GC能(neng)夠水(shui)解植物體內野黑櫻(ying)苷，釋(shi)放HCN，從而(er)防止昆蟲取食。
β-GC分解對-硝基ben-β-D-吡喃葡萄(tao)糖苷生成對-硝基ben酚，后者在400nm有(you)大吸收峰，通過測定吸光值(zhi)升高速率來計(ji)算β-GC活性(xing)。


產品詳細(xi)描述(shu)
產品(pin)內容：
提取液：液體50ml×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每(mei)瓶加入10ml雙蒸水，充分溶解備(bei)用；用不(bu)完的試(shi)劑仍-20℃保存。
試劑二：液體(ti)25ml×1瓶，4℃保存。
試(shi)劑(ji)三(san)：液(ye)體80ml×1瓶，4℃保存。  
標(biao)準品：液(ye)體1ml×1支，取1.5ml EP管加入1ml，5μmol/ml的對硝基(ji)ben酚溶液(ye)。


產品說明：
β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在于(yu)動(dong)物(wu)、植物(wu)、微生物(wu)和培養細(xi)胞(bao)中，催(cui)化(hua)β-糖(tang)苷鍵水解，具(ju)有多方(fang)面生理作(zuo)(zuo)用：在纖維素的糖(tang)化(hua)作(zuo)(zuo)用中，β-GC負責進一步水解纖維(wei)素(su)二糖和(he)纖維(wei)素(su)寡(gua)糖生(sheng)成葡萄糖；β-GC水解萜(tie)烯類(lei)香氣前驅(qu)體，使(shi)糖苷鍵合態變(bian)成游離態。從而產(chan)生香味；β-GC能夠水解(jie)植物(wu)體(ti)內(nei)野黑櫻苷，釋放HCN，從(cong)而防(fang)止(zhi)昆(kun)蟲取食(shi)。
β-GC分解對-硝基ben-β-D-吡喃葡萄(tao)糖苷生成(cheng)對-硝基ben酚，后者在400nm有大(da)吸收峰(feng)，通過(guo)測定吸光(guang)值升高速率來(lai)計算β-GC活(huo)性。

需自(zi)備的儀(yi)器和(he)用(yong)品：
可(ke)見(jian)分光光度(du)計、臺式(shi)離心機(ji)、水(shui)浴鍋、可(ke)調式(shi)移液器、1ml玻(bo)璃(li)比色(se)皿、研缽、冰和(he)蒸餾(liu)水(shui)。
操作步驟：
一、樣(yang)品的前(qian)處理：   

1. 細(xi)菌(jun)或(huo)(huo)培養(yang)細(xi)胞(bao)：先收集細(xi)菌(jun)或(huo)(huo)細(xi)胞(bao)到離(li)心(xin)管(guan)內，離(li)心(xin)后棄上(shang)清(qing)；按照細(xi)菌(jun)或(huo)(huo)細(xi)胞(bao)數量（10⁴個(ge)）：提(ti)取(qu)液體積（ml）為500~1000：1的(de)比例（建議500萬細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞加(jia)入1ml提(ti)取(qu)液），超聲(sheng)波(bo)破(po)碎細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞（冰(bing)浴，功率20％或(huo)200W，超聲(sheng)3s，間(jian)隔10s，重復(fu)30次(ci)）；15000g 4℃離(li)心10min，取上清，置冰(bing)上待測。
2. 組織(zhi)(zhi)：按照組織(zhi)(zhi)質量（g）：提(ti)取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(cheng)取約(yue)0.1g組織(zhi)(zhi)，加入1ml提(ti)取液），進(jin)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min，取上(shang)清，置冰(bing)上(shang)待測。

3、標(biao)(biao)(biao)準樣品的準備：取100μL標(biao)(biao)(biao)準液，加入到400μL試劑(ji)(ji)三中，得到1μmol/ml標(biao)(biao)(biao)準液，十倍稀(xi)釋(shi)到100nmol/ml，倍比稀(xi)釋(shi)：50、25、12.5、6.25nmol/ml，稀(xi)釋(shi)液用試劑(ji)(ji)二。100、50、25、12.5、6.25nmol/ml做標(biao)(biao)(biao)準液。
二、測定步驟：

1. 分光光度計預熱(re)30min以上(shang)，調(diao)(diao)節波長400nm，蒸餾水調(diao)(diao)零。
2. 加樣表

β- GC 活力單位的計算(suan)： 
1、標準曲(qu)線建立：根據標準管的濃度（y）和吸光度（x），建立標準曲(qu)線。
2、根(gen)據標(biao)準曲線(xian)，將ΔA（x）帶(dai)入公(gong)式計算(suan)樣品產物濃度（nmol/ml）。
（1）按(an)樣本(ben)蛋白濃(nong)度(du)計算：
單位的定(ding)義：每(mei)(mei)mg組織蛋白在每(mei)(mei)ml每(mei)(mei)小(xiao)時(shi)產生1nmol對(dui)-硝基ben酚定(ding)義為一(yi)個(ge)酶活力(li)單位。
β-GC活力(li)(U/mg prot)=(y×V反總)÷(V樣×Cpr)÷T=20×;y÷Cpr
需要(yao)另(ling)外(wai)測(ce)定(ding)，建(jian)議使用本公司(si)BCA蛋白質含量測(ce)定(ding)試劑盒(he)。
（2）按樣本鮮重計(ji)算：
單(dan)位的定義：每g組織在每ml每小時產生1nmol對(dui)-硝基ben酚(fen)定義為一個酶活力單(dan)位。
β-GC活力(U/g鮮重(zhong)) = (y×V反總)÷;(W×V樣÷V樣總)÷T=20×y÷W
（3）按(an)細菌或細胞(bao)密度(du)計算：
單位的定(ding)義(yi)：每(mei)1萬個(ge)細(xi)菌或細(xi)胞在每(mei)ml每(mei)小時產生1nmol對-硝基ben酚定(ding)義(yi)為一(yi)個(ge)酶活力(li)單位。
β-GC活力(li)(U/10⁴ cell)=(y×V反總)÷(500×V樣(yang)÷V樣(yang)總)÷T=0.04×y
Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/ml；V反(fan)(fan)總(zong)：反(fan)(fan)應體系總(zong)體積(ji)，1ml；V樣：加(jia)入反(fan)(fan)應體系中樣本體積(ji)，0.1ml；V樣總(zong)：加(jia)入提取(qu)液體積(ji)，1ml；W：樣品質量(liang)，g；500：細(xi)胞或細(xi)菌總(zong)數(shu)，500萬；T：反(fan)(fan)應時間(jian)，0.5h。

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相關文獻：
《Lactobacillus casei Strain Shirota Enhances the In Vitro Antiproliferative Effect of Geniposide in Human Oral Squamous Carcinoma HSC-3 Cells》 作者:Yu Qian ，Jia-Le Song ，Peng Sun ，Ruokun Yi ， Honglin Liu ， Xia Feng ， Kun-Young Park  and Xin Zhao 期刊:Molecules 影響因子:3.06 PMID:29751513