產品名稱: 谷氨酸(Glu)含量檢測試劑盒

產品英文名: Glutamic Acid(Glu) Content Assay Kit

產品貨(huo)號：BC1580           產地：北(bei)京市通州(zhou)區馬駒橋(qiao)聯東(dong)U谷(gu)8三樓

產品規格：50管(guan)/48樣        產品商標：solarbio
保(bao)(bao)存與運輸：4℃保(bao)(bao)存或-20℃保(bao)(bao)存；            參考價格：360
庫存狀(zhuang)態(tai)：現(xian)貨(huo)                          
關鍵(jian)字(zi): ：  谷氨酸檢(jian)測試(shi)劑盒|Glu檢測試劑盒(he)|谷氨酸|試劑盒

簡要介(jie)紹(shao)：
Glu廣泛存在(zai)于動物、植物、微生(sheng)物和(he)培(pei)養細胞中，不僅是組(zu)成蛋白質的20種氨基(ji)酸(suan)之(zhi)一，而(er)且(qie)通(tong)過轉(zhuan)氨基(ji)作用參(can)與多種氨基(ji)酸(suan)合成，是生(sheng)物體(ti)內(nei)主要(yao)氨基(ji)來(lai)源之(zhi)一。此(ci)外，Glu還(huan)是味精的主要有效成分(fen)，常用做食品添(tian)加劑以及(ji)香料生產。
谷氨酸脫氫酶（GDH）催化谷(gu)氨(an)酸和NAD生成(cheng)α-酮戊二(er)酸、NADH和NH₄⁺，引起340nm處(chu)吸(xi)光度的(de)上升，通過測定(ding)340nm吸光度的變化，計算谷(gu)氨酸(suan)含量。

產(chan)品詳細描述(shu)
產品內容：
試劑一：液(ye)體100mL×1瓶，4℃保存(cun)；
試劑二：液體5mL×1瓶，4℃保存；
試(shi)劑(ji)三(san)：粉劑(ji)×1瓶，-20℃保(bao)存，臨用前加入(ru)40mL試(shi)劑一；
試劑四：粉劑×1瓶，-20℃保(bao)存，臨用前加入2.5mL 試劑二；
標準品：液體0.5mL×1支(zhi)，4℃保(bao)存。10μmol/mL 谷氨(an)酸標(biao)準品。
產品說(shuo)明：
Glu廣泛存在(zai)于動物、植(zhi)物、微生物和培(pei)養細(xi)胞中，不僅是組成(cheng)蛋白質的20種(zhong)氨基(ji)酸之一，而且通過轉氨基(ji)作用參與多種(zhong)氨基(ji)酸合成(cheng)，是生物體內主要氨基(ji)來源之一。此(ci)外，Glu還是味精(jing)的主要有效成分(fen)，常用做食品添加劑以及香料生產。
谷氨酸脫氫酶(mei)（GDH）催化谷(gu)氨(an)酸和NAD生成α-酮戊(wu)二酸、NADH和(he)NH₄⁺，引起340nm處吸光度的上升，通(tong)過測(ce)定340nm吸(xi)光度(du)的變化，計(ji)算谷氨酸含量。
試(shi)驗中(zhong)所需的(de)儀器和試(shi)劑：
紫(zi)外(wai)分(fen)光(guang)光(guang)度計、臺式離心機、可調(diao)式移液器、1 mL石(shi)英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
操作(zuo)步驟：
一、谷氨酸提取
細(xi)(xi)菌(jun)、細(xi)(xi)胞(bao)(bao)或(huo)(huo)組織樣品：收集細(xi)(xi)胞(bao)(bao)或(huo)(huo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)到離心管內，離心后棄上清；按照(zhao)每1000萬細(xi)(xi)菌(jun)或(huo)(huo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)加(jia)入(ru)1mL試(shi)劑一，超(chao)聲波破碎細(xi)(xi)菌(jun)或(huo)(huo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)（功率20％，超(chao)聲3s，間隔(ge)10s，重(zhong)復30次(ci)），10000rpm，常溫離心10min，取上清待測(ce)。
稱(cheng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一(yi)進行冰浴勻漿，10000 rpm，常溫離心(xin)10min，取上清待測。
二、測(ce)定步(bu)驟

1. 紫外分光光度計預熱(re)30min以上，調節波長340nm，蒸餾(liu)水調零。
2. 標準溶液的制備

將標準(zhun)品分別(bie)稀(xi)釋為2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.078、0.039μmol/mL的標準(zhun)溶液。

3. 在1 mL石英比色(se)皿中加入下列(lie)試劑：

（1）標準(zhun)管(guan)：在(zai)1 mL石英比色皿中加入200μL標準(zhun)溶液(ye)、800μL試劑(ji)三和50μL試劑(ji)四混勻，立即記錄(lu)340nm處20s時(shi)的(de)吸光值(zhi)為A1和5min20s時(shi)的(de)吸光值(zhi)A2，計算(suan)?A=A2-A1。
（2）測定管：在1 mL石英比(bi)色皿中加入(ru)200μL樣本、800μL試劑三和(he)50μL試劑四混勻，立即記錄340nm處20s時的(de)吸(xi)光值為A1和(he)5min20s時的(de)吸(xi)光值A2，計算?A=A2-A1。
三、谷氨酸含量計(ji)算

1. 標準曲線的繪制(zhi)：

以谷氨酸含量(liang)（µmol/mL）為x軸，標準(zhun)管?A為y軸，繪制標準(zhun)曲(qu)線y=kx+b。將測定(ding)管?A帶入方程得到x值。
2、氨(an)基酸含量計算：
（1）按照蛋白(bai)濃度計(ji)算
谷氨酸含量（µmol/mg prot）=x×V樣本÷（Cpr×V樣本）=x÷Cpr。
（2）按照(zhao)樣(yang)品質量計(ji)算
谷氨酸含量（µmol/g鮮(xian)重(zhong)）=x×V樣本(ben)÷（W÷V樣總×V樣本(ben)）=x÷W。
（3）按照細(xi)菌或細(xi)胞密度計算
谷氨酸(suan)含量（μmol/10⁴ cell）＝x×V樣(yang)(yang)本(ben)÷（1000÷V樣(yang)(yang)總×V樣(yang)(yang)本(ben)）=0.001x。
V樣總：加入(ru)提取液(ye)體(ti)積，1mL；V樣本(ben)：加入(ru)的樣本(ben)體(ti)積，0.2mL；Cpr：樣本(ben)蛋白質濃(nong)度(du)，mg/mL；W：樣品(pin)質量(liang)，g；1000：細(xi)菌或細(xi)胞總數，1000萬(wan)。
注意(yi)事(shi)項(xiang)：
為提高檢測靈敏(min)度(du)，測定管的吸光(guang)值應小于1且?A小于0.4，若大于此(ci)值則(ze)需要將(jiang)上清液用(yong)試(shi)劑一稀釋適(shi)當倍數后測定。

谷氨酸(Glu)含量檢測試劑盒

相關文獻：
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作(zuo)者:Yanan Wang，Chengzhen Liang，Zhigang Meng，Yanyan Li，Muhammad Ali Abid，Muhammad Askari，Peilin Wang，Yuan Wang，Guoqing Sun，Yongping Cai，Shou-Yi Chen，Yi Lin，Rui Zhang，Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: