產品名稱：DNS試(shi)劑 生(sheng)化試(shi)劑盒
產品型號：D7800
產品報價：
產品特點：DNS試劑 生化試劑盒有效期1年儲存條件2-8℃外觀（性狀）橘黃色透明溶液北京索萊寶生產DNS試劑，可用于比對標準葡萄糖曲線，是測植物總糖和還原糖檢測（硝基水楊酸法）的成分之一。
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DNS試(shi)劑說明書
貨號：D7800
規(gui)格：100mL/500mL
保存：4°C避光保存，12個月有效。
產品說明：
植物(wu)體內的碳(tan)素營(ying)養狀況以及農產品的品質性狀，長(chang)以糖(tang)(tang)含(han)量(liang)作為(wei)重(zhong)要指標。單(dan)糖(tang)(tang)和某些寡糖(tang)(tang)（如麥芽(ya)糖(tang)(tang)）含(han)有游離的醛基(ji)或酮(tong)基(ji)，具(ju)有還(huan)(huan)原性，屬于(yu)還(huan)(huan)原糖(tang)(tang)；多糖(tang)(tang)和蔗糖(tang)(tang)等屬于(yu)非還(huan)(huan)原糖(tang)(tang)。可以利(li)用多糖(tang)(tang)能(neng)被酸水(shui)解為(wei)單(dan)糖(tang)(tang)的特性通過測定水(shui)解后的單(dan)糖(tang)(tang)含(han)量(liang)對總(zong)糖(tang)(tang)進行測定。
DNS試(shi)劑是(shi)植物總糖和(he)還(huan)原(yuan)(yuan)糖檢測(ce)(ce)（硝基(ji)水楊酸法）的成分之一，其檢測(ce)(ce)原(yuan)(yuan)理是(shi)還(huan)原(yuan)(yuan)糖在堿性(xing)條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝(xiao)基水楊酸(suan)被還原為棕紅(hong)色(se)的氨基化合(he)物。在(zai)一(yi)(yi)定范圍內，還原糖的量(liang)與棕紅(hong)色(se)產物的顏色(se)深(shen)淺程(cheng)度呈一(yi)(yi)定比例關系(xi)。在(zai)540nm處(chu)測(ce)定棕紅色物質的吸(xi)光度，該吸(xi)光度值與(yu)還(huan)(huan)原糖(tang)含量呈(cheng)線性關系，利(li)用比(bi)色法和標準(zhun)曲線測(ce)得樣品中的還(huan)(huan)原糖(tang)和總糖(tang)的含量。本試劑僅用于科研領(ling)域，不宜用于臨床診斷(duan)或其他用途。
自備材(cai)料：
1、蒸餾水
2、50mL離心管
3、離心機
4、水浴鍋或恒溫箱
5、分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計
6、鹽酸溶液、氫氧化鈉(na)溶液
操作步驟：（僅供參考）
1、還原糖的(de)提取：
（1）稱取(qu)植(zhi)物樣(yang)品0.5-3g，剪碎(sui)，加入蒸(zheng)餾水約3mL勻漿，轉移至燒杯或三(san)角瓶中，用12mL蒸(zheng)餾水沖洗研磨器2-3次，洗出液也轉移至該容器。
（2）50°C水浴30min，并不時攪拌，以便還原(yuan)糖*浸出。
（3）將沉淀和浸出液轉移至(zhi)50mL離心管，4000g離(li)心5min。
（4）留取上清液(ye)，向沉淀中加入20mL蒸(zheng)餾水(shui)，混勻(yun)，再次4000g離心5min。
（5）留(liu)取上(shang)(shang)清液，將二次獲得的上(shang)(shang)清液合并，用蒸餾水(shui)定容至100mL（提(ti)取液），混勻，作為還原糖待測(ce)液。
2、總糖的水解和提取：
（1）稱取植(zhi)物樣品0.5-3g，剪碎，加入蒸餾水約3mL勻(yun)漿，轉移至(zhi)燒(shao)杯(bei)或三角瓶中(zhong)，用12mL蒸(zheng)餾水沖洗研磨器2-3次，洗出液(ye)也轉移至該容器(qi)。
（2）向容器中加(jia)入10mL 6M 鹽酸溶液(ye)，攪(jiao)拌均勻，煮沸30min，并不時攪拌。
（3）取兩滴滴加(jia)于載(zai)玻(bo)片上(shang)，滴加(jia)一滴顯(xian)色液，檢查水解是否*，如已經(jing)水解*，則不顯(xian)示藍色。
（4）水解(jie)完(wan)畢后(hou)，冷(leng)卻至室溫(wen)，加(jia)入6M氫氧化(hua)鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸(zheng)餾水定容至100mL，混勻(yun)，4000g離心5min或過濾。
（5）取上(shang)清或濾液(ye)10mL，用蒸餾水定容至(zhi)100mL，成稀釋1000倍的總糖水解液（提取液），取1mL總糖水(shui)解液，測定其還原糖的含量。
3、制作葡(pu)萄糖(tang)標準曲線：取干(gan)凈離心(xin)管或試管，按下(xia)表進(jin)行操作，以0號調零，檢測540nm處(chu)吸(xi)光度，以(yi)吸(xi)光度值為(wei)縱坐標，各標準濃(nong)度（mg/mL）為橫(heng)坐標(biao)作圖得(de)標(biao)準曲線。
加入物質（mL） | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Glu標準（1mg/mL） | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
蒸餾(liu)水 | 1.0 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 | 0 |
DNS試(shi)劑 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
沸水浴中準確煮沸5min，取出，自來水冷卻至(zhi)室溫。 | ||||||
蒸餾水(shui) | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 |
相當(dang)于葡萄(tao)糖量 | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
4、還原糖(tang)測定：取(qu)制備(bei)好的還原糖(tang)提取(qu)液(ye)(ye)或者(zhe)總糖(tang)水解液(ye)(ye)1mL，分別加(jia)入(ru)DNS試劑2mL，其余操作(zuo)同標準曲(qu)線的操作(zuo)，540nm處測定各管的吸光度(du)。
計算：
還原糖的百分含量（%）=（C×VT）/（m×VS）×100
總糖(tang)的百(bai)分含量：
總糖(tang)含量（%）=（C×VT）/（m×VS）×100×10×0.9
式中：C=從標準曲線查的糖量（mg）
VT=提取液的體積（mL）
m=植(zhi)物樣品(pin)的質量(liang)（mg）
VS=測定時用的樣(yang)品體積(ji)（mL）
注意事(shi)項：
1、上述低溫試(shi)劑避(bi)免反復凍(dong)融，以(yi)免失效或效率下降。
2、待測樣本如(ru)不(bu)能及時(shi)測定，應置于2-8°C保(bao)存，3天(tian)內穩定。
3、如果樣品還原糖濃度(du)過高，應用蒸餾(liu)水(shui)稀釋后重(zhong)測(ce)，結果乘(cheng)以稀釋倍(bei)數。
4、總(zong)(zong)糖(tang)(tang) 計算公式在測定干擾(rao)雜質(zhi)很少(shao)、還原糖(tang)(tang)含量(liang)(liang)相對總(zong)(zong)糖(tang)(tang)含量(liang)(liang)很少(shao)時使用，×0.9是(shi)為(wei)了從測定出的總(zong)糖水解(jie)成單糖中，扣除水解(jie)時所消(xiao)耗(hao)的水量。
相(xiang)關文獻:
[1] Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,et al. Transcription factor VmSeb1 is required for the growth, development, and virulence in Valsa mali. Microbial Pathogenesis. October 2018;132-138. (IF 2.332)
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