產品名稱(cheng):：ATP含量檢測試劑盒

產品英文(wen)名：ATP Content Assay Kit

產品貨號(hao)：BC0300            產地：北京市通州區馬駒橋(qiao)聯東U谷8三(san)樓

產品規(gui)格(ge)：100管/48樣                      產品(pin)商(shang)標：solarbio
保(bao)(bao)存與運輸：4℃保(bao)(bao)存或-20℃保(bao)(bao)存；            參考(kao)價(jia)格：1400
庫存狀(zhuang)態(tai)：現貨(huo)                ;   ;       
關鍵字：ATP含量(liang)檢(jian)測試劑盒|ATP檢(jian)測試劑盒|試劑盒|

簡要介紹(shao)：
ATP 廣泛(fan)存在于動物(wu)(wu)、植物(wu)(wu)、微生(sheng)物(wu)(wu)和培養細(xi)胞(bao)中，是(shi)生(sheng)物(wu)(wu)能(neng)量(liang)通貨，能(neng)荷是(shi)描(miao)述(shu)細(xi)胞(bao)能(neng)量(liang)代謝狀態的主要(yao)參(can)數(shu)。
    測(ce)定ATP 含量(liang)并且計(ji)算能荷，能夠反映(ying)能量(liang)代謝狀(zhuang)態。肌(ji)酸(suan)激酶催化(hua)肌(ji)酸(suan)和ATP 反應(ying)生(sheng)成磷酸(suan)肌(ji)酸(suan)，可在700nm 下用磷鉬酸(suan)比色法檢測(ce)磷酸(suan)肌(ji)酸(suan)含量(liang)，以(yi)此反應(ying)ATP 含量(liang)。

產品詳細(xi)描述
產品內容：

產(chan)品(pin)說明：
     三磷酸腺苷（adenosine 5'-triphosphate，ATP）是生物體(ti)內(nei)能(neng)量轉換基(ji)本的(de)載(zai)體(ti), 其含量(liang)的變化直接關系到各器官的能量(liang)代謝。ATP作(zuo)為(wei)重要的能量(liang)分子在細胞的各種生理(li)(li)、病理(li)(li)過程中起著重要作(zuo)用。ATP水(shui)平的改變，會影響(xiang)許多細胞(bao)(bao)的功能(neng)。通常細胞(bao)(bao)在凋亡(wang)、壞(huai)死或處于一些毒性狀態下，ATP水平會下降，而高葡萄(tao)糖刺(ci)激等對于一些細胞可以(yi)上調(diao)細胞內ATP水(shui)平。通常ATP水平的下降表明線粒(li)體的功能受損或下降，在(zai)細胞凋亡時ATP水平的下降通常和線粒(li)體的膜電位下降同時發生狀態。ATP含量測定試劑盒(he)可以用于(yu)檢測紅(hong)細胞或(huo)組織內的ATP水平。
自備儀器和用品：
分(fen)光光度計、水(shui)浴鍋(guo)、可調式移液(ye)槍、臺式離心(xin)機(ji)、研缽和蒸餾水。
操作(zuo)步驟(zou)：

• 樣本前處理：
• 紅(hong)細胞：抗(kang)凝全血(xue)(xue)取下層積(ji)壓紅細胞(bao)，一般按1:4的(de)體積(ji)比(bi)加雙蒸水進(jin)行稀釋，再(zai)混勻使溶(rong)血(xue)(xue)*，制備成溶(rong)血(xue)(xue)液(ye)(ye)。將制好(hao)的(de)溶(rong)血(xue)(xue)液(ye)(ye)加入玻(bo)璃試管中沸(fei)水加熱(re)煮10分鐘，取出(chu)混勻抽提1分鐘，4000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清液(ye)(ye)待測。
• 組織樣本：準確稱取組織重，按質量（g）：體積(mL)為1：9的比例加入9倍體(ti)積的沸雙蒸水，制(zhi)成10%的勻漿液，再(zai)置于(yu)沸水中煮10min，取出混勻抽提1min，3500轉/分(fen)鐘，離心10min，取上清液待測(ce)。
• 培養(yang)細胞：先離心處理將細胞(bao)和(he)培養(yang)上清分離，棄(qi)上清，得到下(xia)層沉淀細胞（一(yi)般細胞數量達(da)到10⁶ 個(ge)），將收集好的細胞(bao)加入300-500μL的(de)熱雙蒸水(shui)，置于(yu)熱水(shui)浴（90-100℃）中(zhong)勻漿(jiang)破碎后，將細胞懸液(ye)于沸水浴中(zhong)加熱10min，取出混(hun)勻抽提1min（渦旋混(hun)勻），即可用于測(ce)(ce)定。（如果存在大(da)塊細胞碎片，需離心后取上清(qing)測(ce)(ce)定）

二、操作(zuo)步(bu)驟

混(hun)勻，室(shi)溫靜(jing)置5min，波長(chang)636nm，光徑(jing)0.5cm，雙蒸(zheng)水調零，測定各管吸光值。
注意：在比色(se)前比色(se)皿用自來水洗(xi)(xi)10次，再用蒸餾水洗(xi)(xi)4-5次，以免(mian)磷污染。
如果樣本量大，建議將試劑混(hun)合后再按(an)照(zhao)該表操作
1混(hun)合試劑(ji)配制：
工作液A：按試劑(ji)一：試劑(ji)二：試劑(ji)三=100:200:30的比(bi)例配(pei)制，現(xian)用現(xian)配(pei)，按需(xu)配(pei)制。
工(gong)作液B：按試(shi)劑一：試(shi)劑二=100:200的比例配制，現(xian)用現(xian)配，按需配制。
2、試劑(ji)配好(hao)后按下表操作：

混(hun)勻，室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)5min，波長636nm，光徑0.5cm，雙蒸水調零，測定各管吸光值。
注意：在(zai)比色前比色皿用自來水洗(xi)10次，再用蒸餾(liu)水洗(xi)4-5次，以免磷污染。
ATP 含量計算：

1. 紅(hong)細胞中ATP 含量計算

ATP 含量(μmol/gHb)=[ (A 測定管-A 對(dui)照管)÷(A 標準管(guan)-A 空白)] ×標準品(pin)濃度（1×10³μmol/L）×樣本測定(ding)前稀釋倍數(shu)÷血紅蛋白(bai)濃度（gHb/L ) 

1. 組織、細胞(bao)中ATP 含量計算(suan)
2. ATP 含量(μmol/gprot)=[ (A 測定(ding)管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空(kong)白(bai))] ×標(biao)準品濃度(du)（1×10³μmol/L）×樣本測定前稀釋(shi)倍數÷待(dai)測(ce)樣本蛋(dan)白濃度（gprot/L )

注意(yi)：
1.要求(qiu)不能有(you)任何(he)磷污染，建議用(yong)一次性塑(su)料試管。
2.顯色應(ying)用液(ye)配(pei)好(hao)后，不可放置太久，一般可保存5天，現配(pei)現用。
3.組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)宜用2%-5%濃度的勻(yun)漿(jiang)上清(qing)，若樣本(ben)濃度過高，則底色過深（對(dui)照管OD過高），需稀(xi)釋測定(ding)，一般(ban)通過預實(shi)驗將(jiang)對(dui)照OD值控制在(zai)1.0以下。
 

相關文獻：

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《RIP3 inhibition protects locomotion function through ameliorating mitochondrial antioxidative capacity after spinal cord injury》 作者:Yang Wang，Jianhang Jiao，Shanyong Zhang，Changjun Zheng，Minfei Wu 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.743 PMID:31146112
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影響因子: PMID:30453281
《AMPK Inhibition Suppresses the Malignant Phenotype of Pancreatic Cancer Cells in Part by Attenuating Aerobic Glycolysis》 作者:Mingyue Hu1, Xiangxu Chen1, Li Ma1, Yu Ma1, Yuan Li1, Huihui Song1, Jiajia Xu1, Lingna Zhou1, Xiaoxue Li1, Yuhui Jiang1, Bo Kong2,3, Peilin Huang 期刊:JOURNAL OF CANCER 影響因子:3.182 PMID:31205544