產品(pin)名稱(cheng):：  乙酰膽堿酯酶(AchE)活性檢測試劑盒

產品英文名:  Acetylcholinesterase(AchE) Assay Kit

產品貨號：BC2020              產地：北(bei)京市通(tong)州區(qu)馬駒橋(qiao)聯(lian)東U谷8三樓(lou)

產(chan)品(pin)規格(ge)：50管/24樣            產(chan)品商標：solarbio
保(bao)存與運(yun)輸(shu)：4℃保(bao)存或-20℃保(bao)存；            參考價格：180
庫存狀態：現貨                  ;        
關鍵字:  乙(yi)酰膽堿酯酶檢測試劑盒|AchE檢測試(shi)劑盒|乙酰(xian)膽堿酯酶|試劑盒

簡要(yao)介紹：
AchE是一種絲氨(an)酸水解(jie)酶，廣泛存在于各種動物組織和(he)血清中。在神經突觸間(jian)隙(xi)中AchE通過催化(hua)水解(jie)神經遞(di)質(zhi)乙酰膽堿（Ach）來維持神經沖動的正常(chang)傳遞(di)，在生物神經傳導中起重(zhong)要作用。
    AchE催化Ach生成(cheng)(cheng)膽堿，膽堿與(yu)二硫對硝(xiao)(xiao)基ben甲(jia)酸(suan)（DTNB）作用生成(cheng)(cheng)5-巰基-硝(xiao)(xiao)基ben甲(jia)酸(suan)（TNB），TNB在(zai)412nm處有吸收峰，通過測定TNB的(de)生成(cheng)(cheng)量，即可計算出(chu)AchE的(de)活性。

產品(pin)詳細描(miao)述
產品內容(rong)：
提取液(ye)：液(ye)體25mL×1瓶，4℃保(bao)存。
試劑一：液(ye)體55mL×1瓶，4℃保存。
試劑(ji)二(er)：粉劑(ji)×1瓶，4℃保存。臨用前加(jia)入5.2mL試劑(ji)一(yi)，充(chong)分震蕩溶(rong)解。
試(shi)劑三(san)：粉劑×1瓶(ping)，4℃保存。臨用(yong)前(qian)加入5.2mL試(shi)劑一(yi)，充分震蕩溶解。
試劑(ji)四：粉(fen)劑(ji)×1瓶，4℃保存。臨(lin)用(yong)(yong)前加入5mL蒸餾水溶(rong)解備用(yong)(yong)。
產品說明：
乙酰膽(dan)堿酯酶(mei)（AchE）屬于絲氨酸水(shui)(shui)解酶(mei)，廣泛存在(zai)(zai)于各種動(dong)物組織和血清中。AchE催(cui)化乙酰膽(dan)堿（Ach）水(shui)(shui)解，在(zai)(zai)神經傳導調(diao)節中起重要作用。
AchE催化(hua)Ach水解(jie)生成膽(dan)堿(jian)，膽(dan)堿(jian)與二硫對硝基ben甲(jia)酸（DTNB）作用生成5-巰基-硝基ben甲(jia)酸（TNB）；TNB在412nm處有吸收(shou)峰，通過測定412 nm吸光度增加速率，計算(suan)AchE活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍(qiang)、1mL玻(bo)璃比(bi)色(se)皿，研(yan)缽/勻漿(jiang)器，蒸餾水。
操作步驟：

• 粗酶液提(ti)取：
• 組(zu)織：按(an)照組(zu)織質量（g）：提取液體積(mL)為(wei)1：5~10的比例（建(jian)議(yi)稱取約0.1g組(zu)織，加入1mL提取液）進行冰浴(yu)勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清液待(dai)測(ce)。
• 細菌、真(zhen)菌：按照細胞數(shu)量（10⁴個）：提取液體積(ji)（mL）為500~1000：1的(de)比例（建議500萬細(xi)胞(bao)加入(ru)1mL提取液），冰(bing)浴(yu)超聲波(bo)破碎細(xi)胞(bao)（功率300w，超聲3秒(miao)，間(jian)隔7秒(miao)，總(zong)時(shi)間(jian)3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置(zhi)于冰(bing)上待測。
• 血清等液體：直(zhi)接測定。
• 測定操作(zuo)：
• 可見分光光度計預熱30 min，調節波長(chang)到(dao)412 nm，蒸餾水調零。
• 操作表：

• AchE活(huo)性計算公式：
• 組(zu)織(zhi)AchE活性
• 按照蛋白濃(nong)度計算(suan)

活性(xing)單(dan)位(wei)定義：每毫克蛋白每分鐘催(cui)化產生1nmol TNB為1個酶活單(dan)位(wei)。
AchE酶活(huo)(U/mg prot)= [ΔA÷ε÷d×V顯色(se)×10⁹] ÷（Cpr ×V樣×V上(shang)清÷V酶促）÷T
                   = 2255×ΔA ÷Cpr。

1. 按照樣(yang)本質量計算

活性(xing)單位(wei)定義：每克組織每分鐘催(cui)化產生1nmol TNB為1個酶(mei)活單位(wei)。
AchE酶(mei)活(huo)(U/g鮮重(zhong))= [ΔA÷ε÷d×V顯色×10⁹]÷（W ×V樣(yang)(yang)÷V樣(yang)(yang)總×V上清(qing)÷V酶促）÷T
                  = 2255×ΔA÷W。

1. 細(xi)菌、細(xi)胞AchE活性

活性(xing)單位定義：每10⁴個細胞(bao)每分鐘催化產生(sheng)1nmol TNB為(wei)1個酶活單位。
AchE酶活(U/10⁴ cell)= [ΔA÷ε÷d×V顯色×10⁹]÷（細(xi)胞數(shu)量×V樣(yang)÷V樣(yang)總×V上(shang)清(qing)÷V酶促）÷T
= 2255×ΔA÷細胞(bao)數量

1. 血清AchE活性(xing)

活性單位定(ding)義：每毫升血(xue)清每分鐘(zhong)催(cui)化產生1nmol TNB為1個酶活單位。
AchE酶活(huo)(U/mL)= [ΔA÷ε÷d×V顯色×10⁹]÷（V樣×V上清÷V酶(mei)促）÷T =2255×ΔA
ε：TNB摩爾(er)消(xiao)光系數，13.6×10³ L/mol/cm；V顯色：顯色反(fan)應體系總(zong)體積（L），1 mL=0.001 L；10⁹：1mol=1×10⁹nmol；V酶(mei)促(cu)：酶(mei)促(cu)反應總體積，0.23mL；V上清：吸取上清液體積，0.05mL；V樣(yang)總：加入提(ti)取液體積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣(yang)本質量，g；V樣(yang)：加入樣(yang)本體積（mL），0.03 mL；T：反應時間，5min；細(xi)胞數量(liang)：提(ti)取時的細(xi)胞數量(liang)，萬個。
注(zhu)意事項：
1.測定過程中樣本和工作(zuo)液在冰上放置，以(yi)免變性和失(shi)活(huo)。
2.當吸光值大于1時，建議將樣本稀釋后測定。

相關文獻：
《Chronic toxicity and biochemical response of Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae) exposed to acetamiprid and propiconazole alone or combined》 作者:Wensu Han，Yemeng Yang，Jinglin Gao，Dongxiang Zhao，Chengcai Ren，Shijie Wang，Shan ZhaoYihai Zhong 期刊:Ecotoxicology 影響因子:2.46 PMID:30874992
《Neuroprotective effects of cordycepin inhibit Aβ-induced apoptosis in hippocampal neurons》 作者:Hao Song,Li-Ping Huang,Yuping Li,Chao Liu,Songhua Wang,Wei Meng,Shanshan Wei,Xin-Ping Liu,Yanchun Gong,Li-Hua Yao 期刊:NeuroToxicology 影響因子:3.263 PMID:30031108
《Effects of Phytase Transgenic Maize on the Physiological and Biochemical Responses and the Gut Microflora Functional Diversity of Ostrinia furnacalis》 作者:Xiao Hui Xu, Yinghui Guo, Hongwei Sun, Fan Li, Shuke Yang, Rui Gao & Xingbo Lu  期刊:Scientific Reports 影響因子:4.011 PMID:29535326

 

乙酰膽堿酯酶(AchE)活性檢測試劑盒