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產品名稱:凋亡檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI

產品型號:CA1050

產品報價:

產品特點:凋亡檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI
細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使 PS 暴露在細胞膜外表面。PS 是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使 PS 暴露在細胞膜外。

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CA1050凋亡檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI的詳細資料:

凋亡檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI

產(chan)品簡(jian)介:
細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)(diao)亡(wang)(wang)(wang)(wang)早(zao)期改(gai)變發生在(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)表(biao)(biao)面(mian)(mian),這些細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)表(biao)(biao)面(mian)(mian)的(de)(de)(de)改(gai)變之一(yi)是磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)酰絲氨酸(PS)從細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)內轉移(yi)到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)外,使 PS 暴(bao)露在(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)外表(biao)(biao)面(mian)(mian)。PS 是一(yi)種帶負電荷的(de)(de)(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi),正常主要存在(zai)(zai)(zai)于(yu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)的(de)(de)(de)內面(mian)(mian),在(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)發生凋(diao)(diao)亡(wang)(wang)(wang)(wang)時細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)上的(de)(de)(de)這種磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)分布的(de)(de)(de)不(bu)(bu)對稱性被破壞而(er)使 PS 暴(bao)露在(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)外。Annexin V 具有(you)易于(yu)結(jie)合到磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)類如 PS 的(de)(de)(de)特性,對 PS 有(you)高度的(de)(de)(de)親和性。因(yin)此,該蛋白(bai)可充當(dang)一(yi)敏感的(de)(de)(de)探針檢測暴(bao)露在(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)表(biao)(biao)面(mian)(mian)的(de)(de)(de) PS。PS 轉移(yi)到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)外不(bu)(bu)是凋(diao)(diao)亡(wang)(wang)(wang)(wang)所*的(de)(de)(de),也(ye)可發生在(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)壞死中。兩種細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)死亡(wang)(wang)(wang)(wang)方(fang)式間的(de)(de)(de)差別是在(zai)(zai)(zai)凋(diao)(diao)亡(wang)(wang)(wang)(wang)的(de)(de)(de)初(chu)始階段細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)是完好(hao)的(de)(de)(de),而(er)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)壞死在(zai)(zai)(zai)其早(zao)期階段細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)的(de)(de)(de)完整性就破壞了。因(yin)此,可以采用 AnnexinV 與(yu)PI 雙染的(de)(de)(de)方(fang)法,通過(guo)流(liu)式檢測細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)早(zao)期凋(diao)(diao)亡(wang)(wang)(wang)(wang)。

操作步驟:
標記的 Annexin V 可結合流式細胞儀用于檢測細胞外膜上的磷酯酰絲氨酸
1.用去離子水按 1:4 稀釋結合緩沖液(4ml 結合緩沖液+12ml 去離子水);
2.用 4℃預冷的 PBS 洗細胞兩次,用 250ul 結合緩沖液重新懸浮細胞,調節其濃度為 1× 106/ml;
3.取 100µl 的細胞懸液于 5ml 流式管中,加入 5µl Annexin V/Alexa Fluor 647 和 10µl 20ug/ml的碘化丙錠溶液;
4. 混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘;
5. 在反應管中加 400µl PBS,流式(shi)細胞(bao)儀(FACS)分析

 相關文獻:

《The establishment of clonally derived chicken embryonic fibroblast cell line (CSC) with high transfection efficiency and ability as a feeder cell》 作者:Ruifeng Zhao , Jing Jin , Xinyu Sun , Kai Jin , Man Wang , Mahmoud F. Ahmed , Qisheng Zuo , Yani Zhang ,Zhenhua Zhao , Guohong Chen , Bichun Li 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影響因子:3.062 PMID:30076744
 

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