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瓊脂糖凝膠CL-4B

貨號：S8741

規格：10ml/100ml/500ml

產品說(shuo)明 

瓊(qiong)脂(zhi)糖凝膠CL-4B是在瓊脂糖凝膠4B的基礎上(shang)通過交聯使微球(qiu)的剛性增強，理化性能提高，有(you)利用于工業(ye)生(sheng)產(chan)。該介質(zhi)用于生(sheng)物大分子的凝膠層析。本品呈白色球(qiu)狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhi)。本(ben)產(chan)品具(ju)有很高(gao)的化(hua)學穩定(ding)性、高(gao)流速、較好的機械性能、可(ke)多次重(zhong)復使(shi)用(yong)等特(te)點，非特(te)異性吸附低，回收率高(gao)，可(ke)用(yong)有機溶(rong)劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗，適用(yong)于(yu)工業規模生(sheng)產(chan)，廣泛用(yong)于(yu)生(sheng)物制藥(yao)和生(sheng)物工程下游蛋白質、核酸及多肽的凝膠色譜純化(hua)。

瓊脂糖凝膠CL-4B操作(zuo)步驟：(僅(jin)供參考)

1、裝柱(zhu)

凝(ning)膠過(guo)濾介質的(de)(de)使用對裝(zhuang)柱(zhu)的(de)(de)要求較高(gao)，為了保(bao)證分離(li)效(xiao)果，一般通過(guo)柱(zhu)子(zi)上加一個(ge)裝(zhuang)柱(zhu)器來使分離(li)柱(zhu)裝(zhuang)滿凝(ning)膠，或采用帶有軸(zhou)向加壓裝(zhuang)置的(de)(de)柱(zhu)子(zi)。凝(ning)膠柱(zhu)床一般高(gao)于(yu)60cm。裝(zhuang)柱(zhu)效(xiao)果可用染(ran)料或丙酮-水溶液進行檢驗。

以下過程為(wei)通用介質(zhi)裝填過程。若為(wei)帶(dai)有軸向加壓裝置(zhi)的柱子，可在柱床(chuang)穩定后將柱床(chuang)壓緊，接好管路。

（1）讓(rang)所有的材料和試劑(ji)達(da)到室溫。配制緩沖(chong)(chong)液。凝膠層析上樣、平(ping)衡和洗脫只用一(yi)種低鹽濃(nong)度的緩沖(chong)(chong)液。

（2）選(xuan)擇一根一定直徑(jing)的柱子(zi)(zi)，長約(yue)30~60cm,根據(ju)柱子(zi)(zi)大(da)小取所(suo)需量的凝膠（約(yue)為柱床體(ti)積的1.15倍），清洗掉20%乙(yi)醇，抽干，用緩沖(chong)液（按(an)凝膠：緩沖(chong)液=3：1的比例）配成勻漿。

（3）將柱(zhu)內及(ji)柱(zhu)子底端(duan)用(yong)水或緩沖(chong)液(ye)潤濕并保持(chi)一小(xiao)段(duan)液(ye)位（液(ye)面略(lve)高于濾膜），務必使底端(duan)無氣泡(pao)。

（4）用玻(bo)璃棒引導勻漿沿著(zhu)柱(zhu)(zhu)內壁一次性倒(dao)入柱(zhu)(zhu)內，注意勿(wu)使產生(sheng)氣泡。打開柱(zhu)(zhu)子(zi)出液口，使凝膠在柱(zhu)(zhu)內自由沉(chen)降(jiang)，連結好(hao)柱(zhu)(zhu)子(zi)頂端柱(zhu)(zhu)頭。

（5）打(da)開(kai)蠕動泵(beng)，讓緩沖液用使(shi)用時(shi)流(liu)(liu)速的1.33倍(bei)的流(liu)(liu)速流(liu)(liu)過，使(shi)柱床(chuang)穩定。用緩沖液平衡柱子，到柱床(chuang)穩定。

（6）推薦用一(yi)個裝(zhuang)(zhuang)柱器輔助裝(zhuang)(zhuang)柱。裝(zhuang)(zhuang)完后柱床上端輕輕刮平(ping)，上好柱頭。

2、平衡:讓緩沖液以(yi)一定流(liu)(liu)速流(liu)(liu)過(guo)柱子(zi)，到流(liu)(liu)出液電導和pH不變(bian)。

3、上樣:

（1）樣品用(yong)緩沖液配制(zhi)，要離(li)心和過(guo)濾后上(shang)樣。含鹽量過(guo)大(da)、濃(nong)度過(guo)小的樣品要先做處理，再上(shang)樣。

（2）介質對樣品(pin)組(zu)分(fen)(fen)的分(fen)(fen)離是按組(zu)分(fen)(fen)分(fen)(fen)子量大小進行的，分(fen)(fen)子量大的先流出來(lai)。

（3）上樣(yang)體積約為柱體積的1~2%，越小分離越好(hao)。

4、洗脫:用緩(huan)沖液(ye)洗(xi)脫，洗(xi)脫中保(bao)持流速、緩(huan)沖液(ye)組成不變(bian)。

5、再生(sheng):一(yi)般(ban)用緩沖(chong)液(ye)洗到平衡(heng)，可再次使(shi)用。

6、在位清洗

（1）對于以離子(zi)鍵結(jie)合上去的蛋白，可以用2M Nacl去除。

（2）對沉淀蛋白、對以疏水性結合的(de)蛋白或脂類，可(ke)用(yong)1M NaOH 去除。

（3）對強疏水性(xing)結合的(de)(de)蛋(dan)白、脂(zhi)類等(deng)，用4~10倍柱(zhu)體積的(de)(de)70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注(zhu)意有機溶劑(ji)的(de)(de)濃(nong)度以梯度的(de)(de)方式逐漸增加，否則容易產生氣(qi)泡。

清洗完畢后，用(yong)少3倍緩沖液平(ping)衡柱子(zi)。

7、去熱源

用0.5M的氫氧化鈉(na)清洗(xi)柱(zhu)子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉(na)24小時。或用以下(xia)方法步驟去除(chu)：

（1）2倍柱體積的70%乙醇；

（2）2倍柱(zhu)體積50mM Tris-HCl pH7.5；

（3）1倍柱體積4M尿素(su)；

（4）3倍柱體(ti)積的(de)Tris緩沖液+0.1M NaCl；

以(yi)上緩沖液(ye)都在(zai)無熱源的雙蒸水中配制(zhi)。

8、 消毒:用0.5~1M NaOH室溫(wen)下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液(ye)平衡柱子。

注(zhu)意事(shi)項(xiang)

在裝柱、使用和保存柱子(zi)的時候，要避免(mian)柱子(zi)流(liu)干，氣泡(pao)進入

產品應密封貯存(cun)在4℃~25℃（保(bao)存溶液為20% 乙醇），通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。

用(yong)過(guo)的柱子貯(zhu)存在4℃（20% 乙(yi)醇）。

本產(chan)品避免(mian)與氧化劑接(jie)觸(chu)；避免(mian)長時(shi)間(jian)暴露在空氣(qi)中(zhong)。

保質(zhi)期：5年。