谷丙轉氨酶(GPT)活性檢測試劑盒

產品名稱:：谷丙轉氨酶(GPT)活性檢測試劑盒

產(chan)品(pin)英文名:  Glutamic-pyruvic Transaminase（GPT）Assay Kit

產品貨號：BC1550              產地(di)：北京(jing)市通州區馬駒(ju)橋聯東U谷8三樓

產品規格(ge)：50管/24樣(yang)           產品商標：solarbio
保存與(yu)運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：130
庫存狀(zhuang)態：現貨(huo)                          
關鍵字: ：  谷丙轉(zhuan)氨酶檢(jian)測試劑盒|GPT檢測(ce)試(shi)劑盒|谷丙轉(zhuan)氨酶(mei)|試劑盒

簡要(yao)介紹：
GPT（EC 2.6.1.2）廣泛存在于動(dong)物(wu)、植物(wu)、微(wei)生(sheng)物(wu)和培養細(xi)胞中(zhong)，催化氨(an)基酸(suan)和酮酸(suan)轉氨(an)基反應，在氨(an)基酸(suan)代謝中(zhong)具有重要(yao)作用。此外，哺乳動(dong)物(wu)肝(gan)(gan)細(xi)胞GPT 活性(xing)(xing)很高(gao)，當(dang)肝(gan)(gan)細(xi)胞壞(huai)死，GPT 釋放到血液中(zhong)，血清GPT 活性(xing)(xing)顯著增(zeng)高(gao)。因此，GPT 被(bei)世(shi)界衛生(sheng)組織推(tui)薦為肝(gan)(gan)功能損害敏感的檢測指標。
    GPT 催化丙氨酸(suan)和α-酮戊二(er)酸(suan)發生轉氨基反應，生成丙tong酸(suan)(suan)和谷氨酸(suan)(suan)；加入2,4-二硝基ben肼溶液(ye)，不僅終(zhong)止上述(shu)反(fan)應，而且(qie)與酮酸(suan)(suan)中(zhong)的羰(tang)基加成(cheng)，生(sheng)成(cheng)丙tong酸苯腙；苯腙在堿性(xing)條件下呈紅棕色，可以在505nm 讀(du)取吸光(guang)值(zhi)并(bing)計(ji)算酶活力。

產品詳細描(miao)述
產品內容：
提取液：30mL×1瓶，4℃保存；
試(shi)劑一：液體8mL×1瓶，4℃保存；
試劑二(er)：液體(ti)8 mL×1瓶，4℃保存；
試(shi)劑三(san)：液體(ti)(ti)80mL×1瓶，4℃保存(cun)；
標準品：液(ye)體1mL×1支，20μmol/mL丙tong酸鈉標(biao)準品，4℃保存(cun)。
產品說明：
GPT（EC 2.6.1.2）廣泛存在于動物(wu)、植物(wu)、微生物(wu)和培養(yang)細胞中，催化氨基(ji)酸和酮(tong)酸轉氨基(ji)反應，在氨基(ji)酸代謝中具有重(zhong)要作(zuo)用。此(ci)外，哺乳動物(wu)肝(gan)細胞GPT活(huo)性(xing)很高，當肝(gan)細胞壞(huai)死，GPT釋放到血液中，血清GPT活性顯著增高。因此，GPT被(bei)世界(jie)衛(wei)生組織推薦為肝功能損(sun)害敏感的檢測指標。
GPT催化丙氨酸和(he)α-酮戊二酸發生轉氨基反應，生成(cheng)丙tong酸和谷(gu)氨酸；加入2,4-二硝基ben肼溶液，不僅終(zhong)止上述反應，而且(qie)與(yu)酮酸中的羰基加成，生成丙tong酸苯腙；苯腙在堿性條(tiao)件下呈紅棕色，可以在505nm讀取吸光值并計(ji)算酶活(huo)力(li)。
自備儀器和用品：
可見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)、水浴(yu)鍋(guo)、臺式離(li)心機、可調式移液器、1 mL玻璃(li)比色皿、研缽(bo)、冰(bing)和(he)蒸(zheng)餾水。
操作步(bu)驟(zou)：
一(yi)、樣(yang)品測定的準(zhun)備
1、細(xi)胞或(huo)微生物樣品的制備(bei)：
先(xian)收(shou)集細胞或(huo)微生物(wu)樣(yang)品到(dao)離心管內，棄上(shang)清，按照每(mei)500萬細胞或微生物加(jia)入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞(bao)（功率20％，超聲(sheng)3s，間隔10s，重復30次）。3500g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：
稱取約0.1g組織，加入1mL提(ti)取(qu)液進冰浴行(xing)勻漿。3500g  4℃離心10min，取上清(qing)，置冰上待測。
3、血清(qing)（漿）樣品：直接檢測。
二、測定操(cao)作表：

1. 分(fen)光光度計預熱30min以上，調節波(bo)長505nm，蒸(zheng)餾水調零(ling)。
2. 標準曲(qu)線(xian)的測(ce)定(ding)

先(xian)將標準品稀釋2μmol/mL，按下表(biao)混(hun)合標準品和試劑一得到濃度梯度標準管：
 

1. 在(zai)EP管中加入下(xia)列試劑

注:0μmol/mL 標準管為空白(bai)管。
三、計算

1. 標準曲(qu)線的(de)繪制：

以(yi)各(ge)標準(zhun)(zhun)溶液濃度為(wei)x軸(zhou)，以(yi)?A（A標準(zhun)(zhun)管-A空白管）為(wei)y軸(zhou)做(zuo)標準(zhun)(zhun)曲(qu)線，得到方(fang)程y=kx+b。將（A測定管(guan)-A對照(zhao)管(guan)）帶(dai)入方(fang)程求x值。

1. GPT活性計算：

（1）按樣本鮮(xian)重計算：
單(dan)位(wei)定(ding)義：每小時每g鮮重樣品催(cui)化產生1μmol丙tong酸的(de)量為一(yi)個GPT活力單(dan)位(wei)。
GPT（U/g鮮重(zhong)）=x×（V樣本+V試劑一）÷（W×V樣本÷V樣總）÷T=12x÷W。
（2）按樣本蛋白濃度計算：
單位定義：每(mei)小時每(mei)mg組織蛋白催化(hua)產生1μmol丙tong酸的量為一個GPT活(huo)力單位。
GPT（U/mg prot）=x×（V樣(yang)本(ben)+V試(shi)劑一）÷（Cpr×V樣(yang)本(ben)）÷T=12x÷Cpr。
（2）按血清(qing)體(ti)積計算：
單(dan)位定(ding)義：每小時每mL血(xue)清樣品催(cui)化產生1μmol丙tong酸的量為一個GPT活力單(dan)位。
GPT（U/mL）=x×（V樣(yang)本+V試劑一(yi)）÷V樣(yang)本÷T=12x。
V樣(yang)(yang)本(ben)：樣(yang)(yang)本(ben)體(ti)積(ji)，0.02mL；V試(shi)劑(ji)一：試(shi)劑(ji)一體(ti)積(ji)，0.1mL；V樣(yang)(yang)總：提取(qu)液體(ti)積(ji)，1mL；W：樣(yang)(yang)本(ben)鮮重，g；Cpr：樣(yang)(yang)本(ben)蛋白質濃度，mg/mL；T：反(fan)應時間，0.5h。

相關文獻：
《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影響(xiang)因子:5.646 PMID:30373678