色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

線粒體檸檬酸(MCA)含量檢測試劑盒

 紫外分光光度法 
注意：正式測(ce)定前務必(bi)取 2-3 個(ge)預(yu)期差異(yi)較(jiao)大(da)的樣本做預(yu)測(ce)定。

貨號：BC2170 
規格：25T/24S

產品內容： 
酸性提取液：液體 25 mL×1 瓶，4℃保存。 
堿性提取液：液體 25 mL×1 瓶，4℃保存。 
試劑一：液體 7.5mL×1 瓶，4℃保存。 
試劑二：液體 2.5mL×1 瓶，4℃保存。 
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 7.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑 4℃保 存。
標準品(pin)：液(ye)體 1mL×1 支，10µmol/mL 檸檬(meng)酸標準液(ye)，4℃保(bao)存。

產品說明： CA 是線粒體三羧(suo)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)循環的(de)第1個中間產物，由檸檬酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)合(he)酶(mei)催化乙酰(xian)(xian) CoA 與草酰(xian)(xian)乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)合(he)成，其 含(han)量(liang)(liang)是三羧(suo)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)循環強度的(de)主(zhu)要指標之一。 CA 在檸檬酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)裂解(jie)酶(mei)的(de)作(zuo)用下(xia)(xia)，生成α-酮(tong)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)（草酰(xian)(xian)乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)）；在弱酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)性條(tiao)件下(xia)(xia)，α-酮(tong)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)進一步與苯(ben)(ben) 肼反(fan)應，生成相(xiang)應的(de)α-酮(tong)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)苯(ben)(ben)腙；α-酮(tong)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)苯(ben)(ben)腙在 330nm 處有吸(xi)收峰，該(gai)波長下(xia)(xia)吸(xi)光度的(de)變化程度可 反(fan)應出 CA 的(de)含(han)量(liang)(liang)。

自備儀器和(he)用品： 紫(zi)外分(fen)光光度計、水(shui)浴鍋(guo)、可調式移液(ye)槍、1mL 石英比色皿、研缽和(he)蒸餾水(shui)。

操作步驟： 
一、線粒體中檸檬酸提取： 
1. 稱約 0.05-0.1g 組織（建議稱 0.1g 樣本），加入 0.5mL 酸性提取液，冰上充分研磨，600g/min 4℃ 離心 5min，取上清另一 EP 管中，11000g/min 4℃離心 10min，棄上清（取 300µL 該上清液和 300µL 堿性提取液中和后可用于細胞質 CA 含量測定）；
沉淀即線粒體，向沉淀中加入 0.5mL 酸(suan) 性(xing)提取液，充分懸浮(fu)溶(rong)解，超聲(sheng)波(bo)破碎(sui)（功率 20%，超聲(sheng) 3 秒，間隔 10 秒，重復 30 次(ci)），取此 溶(rong)液 300µL 和(he) 300µL 堿(jian)性(xing)提取液中和(he)，混勻，置冰上待測（不(bu)可用于蛋白質含量測定）。

相關文獻：

《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587
 

線粒體檸檬酸(MCA)含量檢測試劑盒