產品名稱:預染超(chao)低分子量蛋白質Marker
產品型號:PR1900
產品特點:預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)怎么使用貨 號 : PR1900規 格 : 20T(200µ1)本產品包含預染的3種多肽和2種低分子量蛋白質組成,分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD。
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預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)
英文名稱 | Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD) |
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儲存條件 | -20℃,有效期1年 |
產品簡介
預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)
本(ben)產品包含預染的3種(zhong)多(duo)(duo)肽(tai)和2種(zhong)低分(fen)子量(liang)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)組成(cheng),分(fen)子量(liang)范圍(wei)為(wei)3. 3kD-31. 0kD。可以(yi)用于(yu)直接觀察蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)電(dian)泳狀(zhuang)況以(yi)及清晰地判斷Western Blot的轉膜效果。經Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠(jiao)電(dian)泳時以(yi)及轉移到(dao)PVDF或NC膜上(shang)可看到(dao)清晰的5條(tiao)藍色的蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)條(tiao)帶。本(ben)品為(wei)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)和多(duo)(duo)肽(tai)混(hun)合(he)物的凍干粉(fen),每(mei)種(zhong)預染蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)含量(liang)約為(wei)40μg,配有一支1×上(shang)樣(yang)緩(huan)沖液。
使用說明:
1. 開封后,溶于(yu)200 μ1 1×上樣(yang)緩沖液,可根據(ju)需要進行小量(liang)分裝,每(mei)管10 μl,-20℃貯存,每(mei)次取一管使用,避(bi)免(mian)反復凍融(rong)。
2. 使(shi)用(yong)前取分(fen)裝后(hou)的小管室溫(wen)融(rong)化后(hou)即(ji)可上(shang)樣電泳。
示意圖:
凝膠制備及染色注意事項(xiang):
1. 先配制(zhi)(zhi)分離膠(jiao),聚合后再(zai)配制(zhi)(zhi)夾層膠(jiao),后配制(zhi)(zhi)濃縮膠(jiao),3種膠(jiao)的制(zhi)(zhi)膠(jiao)體積比為4:1.5:1。電(dian)泳(yong)(yong)時,30V跑1-2h后,待指示前沿(yan)到達分離膠(jiao)上沿(yan)時,把電(dian)壓調(diao)100V,電(dian)泳(yong)(yong)結束(shu),整個電(dian)泳(yong)(yong)過程大約需要6-8h。
2. 電(dian)泳之后可(ke)將膠置于固定(ding)(ding)液(ye)中(zhong)固定(ding)(ding)20min,再進行染(ran)色(se),能得到較(jiao)好的(de)蛋(dan)白條帶;如時間不允許,也可(ke)不進行固定(ding)(ding)直接染(ran)色(se)。如果使用配方(fang)7進行染(ran)色(se)時效果不好或考(kao)慮其毒性,請(qing)選(xuan)擇(ze)本(ben)公司(si)的(de)考(kao)馬斯亮藍蛋(dan)白膠快(kuai)速染(ran)色(se)液(ye)(貨號(hao):P1300),該(gai)產品具(ju)有(you)染(ran)色(se)快(kuai),無毒,靈敏性高(gao)等特點(dian),是常規染(ran)色(se)液(ye)的(de)替代品。
3. 由于多肽(tai)所含的氨(an)基酸(suan)數(shu)目較少,因此(ci)如(ru)該多肽(tai)含有(you)過多的極性(xing)氨(an)基酸(suan)(堿性(xing)或酸(suan)性(xing)),則(ze)會影響(xiang)其在SDS-PAGE圖(tu)上的條帶遷(qian)移率,即其表觀(guan)分子(zi)量可能和(he)多肽(tai)的氨(an)基酸(suan)理論(lun)推算分子(zi)量有(you)一定距離。
4. 由于(yu)SDS-PAGE的圖譜上(shang),蛋白(bai)(bai)質(zhi)對(dui)數分(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)量(liang)(liang)和遷(qian)移率成正比(bi)直線關系的分(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)量(liang)(liang)范圍(wei)為(wei)15,000-200,000,因此對(dui)于(yu)分(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)量(liang)(liang)小于(yu)10000的蛋白(bai)(bai)質(zhi)或多肽的分(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)量(liang)(liang),只能根(gen)據標(biao)準分(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)量(liang)(liang)進(jin)行估計,推斷其是否落入預測的分(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)量(liang)(liang)范圍(wei)。
5. 由于超低分子量(liang)多肽(3000及3000以下(xia)),極易從凝膠上浸出,因此(ci)染色(se)及脫色(se)時間不(bu)(bu)宜太長,脫色(se)后凝膠也不(bu)(bu)宜在水中浸泡保存(cun)過久(jiu),否則條帶(dai)會消(xiao)失。
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