產品名稱：2,2- 聯喹啉- 4,4- 二甲酸二鈉BCA 蛋(dan)白定量
產品型號：PC0022-Solarbio
產品報價：
產品特點：2,2- 聯喹啉- 4,4- 二甲酸二鈉BCA 蛋白定量堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡合物，測定其在562nm處的吸收值，并與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結果，但受螯合劑（EDTA, EGTA）
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2,2- 聯喹啉- 4,4- 二甲酸二鈉BCA 蛋白定量
操作說明：
一. 微孔酶標儀法
1. 配制工作液(ye)：根據標準品(pin)和(he)樣品(pin)數量，按50體積BCA試劑(ji)加1體積Cu試劑(ji)（50:1）配制成BCA工作液(ye)，充分混勻(yun)(混合(he)時可能會(hui)有渾濁，但混勻(yun)后就會(hui)消失)。BCA工作液(ye)室溫(wen)24小時內(nei)穩定。
2. 稀(xi)釋(shi)(shi)標準(zhun)品(pin)(pin)(pin)：取10μL BSA標準(zhun)品(pin)(pin)(pin)用PBS稀(xi)釋(shi)(shi)100μL（樣品(pin)(pin)(pin)一般可用PBS稀(xi)釋(shi)(shi)），使終濃(nong)度為0.5mg/mL。將標準(zhun)品(pin)(pin)(pin)按(an)0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加(jia)到96孔(kong)板(ban)的蛋白標準(zhun)品(pin)(pin)(pin)孔(kong)中，加(jia)PBS補足20μL。
3. 將(jiang)樣(yang)品(pin)作(zuo)適當(dang)稀釋（建議多做幾個(ge)梯(ti)度，如作(zuo)2倍(bei)(bei)、4倍(bei)(bei)、8倍(bei)(bei)稀釋），加20μL到96孔板的(de)樣(yang)品(pin)孔中。由于移液器(qi)在(zai)取小(xiao)量樣(yang)品(pin)時誤(wu)差(cha)偏大，標(biao)準(zhun)線(xian)前面(mian)的(de)點可(ke)能(neng)不(bu)很準(zhun)確，所(suo)以盡(jin)可(ke)能(neng)的(de)讓樣(yang)品(pin)點落在(zai)標(biao)準(zhun)線(xian)1/2后。
4. 各孔加入(ru)200μL BCA工作液(ye)，37℃放置15-30分(fen)鐘(zhong)。用(yong)酶標儀(yi)測(ce)定A562nm，根據標準曲線(xian)計算出蛋白濃度(du)。使用(yong)溫(wen)箱孵(fu)育時，應注意防止因水(shui)分(fen)蒸發影(ying)響檢測(ce)結果。
二. 分光光度計法 如(ru)沒有(you)酶標儀，可用分光光度(du)計在(zai)離心(xin)管中混(hun)勻后加入比(bi)色皿中比(bi)色。 步(bu)驟如(ru)下：
1. 配(pei)制工(gong)作(zuo)液: 根據標準品和樣品數(shu)量，按50體積BCA試(shi)劑(ji)加1體積Cu試(shi)劑(ji)（50:1）配(pei)制成BCA工(gong)作(zuo)液，充分混(hun)勻(混(hun)合時(shi)可能會有渾濁，但混(hun)勻后就會消(xiao)失)。BCA工(gong)作(zuo)液室(shi)溫24小時(shi)內(nei)穩定(ding)。
2. ;稀(xi)釋標準品：取100μL BSA標準品用(yong)PBS稀(xi)釋1mL（樣品一般可用(yong)PBS稀(xi)釋），使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支（或者更多(duo)）5mL離心管(guan)，標(biao)上號，按(an)下表加入試劑。
4.37℃放(fang)置15-30分鐘。用分光光度(du)計(ji)測562nm處吸(xi)光值，根據標準曲線計(ji)算出蛋白濃度(du)。
注意事項：
1. 長期不(bu)用時，Cu試(shi)劑(ji)與PBS稀(xi)釋液可置于2-8℃保存，如發現(xian)細(xi)菌污染則應丟棄(qi)。BCA試(shi)劑(ji)在低溫條(tiao)件下出現(xian)結(jie)晶(jing)沉淀時，可37℃溫育(yu)使(shi)其(qi)*溶(rong)解, 不(bu)影響(xiang)使(shi)用。
2. 樣品中若含有較多干擾物(wu)質時(shi)，請采(cai)用Bradford蛋白濃度(du)測(ce)定試(shi)劑盒。
3. 為(wei)了您的(de)安全和健康(kang)，請穿實(shi)驗服(fu)并戴一次性手(shou)套(tao)操作(zuo)。
參考文獻：
《Endometrial mesenchymal stem cells isolated from menstrual blood repaired epirubicin-induced damage to human ovarian granulosa cells by inhibiting the expression of Gadd45b in cell cycle pathway》 作(zuo)者:Zhongrui Yan?, Fengyi Guo?, Qing Yuan?, Yu Shao?, Yedan Zhang?, Huiyan Wang?, Shaohua Hao and Xue Du authorView ORCID ID profile 期(qi)刊:Stem Cell Research & Therapy 影響因子(zi):4.963 PMID:30606243
2,2- 聯喹啉- 4,4- 二甲酸二鈉BCA 蛋白定量
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