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產品名稱:脂肪酶(LPS)活性(xing)檢測試劑盒

產品型號:BC2340

產品報價:

產品特點:脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒
測定意義:LPS 又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。

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BC2340脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒的詳細資料:

脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒

 

產(chan)品名稱: 脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒

產品英文名(ming): Lipase(LPS) Assay Kit

產品貨號:BC2340          產地:北(bei)京市通州區馬(ma)駒(ju)橋(qiao)聯東U谷8三樓(lou)

產(chan)品規格:50管/48樣       產品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價格:420
庫存(cun)狀態:現貨                          
關鍵(jian)字: 脂(zhi)肪酶(mei)檢測(ce)試劑盒|LPS檢測試劑盒|脂肪(fang)酶|試劑盒

簡要介(jie)紹:
LPS 又稱甘(gan)(gan)油(you)酯(zhi)(zhi)水(shui)(shui)解(jie)酶,催化甘(gan)(gan)油(you)三酯(zhi)(zhi)水(shui)(shui)解(jie)生成(cheng)脂(zhi)肪酸和甘(gan)(gan)油(you)(或者甘(gan)(gan)油(you)二酯(zhi)(zhi)和單(dan)酯(zhi)(zhi))。LPS廣泛的存在于(yu)各(ge)種生物中。血清(qing)中 LPS 的異常增高常見于(yu)胰腺炎和胰腺癌。 
    LPS 催化油酯水解成脂肪酸(suan)(suan),利用(yong)銅(tong)皂(zao)法測定(ding)脂肪酸(suan)(suan)生成速率,即可計算 LPS 活性。

 
產品詳細描述(shu)
產品內容
試劑一:液體80mL×1瓶,4℃保存(cun)。
試劑二:液體10mL×1瓶(ping),室溫保存。
試劑(ji)三:液體20mL×1瓶,4℃保(bao)存(cun)。
標(biao)準品(pin):0.06mL×1支(zhi)。臨用前加(jia)入1.5 mL無水乙醇,充分(fen)溶解配制(zhi)成125 µmol/mL的油酸標(biao)準溶液,4保存。用前注意(yi)解凍溶解。

產品說明(ming)
LPS又稱甘(gan)油(you)酯水解(jie)(jie)酶,催化甘(gan)油(you)三酯水解(jie)(jie)生(sheng)成脂(zhi)肪酸和甘(gan)油(you)(或(huo)者甘(gan)油(you)二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于(yu)各(ge)種生(sheng)物中。血清中LPS的異常增(zeng)高(gao)常見于(yu)胰腺炎和胰腺癌。
LPS催化油酯水解成(cheng)脂肪酸,利用(yong)銅(tong)皂法測定脂肪酸生成(cheng)速率(lv),即可計算LPS活性。

自備儀器和用品:
    研缽、臺式離心機、震蕩混勻器(qi)、可(ke)(ke)見分光光度計(ji)、1mL玻璃比(bi)色皿、可(ke)(ke)調式移液槍、甲苯、無水(shui)乙醇、冰和蒸餾水。

操作步驟:
一、粗酶液提取:   
組織樣品:稱取約0.1g樣品,加試劑一1.0 mL充分研磨(mo),于4℃,15000rpm離心30min,取上清液待測。
血(xue)清(qing)樣品:直(zhi)接檢測。
二、測定步驟:

  1. 分光光度(du)計預熱30min以(yi)上,調節波長710nm,甲(jia)苯調零(ling)。
  2. 試(shi)劑(ji)一(yi)和試(shi)劑(ji)二(er)置(zhi)于37℃水浴預熱30min以上。
  3. 標準(zhun)溶液(ye)的(de)(de)稀釋(shi):將(jiang)125 µmol/mL的(de)(de)油酸標準(zhun)溶液(ye)稀釋(shi)為(wei)125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9 µmol/mL的(de)(de)標準(zhun)溶液(ye)待(dai)測。
  4. 操作表:
加入(ru)試劑(mL)空白管測定(ding)管標準管(guan)
試劑(ji)一(yi)0.3750.3750.375
試劑(ji)二0.1250.1250.125
反復震蕩(dang)混(hun)勻
蒸餾(liu)水0.2  
上清液/血清 0.2 
標(biao)準溶液  0.2
迅速(su)震蕩混勻后置于(yu)37℃水浴準確反應10 min
甲(jia)苯111
反(fan)復震蕩混勻后(hou),室(shi)溫(wen)4000rpm離心10 min
取(qu)出離心(xin)管,小心(xin)吸取(qu)上層溶(rong)液0.9 mL,加入另一2 mL塑料離心(xin)管中,按下表(biao)操作:
加(jia)入試劑(mL)空白管測(ce)定管標準管
試劑三0.2250.2250.225

反(fan)復震(zhen)蕩(dang)混勻;室(shi)溫4000rpm離心(xin)10 min,小(xiao)心(xin)吸(xi)取上(shang)層溶(rong)液800 μL,加入1mL玻璃比色皿(min),于710nm處測(ce)定(ding)吸(xi)光值。記為A空(kong)(kong)白(bai)(bai)管(guan)(guan)(guan),A測(ce)定(ding)管(guan)(guan)(guan),A標準(zhun)管(guan)(guan)(guan),計算ΔA測(ce)定(ding)= A測(ce)定(ding)管(guan)(guan)(guan)-A空(kong)(kong)白(bai)(bai)管(guan)(guan)(guan),ΔA標準(zhun)= A標準(zhun)管(guan)(guan)(guan)-A空(kong)(kong)白(bai)(bai)管(guan)(guan)(guan)。
三、LPS活性計算

  1. 標(biao)準曲線的繪(hui)制:以油酸標(biao)準溶液濃度為(wei)橫坐(zuo)標(biao),ΔA標(biao)準為(wei)縱坐(zuo)標(biao),繪(hui)制標(biao)準曲線,得(de)到標(biao)準方程(cheng)y=kx+b。將ΔA測定帶入(ru)方程(cheng),得(de)到x(µmol/mL)
  2. 酶活計算:

(1)按蛋白濃度計(ji)算(suan):
活性單位定義:37℃中每毫克(ke)蛋白(bai)每分鐘水解橄欖(lan)油(you)生成1μmol脂肪酸為一(yi)個酶活單位。
LPS (U/mg prot) =x×V樣÷(Cpr×V樣) ÷T= 0.1×x÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
活性單(dan)位定義(yi):37℃中每克(ke)組織(zhi)每分(fen)鐘水解(jie)橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單(dan)位。
LPS (U/g 鮮重) =x×V樣÷(W×V樣÷V提) ÷T= 0.1×x÷W
(3)按血清計(ji)算:
活(huo)性(xing)單位定(ding)義:37℃中每毫升血(xue)清每分鐘水解(jie)橄欖油生成1μmol脂肪酸為(wei)一個酶(mei)活單位。
LPS (U/mL 血清(qing)) =x÷T= 0.1×x。
V樣:加入反應(ying)體系中上清(qing)液體積,0.2 mL;Cpr:上清(qing)液蛋白質(zhi)濃度,mg/mL,需要另外(wai)測(ce)定,建議使用(yong)本公(gong)司BCA蛋白質(zhi)含量測(ce)定試(shi)劑盒;T:催(cui)化反應(ying)時間(jian),10 min。W:樣本鮮重,g;V提:提取液體積,1mL。
注意事項(xiang):
1、甲苯有毒,實驗(yan)過(guo)程中需佩戴手套(tao)和口罩。
2、實(shi)驗(yan)過程中須(xu)遠離火源。
3、當吸光度大(da)于1時(shi),建議將樣本稀釋(shi)后測量。


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相關文獻:
《Sadenosyl methionine regulates calcium channels and inhibits uterine smooth muscle contraction in rats with infectious premature delivery through the transient receptor protein 3/protein kinase Cβ/C?kinase?activated protein phosphatase?1 inhibitor of 17 kDa signaling pathway》 作(zuo)者:Jing Ge, Tao Han, Xiaoqiu Li, Lili Shan, Jinhuan Zhang, Yan Hong, Yanqiu Xia, Jun Wang, Mingxiao Hou 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影(ying)響因子(zi):1.41 PMID:29896230

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