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基因(yin)工程試劑 BL21（DE3）感受態細胞(bao)
貨號：C1400
規格：10×100ul / 20×100ul
保存：-70℃保(bao)存(cun)，運輸為(wei)干冰包裝。自收(shou)貨之(zhi)日起液氮保(bao)存(cun)少(shao)一年，-70℃保(bao)存(cun)少(shao) 6 個(ge)月。

產品簡介：
本公司生產的BL21（DE3）感受態細胞是采用大腸桿菌BL21（DE3）菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的化學轉化。使用pUC19 質粒檢測，轉化效率可達 10 7 ，-70℃保存 6 個月轉化效率不改變。
基因型：F_ ompT hsdSB（rB_mB_）dcm gal（DE3）
特(te) 點：該菌(jun)(jun)株(zhu)用于(yu)高效表達(da)(da)克隆(long)于(yu)含有噬菌(jun)(jun)體 T7 啟(qi)動子的(de)(de)表達(da)(da)載體（如 pET 系列）的(de)(de)基因。T7 噬菌(jun)(jun)體RNA 聚合酶位于(yu) λ 噬菌(jun)(jun)體 DE3 區(qu)，該區(qu)整合于(yu) BL21 的(de)(de)染色(se)體上。該菌(jun)(jun)適合表達(da)(da)非毒性(xing)蛋(dan)白。

操作方法：  （以下各步驟均為無菌操作）
1、將感受態細胞置于冰上融化，以下實驗以 100ul 感受態細胞為例。
2、向感受態細胞懸液中加入需轉化的目的 DNA，注意目的 DNA 的體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一，輕輕旋轉離心管以混勻內容物，冰浴放置 30 分鐘。
3、將離心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒，然后快速轉移到冰浴中放置 2-3 分鐘，注意不要搖動離心管。
4、向離心管中加入 500ul 無菌無抗的 SOC 或 LB 培養基，37℃ 180rpm 振蕩培養 1 小時。目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。
5、取適量(liang)已轉化(hua)(hua)的(de)(de)(de)感受態細胞涂布(bu)含相(xiang)應抗生(sheng)素的(de)(de)(de) SOC 或 LB 平(ping)板(ban)(ban)，37℃倒置培養(yang)(yang) 12-16 小(xiao)時。涂布(bu)用量(liang)可根據具體實驗來調整，如轉化(hua)(hua)的(de)(de)(de) DNA 總(zong)量(liang)較(jiao)多(duo)，可取 100ul 左右(you)的(de)(de)(de)轉化(hua)(hua)產物涂板(ban)(ban)；反(fan)之，如轉化(hua)(hua)的(de)(de)(de) DNA總(zong)量(liang)較(jiao)少，可取 200-300ul 的(de)(de)(de)轉化(hua)(hua)產物涂板(ban)(ban)。過多(duo)菌(jun)液可以(yi)抑制細菌(jun)生(sheng)長。如果預計的(de)(de)(de)克(ke)隆較(jiao)少，可通過離心(xin)后吸(xi)除(chu)部(bu)分培養(yang)(yang)液，懸(xuan)浮菌(jun)體后將其涂布(bu)于一(yi)個平(ping)板(ban)(ban)中。涂布(bu)剩余的(de)(de)(de)菌(jun)液可 4℃保存，如果次日的(de)(de)(de)轉化(hua)(hua)菌(jun)落數過少可以(yi)將剩下(xia)的(de)(de)(de)菌(jun)液再涂布(bu)新的(de)(de)(de)平(ping)板(ban)(ban)。

注意事項：
1、感受態細胞應保存在-70℃，不可反復凍融，否則其轉化效率將會降低。
2、實驗過程中應嚴格無菌操作，防止其它 DNA 或雜菌的污染，避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。
3、轉化時，轉化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內成正比，但當加入的外源 DNA 量過多或體積過大反而會降低轉化效率。轉化時 DNA 體積要小于感受態細胞體積的十分之一。
4、轉化率的計算：轉化率＝產生菌落的總數/鋪板 DNA 總量。
5、為防止轉化實驗不成(cheng)功，可(ke)以保留部分連接產物，以重新轉化，將損(sun)失降到(dao)低。

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基因工程試劑(ji) BL21（DE3）感受態細胞訂購說明：
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運輸說明：
1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
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