產品名稱:脂肪酶(LPS)活性(xing)檢測試劑盒
產品型號:BC2340
產品特點:脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒測定意義:LPS 又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。
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脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒
產(chan)品規格:50管/48樣 產品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:420
庫存(cun)狀態:現貨
關鍵(jian)字: 脂(zhi)肪酶(mei)檢測(ce)試劑盒|LPS檢測試劑盒|脂肪(fang)酶|試劑盒
簡要介(jie)紹:
LPS 又稱甘(gan)(gan)油(you)酯(zhi)(zhi)水(shui)(shui)解(jie)酶,催化甘(gan)(gan)油(you)三酯(zhi)(zhi)水(shui)(shui)解(jie)生成(cheng)脂(zhi)肪酸和甘(gan)(gan)油(you)(或者甘(gan)(gan)油(you)二酯(zhi)(zhi)和單(dan)酯(zhi)(zhi))。LPS廣泛的存在于(yu)各(ge)種生物中。血清(qing)中 LPS 的異常增高常見于(yu)胰腺炎和胰腺癌。
LPS 催化油酯水解成脂肪酸(suan)(suan),利用(yong)銅(tong)皂(zao)法測定(ding)脂肪酸(suan)(suan)生成速率,即可計算 LPS 活性。
產品詳細描述(shu)
產品內容:
試劑一:液體80mL×1瓶,4℃保存(cun)。
試劑二:液體10mL×1瓶(ping),室溫保存。
試劑(ji)三:液體20mL×1瓶,4℃保(bao)存(cun)。
標(biao)準品(pin):0.06mL×1支(zhi)。臨用前加(jia)入1.5 mL無水乙醇,充分(fen)溶解配制(zhi)成125 µmol/mL的油酸標(biao)準溶液,4℃保存。用前注意(yi)解凍溶解。
產品說明(ming):
LPS又稱甘(gan)油(you)酯水解(jie)(jie)酶,催化甘(gan)油(you)三酯水解(jie)(jie)生(sheng)成脂(zhi)肪酸和甘(gan)油(you)(或(huo)者甘(gan)油(you)二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于(yu)各(ge)種生(sheng)物中。血清中LPS的異常增(zeng)高(gao)常見于(yu)胰腺炎和胰腺癌。
LPS催化油酯水解成(cheng)脂肪酸,利用(yong)銅(tong)皂法測定脂肪酸生成(cheng)速率(lv),即可計算LPS活性。
自備儀器和用品:
研缽、臺式離心機、震蕩混勻器(qi)、可(ke)(ke)見分光光度計(ji)、1mL玻璃比(bi)色皿、可(ke)(ke)調式移液槍、甲苯、無水(shui)乙醇、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
組織樣品:稱取約0.1g樣品,加試劑一1.0 mL充分研磨(mo),于4℃,15000rpm離心30min,取上清液待測。
血(xue)清(qing)樣品:直(zhi)接檢測。
二、測定步驟:
加入(ru)試劑(mL) | 空白管 | 測定(ding)管 | 標準管(guan) | |||||
試劑(ji)一(yi) | 0.375 | 0.375 | 0.375 | |||||
試劑(ji)二 | 0.125 | 0.125 | 0.125 | |||||
反復震蕩(dang)混(hun)勻 | ||||||||
蒸餾(liu)水 | 0.2 | |||||||
上清液/血清 | 0.2 | |||||||
標(biao)準溶液 | 0.2 | |||||||
迅速(su)震蕩混勻后置于(yu)37℃水浴準確反應10 min | ||||||||
甲(jia)苯 | 1 | 1 | 1 | |||||
反(fan)復震蕩混勻后(hou),室(shi)溫(wen)4000rpm離心10 min | ||||||||
取(qu)出離心(xin)管,小心(xin)吸取(qu)上層溶(rong)液0.9 mL,加入另一2 mL塑料離心(xin)管中,按下表(biao)操作: | ||||||||
加(jia)入試劑(mL) | 空白管 | 測(ce)定管 | 標準管 | |||||
試劑三 | 0.225 | 0.225 | 0.225 |
反(fan)復震(zhen)蕩(dang)混勻;室(shi)溫4000rpm離心(xin)10 min,小(xiao)心(xin)吸(xi)取上(shang)層溶(rong)液800 μL,加入1mL玻璃比色皿(min),于710nm處測(ce)定(ding)吸(xi)光值。記為A空(kong)(kong)白(bai)(bai)管(guan)(guan)(guan),A測(ce)定(ding)管(guan)(guan)(guan),A標準(zhun)管(guan)(guan)(guan),計算ΔA測(ce)定(ding)= A測(ce)定(ding)管(guan)(guan)(guan)-A空(kong)(kong)白(bai)(bai)管(guan)(guan)(guan),ΔA標準(zhun)= A標準(zhun)管(guan)(guan)(guan)-A空(kong)(kong)白(bai)(bai)管(guan)(guan)(guan)。
三、LPS活性計算:
(1)按蛋白濃度計(ji)算(suan):
活性單位定義:37℃中每毫克(ke)蛋白(bai)每分鐘水解橄欖(lan)油(you)生成1μmol脂肪酸為一(yi)個酶活單位。
LPS (U/mg prot) =x×V樣÷(Cpr×V樣) ÷T= 0.1×x÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
活性單(dan)位定義(yi):37℃中每克(ke)組織(zhi)每分(fen)鐘水解(jie)橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單(dan)位。
LPS (U/g 鮮重) =x×V樣÷(W×V樣÷V提) ÷T= 0.1×x÷W
(3)按血清計(ji)算:
活(huo)性(xing)單位定(ding)義:37℃中每毫升血(xue)清每分鐘水解(jie)橄欖油生成1μmol脂肪酸為(wei)一個酶(mei)活單位。
LPS (U/mL 血清(qing)) =x÷T= 0.1×x。
V樣:加入反應(ying)體系中上清(qing)液體積,0.2 mL;Cpr:上清(qing)液蛋白質(zhi)濃度,mg/mL,需要另外(wai)測(ce)定,建議使用(yong)本公(gong)司BCA蛋白質(zhi)含量測(ce)定試(shi)劑盒;T:催(cui)化反應(ying)時間(jian),10 min。W:樣本鮮重,g;V提:提取液體積,1mL。
注意事項(xiang):
1、甲苯有毒,實驗(yan)過(guo)程中需佩戴手套(tao)和口罩。
2、實(shi)驗(yan)過程中須(xu)遠離火源。
3、當吸光度大(da)于1時(shi),建議將樣本稀釋(shi)后測量。
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