色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

雞外周血單核細胞分離液試劑盒
貨號：P5250
規格：2×200ml/KIT
保存(cun) ：室溫避光儲存(cun)，有效期少 2 年。

雞外周血單核細胞分離液試劑盒

操作步(bu)(bu)驟(zou)： 1. 取(qu)(qu)新鮮抗凝全血(xue)(xue)（EDTA、枸櫞酸鈉或(huo)(huo)肝(gan)素抗凝血(xue)(xue)均可(ke)）或(huo)(huo)者去(qu)纖(xian)維蛋白血(xue)(xue)液(ye)，用(yong)等體(ti)(ti)積(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)全血(xue)(xue)及組織稀(xi)(xi)釋(shi)液(ye)或(huo)(huo)者PBS稀(xi)(xi)釋(shi)全血(xue)(xue)。 2. 取(qu)(qu)一支(zhi)無(wu)菌離(li)心(xin)(xin)管，先加(jia)入試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)A，再加(jia)入試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)D，使兩者形成(cheng)梯度界面(mian)（試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)A：試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)D的(de)(de)(de)(de)(de)(de)體(ti)(ti)積(ji)(ji)比為(wei)(wei)(wei)3：2，如(ru)(ru)稀(xi)(xi)釋(shi)后(hou)(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)液(ye)樣(yang)本(ben)(ben)小于(yu)(yu)5ml，則(ze)先后(hou)(hou)加(jia)入3ml試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)A和2ml試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)D；如(ru)(ru)稀(xi)(xi)釋(shi)后(hou)(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)液(ye)樣(yang)本(ben)(ben)大(da)于(yu)(yu)5ml，試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)總量(liang)與稀(xi)(xi)釋(shi)后(hou)(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)液(ye)樣(yang)本(ben)(ben)量(liang)相等），兩種試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)一定要清(qing)晰。 3. 將稀(xi)(xi)釋(shi)后(hou)(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)液(ye)平(ping)鋪(pu)到(dao)(dao)分(fen)(fen)離(li)液(ye)液(ye)面(mian)上(shang)方，注意保持兩液(ye)面(mian)界面(mian)清(qing)晰。（可(ke)以使用(yong)巴(ba)氏(shi)德吸管吸取(qu)(qu)血(xue)(xue)液(ye)，然后(hou)(hou)將血(xue)(xue)液(ye)小心(xin)(xin)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)平(ping)鋪(pu)于(yu)(yu)分(fen)(fen)離(li)液(ye)上(shang)，因為(wei)(wei)(wei)兩者的(de)(de)(de)(de)(de)(de)密(mi)(mi)度差(cha)異，將形成(cheng)明(ming)顯(xian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)界面(mian)。如(ru)(ru)果樣(yang)品較(jiao)多(duo)，加(jia)樣(yang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)時間(jian)(jian)較(jiao)長，在離(li)心(xin)(xin)之(zhi)前(qian)出(chu)現紅(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)成(cheng)團下沉屬正(zheng)常現象） 4. 室溫，水平(ping)轉子500~800g，離(li)心(xin)(xin)20~30min（血(xue)(xue)液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)體(ti)(ti)積(ji)(ji)越大(da)所需(xu)(xu)(xu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)離(li)心(xin)(xin)力越大(da)，離(li)心(xin)(xin)時間(jian)(jian)越長，分(fen)(fen)離(li)條(tiao)件需(xu)(xu)(xu)自(zi)行摸索，離(li)心(xin)(xin)轉速不超過1000g）。 5. 離(li)心(xin)(xin)后(hou)(hou)將出(chu)現明(ming)顯(xian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)： 層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)血(xue)(xue)漿(jiang)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)二(er)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)白色單核(he)(he)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)三層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)透明(ming)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)D液(ye)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)四層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)半(ban)透明(ming)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)A液(ye)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)五(wu)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)紅(hong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)（如(ru)(ru)圖示）。 6. 小心(xin)(xin)吸取(qu)(qu)第(di)二(er)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)D層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)和第(di)三層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)乳白色細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)(ceng)(ceng)到(dao)(dao)另一無(wu)菌的(de)(de)(de)(de)(de)(de)15ml離(li)心(xin)(xin)管中(zhong)，加(jia)入10mL細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)洗滌液(ye)或(huo)(huo)PBS，顛倒混勻，250g，離(li)心(xin)(xin)10min。 7. 棄(qi)上(shang)清(qing)，5mL的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)清(qing)洗液(ye)或(huo)(huo)PBS重(zhong)懸細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，250g，離(li)心(xin)(xin)10min。 8. 重(zhong)復步(bu)(bu)驟(zou)7 9. 棄(qi)上(shang)清(qing)，細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)重(zhong)懸備(bei)用(yong)。 10. 差(cha)異貼(tie)(tie)壁法(fa)純化細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)：用(yong)單核(he)(he)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)養基(ji)以10 6個/ml的(de)(de)(de)(de)(de)(de)密(mi)(mi)度重(zhong)懸細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，將細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)鋪(pu)于(yu)(yu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)板(ban)或(huo)(huo)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)瓶中(zhong)，置于(yu)(yu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行貼(tie)(tie)壁培(pei)養。 1) 2~4 h內貼(tie)(tie)壁的(de)(de)(de)(de)(de)(de)為(wei)(wei)(wei)單核(he)(he)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)。 2) 10~24 h內貼(tie)(tie)壁的(de)(de)(de)(de)(de)(de)單個核(he)(he)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)為(wei)(wei)(wei)內皮、內皮祖細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、干細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao) 。 3) 不貼(tie)(tie)壁的(de)(de)(de)(de)(de)(de)為(wei)(wei)(wei)淋巴(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)。根據不同細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)貼(tie)(tie)壁時間(jian)(jian)存在差(cha)異，以達到(dao)(dao)簡單純化單核(he)(he)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)。此法(fa)成(cheng)本(ben)(ben)低，操作簡便(bian)。如(ru)(ru)需(xu)(xu)(xu)獲得高純度的(de)(de)(de)(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)則(ze)需(xu)(xu)(xu)選(xuan)(xuan)用(yong)免(mian)疫磁(ci)珠分(fen)(fen)選(xuan)(xuan)或(huo)(huo)者是應用(yong)流式技術(shu)分(fen)(fen)選(xuan)(xuan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)。