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實(shi)驗原理(li)：細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在發生(sheng)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)時(shi)，會(hui)(hui)激活一些(xie)DNA內切(qie)(qie)酶(mei)(mei)(mei)，這些(xie)內切(qie)(qie)酶(mei)(mei)(mei)會(hui)(hui)切(qie)(qie)斷(duan)核(he)小體間的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)組(zu)DNA。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)時(shi)抽提DNA進行(xing)電泳檢(jian)測(ce)(ce)，可以(yi)發現180-200bp的(de)(de)(de)DNA ladder。基(ji)因(yin)組(zu)DNA斷(duan)裂時(shi)，暴露(lu)的(de)(de)(de)3'-OH可以(yi)在末端(duan)脫氧(yang)(yang)核(he)苷(gan)酸轉移酶(mei)(mei)(mei)(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的(de)(de)(de)催化下加上(shang)熒(ying)光素 (FITC) 標記(ji)的(de)(de)(de)dUTP (fluorescein-dUTP) ，從(cong)而(er)可以(yi)通過熒(ying)光顯微鏡或(huo)流式細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)儀進行(xing)檢(jian)測(ce)(ce)，從(cong)而(er)可進行(xing)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)檢(jian)測(ce)(ce)，這類方(fang)(fang)法(fa)稱為脫氧(yang)(yang)核(he)糖(tang)核(he)苷(gan)酸末端(duan)轉移酶(mei)(mei)(mei)介導(dao)的(de)(de)(de)缺口末端(duan)標記(ji)法(fa)（terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。 由于(yu)(yu)正常的(de)(de)(de)或(huo)正在增殖的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)幾乎沒有DNA的(de)(de)(de)斷(duan)裂，因(yin)而(er)沒有3'-OH形成，很少能(neng)夠被染(ran)色。TUNEL實(shi)際(ji)上(shang)是分子(zi)生(sheng)物學與(yu)形態(tai)(tai)學相結(jie)合的(de)(de)(de)研(yan)究方(fang)(fang)法(fa)，對完整的(de)(de)(de)單個凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)核(he)或(huo)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)小體進行(xing)原位染(ran)色，能(neng)準確地(di)反應細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)典型的(de)(de)(de)生(sheng)物化學和形態(tai)(tai)特征(zheng)，可用于(yu)(yu)石(shi)蠟(la)包(bao)埋組(zu)織(zhi)切(qie)(qie)片(pian)、冰凍組(zu)織(zhi)切(qie)(qie)片(pian)、培(pei)養的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和從(cong)組(zu)織(zhi)中分離的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)形態(tai)(tai)測(ce)(ce)定，并可檢(jian)測(ce)(ce)出極少量的(de)(de)(de)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，因(yin)而(er)在細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)的(de)(de)(de)研(yan)究中被廣泛采用.這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法(fa)檢(jian)測(ce)(ce)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)(diao)(diao)亡(wang)的(de)(de)(de)原理(li)。

參考文獻：
《The establishment of clonally derived chicken embryonic fibroblast cell line (CSC) with high transfection efficiency and ability as a feeder cell》 作者:Ruifeng Zhao , Jing Jin , Xinyu Sun , Kai Jin , Man Wang , Mahmoud F. Ahmed , Qisheng Zuo , Yani Zhang ,Zhenhua Zhao , Guohong Chen , Bichun Li 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影響因子:3.062 PMID:30076744
《Knockdown of TLR4 attenuates high glucose-induced podocyte injury via the NALP3/ASC/Caspase-1 signaling pathway》 作者:Yang Liu,Zhonggao Xu,Fuzhe Ma,Ye Jia,Guannan Wang 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.743 PMID:30257355

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