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Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒 細胞凋亡

Solarbio生產的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)凋(diao)亡熒(ying)光(guang)Hoechst 33342 /PI 雙染(ran)(ran)試劑盒為(wei)(wei)您提(ti)供了一種經典而又快速(su)簡(jian)便的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)凋(diao)亡與細(xi)(xi)胞(bao)壞(huai)死(si)檢測方法。    本試劑盒采用Hoechst 33342和(he)碘(dian)化丙(bing)啶(Propidium Iodide，PI)雙染(ran)(ran)的(de)(de)(de)(de)方法。細(xi)(xi)胞(bao)發(fa)生凋(diao)亡時(shi)，染(ran)(ran)色(se)(se)(se)(se)質會(hui)固縮。Hoechst33342可(ke)以(yi)穿透細(xi)(xi)胞(bao)膜，染(ran)(ran)色(se)(se)(se)(se)后(hou)凋(diao)亡細(xi)(xi)胞(bao)熒(ying)光(guang)會(hui)比正常(chang)細(xi)(xi)胞(bao)明顯(xian)增強(qiang)。碘(dian)化丙(bing)啶(PI)不能穿透細(xi)(xi)胞(bao)膜，對(dui)于具有完整細(xi)(xi)胞(bao)膜的(de)(de)(de)(de)正常(chang)細(xi)(xi)胞(bao)或凋(diao)亡細(xi)(xi)胞(bao)不能染(ran)(ran)色(se)(se)(se)(se)。而對(dui)于壞(huai)死(si)細(xi)(xi)胞(bao)，其細(xi)(xi)胞(bao)膜的(de)(de)(de)(de)完整性喪失，碘(dian)化丙(bing)啶(PI)可(ke)以(yi)染(ran)(ran)色(se)(se)(se)(se)壞(huai)死(si)細(xi)(xi)胞(bao)。上述兩種染(ran)(ran)料雙染(ran)(ran)后(hou)，使用流式細(xi)(xi)胞(bao)儀(yi)或熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡檢測時(shi)，正常(chang)細(xi)(xi)胞(bao)為(wei)(wei)弱(ruo)紅色(se)(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)＋弱(ruo)藍色(se)(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)，凋(diao)亡細(xi)(xi)胞(bao)為(wei)(wei)弱(ruo)紅色(se)(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)＋強(qiang)藍色(se)(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)，壞(huai)死(si)細(xi)(xi)胞(bao)為(wei)(wei)強(qiang)紅色(se)(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)＋強(qiang)藍色(se)(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)。參考下圖(tu)，左圖(tu)為(wei)(wei)誘導凋(diao)亡前的(de)(de)(de)(de)正常(chang)細(xi)(xi)胞(bao)，右圖(tu)為(wei)(wei)誘導凋(diao)亡后(hou)的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)。

染色快速方便，兩種染料的染色僅需20-30分鐘，一步染色即可完成。    使用方便，使用流式細胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準備其它任何溶液。    本試劑盒足夠檢測100個樣品，每個樣品的細胞數量可以為1×10⁵-1×10⁶。

使用說明：

1. 每個樣品收集約10-100萬細胞于1.5ml離心管(guan)內，離心棄上清(qing)。細胞沉淀(dian)用(yong)0.8-1ml細胞染(ran)色緩沖液(ye)重懸(xuan)。

2. 加入5微升Hoechst染色液。

3. 加入(ru)5微升PI染色液(ye)。

4. 混勻，冰(bing)浴或(huo)4℃孵(fu)育20-30分鐘。

5. 用流(liu)式(shi)細胞儀檢測紅色熒光和藍(lan)色熒光。

6. 如果使用熒光(guang)(guang)顯微鏡(jing)(jing)檢(jian)測(ce)，檢(jian)測(ce)前離心沉淀細(xi)胞(bao)(bao)，用PBS洗(xi)滌一次(ci)，再(zai)涂片觀察紅(hong)色(se)熒光(guang)(guang)和藍色(se)熒光(guang)(guang)。對(dui)于(yu)貼壁細(xi)胞(bao)(bao)使用熒光(guang)(guang)顯微鏡(jing)(jing)檢(jian)測(ce)，可以不收集(ji)細(xi)胞(bao)(bao)，直接依次(ci)按照(zhao)上(shang)述比例加(jia)入(ru)細(xi)胞(bao)(bao)染(ran)色(se)緩沖液(ye)、Hoechst染(ran)色(se)液(ye)和PI染(ran)色(se)液(ye)冰浴或4℃染(ran)色(se)20-30分鐘(zhong)。染(ran)色(se)后PBS洗(xi)滌一次(ci)，再(zai)在(zai)熒光(guang)(guang)顯微鏡(jing)(jing)下觀察。

注意事項：

需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。 染色后宜盡快檢測。

Hoechst 33342對(dui)人體(ti)有害(hai)，碘化丙啶(ding)(PI)對(dui)人體(ti)有刺(ci)激性，請注意適當(dang)防護。

為了(le)您(nin)的(de)安全(quan)和健康，請穿實驗(yan)服(fu)并(bing)戴一次性手套操作。

相關文獻：

《IL-17A-stimulated endothelial fatty acid β-oxidation promotes tumor angiogenesis》 作者:Ruirui Wang,Xiaohan Lou,Guang Feng,Jinfeng Chen,Linyu Zhu,Xiaomeng Liu,Xiaohan Yao Pan Li,Jiajia Wan,Yi Zhang Chen Ni,Zhihai Qin 期刊:Life Sciences 影響因子:3.448 PMID:31085243
《Self-assembly of biotinylated poly(ethylene glycol)-poly(curcumin) for paclitaxel delivery》 作者:Lijun Hua,MinLi,Zhipeng Zhang,Yuanyuan Shen,Shengrong Guo 期刊:International Journal of Pharmaceutics 影響因子:4.213 PMID:30308274
《Co-administration of iRGD with peptide HPRP-A1 to improve anticancer activity and membrane penetrability》 作者:Cuihua Hu, Xiaolong Chen, Yibing Huang & Yuxin Chen  期刊:Scientific Reports 影響因子:4.011 PMID:29396568
《Milk fat globule membrane protein promotes C2C12 cell proliferation through the PI3K/Akt signaling pathway》 作者:He Lia， Weili Xua，Ying Ma，Shaobo Zhou，Ran Xiao 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:29634969
《FosB regulates rosiglitazone-induced milk fat synthesis and cell survival》 作者:Xuefeng Wei, Hui Li, Guangwei Zhao, Jiameng Yang, Lihui Li, Yongzhen Huang, Xianyong Lan, Yun Ma, Huiling Zheng, Hong Chen 期刊:Journal of Cellular Physiology 影響因子:4.522 PMID:29154466
《Long Non-coding RNA Profiling Reveals an Abundant MDNCR that Promotes Differentiation of Myoblasts by Sponging miR-133a》 作者:Hui Li,Jiameng Yang,Rui Jiang,Xuefeng Wei,Chengchuang Song,Yongzhen Huang,Xianyong Lan,Chuzhao Lei,Yun Ma,Linyong Hu,Hong Chen 期刊:Molecular Therapy Nucleic Acids 影響因子:5.919 PMID:30195797
《Biocompatible and pH-sensitive MnO-loaded carbonaceous nanospheres (MnO@CNSs): A theranostic agent for magnetic resonance imaging-guided photothermal therapy》 作(zuo)者:Ying Xiang,Nianlu Li,Lijuan Guo,Hong Wang,Haofeng Sun,Ruohan Li,Long Ma,Yafei Qi,Jinhua,Zhan,Dexin Yu 期刊:Carbon 影響因子:7.466 PMID:

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