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DMEM高糖 不含HEPES 細胞培養

DMEM高糖 不含HEPES 細胞培養

DMEM是(shi)一種(zhong)含(han)各種(zhong)氨基酸和(he)(he)葡萄(tao)糖(tang)的(de)培(pei)養(yang)(yang)基，高糖(tang)型有利于細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)停泊(bo)于一個位置生長，適于生長較(jiao)快(kuai)、附(fu)著較(jiao)困難腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)等。該類培(pei)養(yang)(yang)基廣泛應用于疫苗生產和(he)(he)各種(zhong)初代病(bing)毒宿(su)主(zhu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)(yang)及(ji)單一細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)(yang);如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)系的(de)培(pei)養(yang)(yang)。

DMEM培養基的成分

DMEM培養基的配制方法：

1 制備新鮮三蒸水或Millipore超純(chun)水。

2 稱取(qu)所需量的干粉(fen)培養(yang)基，加入(ru)約終體積(ji)一半的三(san)蒸水中;若配(pei)制一個(ge)包裝的培養(yang)液(ye)(ye)，在將(jiang)整個(ge)包裝的干粉(fen)倒(dao)入(ru)三(san)蒸水后(hou)，需用水洗包裝袋內面(mian)2次(ci)，倒(dao)入(ru)培養(yang)液(ye)(ye)中，以保證所有干粉(fen)都溶(rong)解(jie)成培養(yang)液(ye)(ye)。磁力攪拌或人工(gong)攪拌使之*溶(rong)解(jie)。

3 根據包裝袋上的要求補加(jia)所需(xu)量的碳酸氫(qing)鈉(na);根據實驗需(xu)要，添HEPES(5-20mmol/L)、谷(gu)氨酰胺和其他(ta)特殊物質。

4 加水(shui)定容到終(zhong)體積。

5 必要時用1 mol/L 鹽酸和(he)1 mol/L 氫氧化(hua)鈉調節pH。

6 用無菌(jun)(jun)0.22um濾(lv)膜過濾(lv)除菌(jun)(jun)，分裝(zhuang)于無菌(jun)(jun)血清瓶中，4℃冰(bing)箱保(bao)存。

配(pei)制好的培(pei)養液用前加入(ru)100U/mL青霉(mei)(mei)素和100U/mL鏈霉(mei)(mei)素，并根(gen)據(ju)需要加入(ru)血(xue)清(5%-20%)。

DMEM培養基的特點：

（1）氨基酸含量為(wei)依格爾培養基的2倍，且含有非必需氨基酸，如(ru)甘(gan)氨酸等；

（2）維(wei)生素含量為依格爾(er)培(pei)養基的4倍(bei)；

（3）含有(you)糖(tang)酵解途徑中的(de)重要物質——丙酮酸；

（4）含有微量的鐵離子。

DMEM培(pei)(pei)養基應(ying)用廣泛。基于DMEM培(pei)(pei)養基中(zhong)氨(an)基酸、微(wei)生(sheng)(sheng)物含量豐富，并(bing)具有糖酵解中(zhong)的丙酮酸和微(wei)量Fe離子，因此在細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養、疫苗生(sheng)(sheng)產等方面的應(ying)用為常(chang)見。