產品名稱:游離脂肪酸(suan)(FFA)含量檢測試劑盒
產品型號:BC0590
產品特點:游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒測定意義:FFA既是脂肪水解的產物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內分泌功能有關。測定原理:FFA與銅離子結合形成脂肪酸銅鹽,并溶于lv仿;利用銅試劑法測定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。
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產品規格(ge):50管/24樣 產品(pin)商標(biao):solarbio
保(bao)存(cun)與運(yun)輸(shu):4℃保(bao)存(cun)或-20℃保(bao)存(cun); 參考(kao)價格:400
庫存狀(zhuang)態(tai):現貨
關鍵字: : 游離脂肪酸檢測試劑盒|FFA檢測試劑盒(he)| 游(you)離脂肪酸|試劑盒
簡要介紹:
FFA既是(shi)脂肪水解的(de)產物(wu)(wu),又是(shi)脂肪合成的(de)底物(wu)(wu)。血清中FFA的(de)濃(nong)度與脂類代謝、糖代謝、內分(fen)泌功能有關。
FFA與銅離(li)子結(jie)合形成脂(zhi)肪酸銅鹽,并溶于lv仿;利(li)用銅試劑法(fa)測定銅離(li)子含(han)(han)量,即可(ke)推(tui)算出游離(li)脂(zhi)肪酸含(han)(han)量。
產品(pin)詳細描(miao)述
產品內(nei)容:
提取液:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
試劑一:自備。實驗前,取一(yi)個(ge)玻璃瓶(ping),按照正geng烷:無水甲醇:lv仿=24:1:25的(de)比例配置(自(zi)備),蓋緊后混勻,室溫保(bao)存。
試劑二:液體16 mL×1瓶,室溫(wen)保存。
試劑三:粉(fen)劑×2瓶,4℃保存。臨用前每瓶加入32mL無(wu)水乙(yi)醇(chun)充(chong)分溶解,4℃可保存(cun)一周。
標準品(pin):粉劑×1支,10mg棕櫚酸,室溫保(bao)存(cun)。臨用前(qian)把試劑轉移到10 mL玻璃瓶中,加入
7.8 mLlv仿充分溶解,即為5μmol/mL的(de)棕櫚酸標準(zhun)溶液。
產品說(shuo)明:
FFA既(ji)是脂肪水(shui)解的產物(wu),又是脂肪合(he)成(cheng)的底物(wu)。血(xue)清(qing)中FFA的濃度(du)與脂類代謝、糖(tang)代謝、內分(fen)泌功能有關。
FFA與銅(tong)離子結合形成脂肪(fang)酸銅(tong)鹽,并(bing)溶于(yu)lv仿(fang);利用(yong)銅試劑法測(ce)定銅離子含量,即(ji)可推算出游離脂(zhi)肪(fang)酸含量。
自備儀(yi)器和用品:
研缽(bo)、冰、臺(tai)式離心機(ji)、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調(diao)式移液槍、一個40mL玻璃(li)瓶、一個10 mL玻璃瓶、正geng烷、無水(shui)甲醇(chun)、lv仿(三lv甲烷)、無水(shui)乙醇(chun)和蒸餾水(shui)。
操作步驟:
一(yi)、樣(yang)品中FFA提取:
1、血清中FFA測(ce)定:將所取血液,室溫靜置1 h 后,于4 ℃離心機3500 rpm離心15min,取上層血清置于-20℃冰箱(xiang)保存,待測。
2、組織中FFA含量測定:組織用生理鹽水(shui)沖洗干凈(jing)后,用吸水(shui)紙吸取(qu)表面水(shui)分,稱(cheng)取(qu)約0.1g,加入(ru)1.0 mL提取液,勻(yun)漿(jiang)后,8000rpm,4℃離心10min,取上清液,待測。
二、測定:
1. 分光(guang)光(guang)度(du)計預熱30 min以上,調(diao)節波長(chang)到550 nm,無(wu)水乙(yi)醇調(diao)零。
2. 試劑二在37℃水浴中預熱30 min以上。
3. 標準品(pin)(pin)的稀(xi)釋:將標準品(pin)(pin)稀(xi)釋成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。
4. 按下(xia)表在1.5mL離心管中加入(ru)相應試劑
對(dui)照管 | 測定管 | 空(kong)白管 | 標準(zhun)管 | |
蒸(zheng)餾水(μL) | 50 | |||
樣本(μL) | 50 | |||
lv仿(μL) | 50 | |||
標準品(μL) | 50 | |||
試劑一(μL) | 500 | |||
試劑(ji)二(μL) | 200 | |||
充分振蕩10min后(hou),3000rpm,離心10min | ||||
上層溶液(μL) | 200 | |||
試劑三(μL) | 800 | |||
充分(fen)振蕩2min后(hou),靜置(zhi)15min,于550 nm下測吸光(guang)值(zhi),分別記為A對照管、A測(ce)定管、A空白管、A標準管(guan)(guan)。(對照(zhao)管(guan)(guan)和空白管(guan)(guan)各只做一管(guan)(guan)) |
三、FFA含量計算:
1.標(biao)準曲線(xian)的繪制:
以(yi)標準(zhun)溶液的濃度(du)為x軸,以(yi)ΔA標準(ΔA=A標準(zhun)管-A空白管)為y軸,繪制標準曲(qu)線,得到方程y=kx+b。將ΔA(ΔA=A測定(ding)管-A對照(zhao)管)帶入方程得到x。
2.血清(qing)中FFA含(han)量計算
FFA(μmol/L)=1000x
(1)按樣本蛋白濃度計(ji)算
FFA含(han)量(μmol/mg prot)=x÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
FFA(μmol/g鮮重(zhong))=x×V樣總÷W
V樣總(zong):上(shang)清液總(zong)體積,1 mL;Cpr:樣本蛋(dan)白(bai)質濃(nong)度,mg/mL;W:樣品(pin)質(zhi)量,g。
注(zhu)意事項:
1.試(shi)劑(ji)三(san)配制應盡量晚配,可在操作到加(jia)入(ru)試(shi)劑(ji)二時,再配制試(shi)劑(ji)三(san)。
2.必(bi)須(xu)保證(zheng)每管(guan)的震(zhen)蕩(dang)頻率(lv)及時(shi)間一致。
3.盡量在30min內完(wan)成測(ce)量,并且測(ce)完(wan)后要密封(feng)好(hao)再丟棄。
4.因所用試劑(ji)多(duo)數為有機(ji)溶劑(ji),同一支吸頭多(duo)次(ci)吸取會造成(cheng)體積不準確,建議(yi)更(geng)換(huan)吸頭。
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游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒
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