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G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒

規格: 1L

保存: 室溫(wen)(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12 個月。

試劑盒內(nei)容： 

**銀 2g

染色液(ye)A 100ml

顯色液B 100ml

顯色液(ye)C 100ml

終止液D 100ml

注：1L 規格指可配制的(de)(de)**銀染色液的(de)(de)體積，實際使用次數根據PAGE 膠大小不同而不同。

二、G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒的簡(jian)介:

核酸銀(yin)染的原(yuan)(yuan)理是(shi)銀(yin)離子可與核酸形成穩(wen)定(ding)的復(fu)合物(wu)，然后用(yong)還原(yuan)(yuan)劑如(ru)甲醛在堿(jian)性環境下使Ag+還原(yuan)(yuan)成銀(yin)

顆粒，可(ke)把核酸電(dian)(dian)泳(yong)帶染(ran)成黑褐色(se)(se)。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電(dian)(dian)泳(yong)染(ran)色(se)(se)。其(qi)靈敏度比EB 高(gao)200 倍(bei)，該(gai)產品

整個過程只需要(yao)20 分(fen)鐘，操作簡單，靈敏度高，能檢測(ce)到(dao)10ng 以下(xia)的DNA 條帶。

三、的使(shi)用操(cao)作步驟:

一、染色(se)液配(pei)制

需要配(pei)制的染色液體積根(gen)據(ju)PAGE 膠(jiao)(jiao)的大小而定，一般的mini-PAGE 膠(jiao)(jiao)需要20-30mL。配(pei)制用的器(qi)皿清洗(xi)

干(gan)凈(jing)后用去離子水涮洗，染色液須(xu)用去離子水配(pei)(pei)制，現用現配(pei)(pei)。如果(guo)配(pei)(pei)制的溶液體積不(bu)是100mL，可以按比(bi)例(li)

改變各(ge)成(cheng)分用(yong)量。

1，**銀(yin)染液(ye)：稱取0.2g **銀(yin)，加入(ru)到(dao)90ml 去(qu)離子(zi)水(shui)中*溶解(jie)，加入(ru)10ml 溶液(ye)A 混勻(yun)，現用現配。

2，顯色液(ye)(ye)：分別取(qu)溶液(ye)(ye)B 和溶液(ye)(ye)C 各10ml 加入80ml 去離子水中(zhong)混勻(yun)，現用現配。

3，終止液：取終止液D 10ml 加去離子(zi)水(shui)稀釋(shi)100ml，現用(yong)現配。

二、：

1，PAGE 電泳結(jie)束后(hou)，將PAGE 蛋白膠轉移(yi)玻(bo)璃(li)平(ping)皿或(huo)搪瓷盤中，用去離子水(shui)漂洗兩遍，每次2min。

2，將PAGE 膠(jiao)轉移**銀染液中，使染液沒過PAGE 膠(jiao)，室溫染色10min。可置于搖床上緩慢搖晃，使

其(qi)染色均勻(yun)。

3，棄去染色液，用去離(li)子水(shui)快(kuai)速(su)漂洗三次，每次半分鐘。

4，將PAGE 膠轉移顯(xian)(xian)色液中，使(shi)顯(xian)(xian)色液沒過(guo)PAGE 膠，室溫搖晃顯(xian)(xian)色條(tiao)帶(dai)清晰可見。

5，可選，將PAGE 膠轉移終止(zhi)液中，終止(zhi)顯色1min。

6，銀染后PAGE 膠(jiao)可拍照保(bao)存(cun)或用于后續(xu)試驗。

四、PAGE 凝膠快速銀染試劑盒的注(zhu)意事(shi)項：

1. 銀(yin)染主要出現在(zai)PAGE 膠的表面，使用(yong)薄膠（0.5-0.75mm）可以提高靈敏度。

2. 對(dui)于考馬斯亮藍染(ran)色的(de)SDS-PAGE 膠(jiao)，可(ke)用(yong)甲(jia)醇將膠(jiao)漂洗后，繼續進行銀染(ran)。考染(ran)過程中的(de)乙酸會干

擾銀染(ran)，因此要確保將(jiang)PAGE 凝(ning)膠中殘留的乙酸(suan)*洗(xi)凈。

3. 不同蛋白質對銀(yin)染的反(fan)應是不一樣的，尤其(qi)是堿性蛋白染色(se)效果差。因此，不宜用銀(yin)染測定不同蛋白

的(de)比例(li)。

4. 染色過程中，緩(huan)慢的(de)振蕩是必(bi)要的(de)，一般選擇40-60 rpm.

5. 凝(ning)膠(jiao)表(biao)面的裂紋多(duo)是(shi)由于壓力、手印(yin)及表(biao)面干燥所(suo)(suo)致，所(suo)(suo)以全程中都應帶手套操作。

6. PAGE 凝膠背(bei)景呈均(jun)一的黑色多是水中的雜質(zhi)引起的，所以溶液的配(pei)制(zhi)應使用電導(dao)率小于1 μS 的去(qu)離(li)

子水(shui)。

7. 如果染色(se)后有呈灰(hui)塵或煙(yan)霧狀灰(hui)色(se)或棕色(se)的(de)沉淀出現在(zai)凝(ning)膠表面(mian)，可能是在(zai)幾步(bu)漂洗(xi)過(guo)程中洗(xi)得不夠

*，或是染色過程時溫(wen)度太低。

8. 較深的(de)銀染背景多是(shi)丙烯(xi)酰胺(an)中的(de)雜質(zhi)所致。

9. PAGE 膠中(zhong)的甘(gan)油、尿素、甘(gan)氨酸、Triton X-100 和兩性電解質這(zhe)些物(wu)質會干擾銀染。

10. 室溫操(cao)作時(shi)，溫度的波動往往會干(gan)擾(rao)銀染(ran)的效果，恒溫水(shui)浴可以解決這(zhe)個問題(ti)。

11. 憑(ping)借戊(wu)二醛預處理(li)可以使各種蛋白質的染色提高(gao)40 倍。

12. 染色(se)使用(yong)的玻璃器皿必(bi)須非常(chang)干凈，用(yong)酸浸泡可以滿足要求。

13. 銀(yin)染(ran)應(ying)盡快照相，隨著時間(jian)延長，蛋白條帶會變淺，而背(bei)景會加深。

14. 銀(yin)染容器(qi)理想(xiang)的是(shi)玻璃(li)平皿(min)，其次是(shi)搪瓷盤(pan)和密(mi)胺塑(su)料盤(pan)等。

五(wu)、與PAGE凝膠快速銀(yin)染試劑盒的相關產品：

P1305 考馬斯亮藍染色液

P1300-500 考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液

P0012 10×麗春紅染色液

PR1400 低分子量蛋白MARKER

PR1700 預染次高分子量蛋白MARKER

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