色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

猴外周血單核細胞分離液試劑盒
貨號：P5310
規格：2×200ml/KIT
保存 ：室溫避光儲(chu)存，有效期(qi)少 2 年。

猴外周血單核細胞分離液試劑盒

操(cao)作步驟： 1. 取新鮮抗凝全(quan)血(xue)（EDTA、枸櫞酸鈉或(huo)(huo)肝(gan)素抗凝血(xue)均可）或(huo)(huo)者(zhe)(zhe)去纖維蛋白(bai)血(xue)液(ye)(ye)(ye)，用(yong)(yong)等(deng)體積的(de)(de)(de)(de)全(quan)血(xue)及組(zu)織稀(xi)釋(shi)(shi)液(ye)(ye)(ye)或(huo)(huo)者(zhe)(zhe)PBS稀(xi)釋(shi)(shi)全(quan)血(xue)。 2. 取一支無菌離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)管，先加(jia)入(ru)試(shi)劑A，再加(jia)入(ru)試(shi)劑D，使兩者(zhe)(zhe)形成(cheng)梯度(du)(du)界(jie)面（試(shi)劑A：試(shi)劑D的(de)(de)(de)(de)體積比為(wei)(wei)(wei)3：2，如(ru)稀(xi)釋(shi)(shi)后(hou)的(de)(de)(de)(de)血(xue)液(ye)(ye)(ye)樣(yang)(yang)本(ben)(ben)小于5ml，則先后(hou)加(jia)入(ru)3ml試(shi)劑A和2ml試(shi)劑D；如(ru)稀(xi)釋(shi)(shi)后(hou)的(de)(de)(de)(de)血(xue)液(ye)(ye)(ye)樣(yang)(yang)本(ben)(ben)大于5ml，試(shi)劑總量與稀(xi)釋(shi)(shi)后(hou)的(de)(de)(de)(de)血(xue)液(ye)(ye)(ye)樣(yang)(yang)本(ben)(ben)量相等(deng)），兩種(zhong)試(shi)劑的(de)(de)(de)(de)分(fen)層(ceng)(ceng)(ceng)一定要(yao)清晰。 3. 將(jiang)稀(xi)釋(shi)(shi)后(hou)的(de)(de)(de)(de)血(xue)液(ye)(ye)(ye)平鋪到(dao)分(fen)離(li)(li)(li)液(ye)(ye)(ye)液(ye)(ye)(ye)面上(shang)(shang)方，注(zhu)意保持兩液(ye)(ye)(ye)面界(jie)面清晰。（可以(yi)使用(yong)(yong)巴(ba)氏德吸管吸取血(xue)液(ye)(ye)(ye)，然后(hou)將(jiang)血(xue)液(ye)(ye)(ye)小心(xin)(xin)(xin)的(de)(de)(de)(de)平鋪于分(fen)離(li)(li)(li)液(ye)(ye)(ye)上(shang)(shang)，因為(wei)(wei)(wei)兩者(zhe)(zhe)的(de)(de)(de)(de)密度(du)(du)差(cha)異，將(jiang)形成(cheng)明(ming)顯的(de)(de)(de)(de)分(fen)層(ceng)(ceng)(ceng)界(jie)面。如(ru)果樣(yang)(yang)品(pin)較多，加(jia)樣(yang)(yang)的(de)(de)(de)(de)時間較長，在離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)之前(qian)出(chu)現(xian)(xian)紅細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)成(cheng)團下沉屬正常現(xian)(xian)象） 4. 室(shi)溫，水平轉子500~800g，離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)20~30min（血(xue)液(ye)(ye)(ye)的(de)(de)(de)(de)體積越大所需(xu)的(de)(de)(de)(de)離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)力越大，離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)時間越長，分(fen)離(li)(li)(li)條件需(xu)自行(xing)摸(mo)索，離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)轉速不超過(guo)1000g）。 5. 離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)后(hou)將(jiang)出(chu)現(xian)(xian)明(ming)顯的(de)(de)(de)(de)分(fen)層(ceng)(ceng)(ceng)： 層(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)血(xue)漿(jiang)層(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)二層(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)白(bai)色單(dan)核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)三層(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)透明(ming)試(shi)劑D液(ye)(ye)(ye)層(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)四層(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)半透明(ming)試(shi)劑A液(ye)(ye)(ye)層(ceng)(ceng)(ceng)；第(di)五層(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)(wei)(wei)紅細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)(ceng)（如(ru)圖(tu)示）。 6. 小心(xin)(xin)(xin)吸取第(di)二層(ceng)(ceng)(ceng)試(shi)劑D層(ceng)(ceng)(ceng)和第(di)三層(ceng)(ceng)(ceng)乳白(bai)色細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)(ceng)到(dao)另一無菌的(de)(de)(de)(de)15ml離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)管中，加(jia)入(ru)10mL細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)洗滌液(ye)(ye)(ye)或(huo)(huo)PBS，顛(dian)倒混勻，250g，離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)10min。 7. 棄(qi)上(shang)(shang)清，5mL的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)清洗液(ye)(ye)(ye)或(huo)(huo)PBS重(zhong)懸(xuan)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，250g，離(li)(li)(li)心(xin)(xin)(xin)10min。 8. 重(zhong)復步驟7 9. 棄(qi)上(shang)(shang)清，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)重(zhong)懸(xuan)備用(yong)(yong)。 10. 差(cha)異貼(tie)(tie)壁法純(chun)化細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)：用(yong)(yong)單(dan)核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)基以(yi)10 6個/ml的(de)(de)(de)(de)密度(du)(du)重(zhong)懸(xuan)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，將(jiang)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)鋪于細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)板或(huo)(huo)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)瓶中，置(zhi)于細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)箱中進行(xing)貼(tie)(tie)壁培(pei)養(yang)。 1) 2~4 h內(nei)貼(tie)(tie)壁的(de)(de)(de)(de)為(wei)(wei)(wei)單(dan)核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。 2) 10~24 h內(nei)貼(tie)(tie)壁的(de)(de)(de)(de)單(dan)個核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)為(wei)(wei)(wei)內(nei)皮、內(nei)皮祖細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、干(gan)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao) 。 3) 不貼(tie)(tie)壁的(de)(de)(de)(de)為(wei)(wei)(wei)淋巴(ba)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。根據(ju)不同細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)貼(tie)(tie)壁時間存(cun)在差(cha)異，以(yi)達(da)到(dao)簡(jian)單(dan)純(chun)化單(dan)核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)(de)。此(ci)法成(cheng)本(ben)(ben)低，操(cao)作簡(jian)便。如(ru)需(xu)獲得高純(chun)度(du)(du)的(de)(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)則需(xu)選(xuan)用(yong)(yong)免疫磁珠分(fen)選(xuan)或(huo)(huo)者(zhe)(zhe)是(shi)應用(yong)(yong)流式技術分(fen)選(xuan)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。