色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

Z0005 引物合成5-OD 索萊寶自產

引物合(he)成(cheng)是通過(guo)測定(ding)引物的(de)OD值，溶解(jie)引物，終合(he)成(cheng)引物的(de)一個(ge)完善的(de)過(guo)程。

目前引物合(he)成基(ji)本采用固相亞(ya)磷(lin)酰胺三酯法。亞磷(lin)酰胺三酯法合成DNA的(de)片段，具有高(gao)效、快速的(de)偶聯以及(ji)起始反應物比較穩定的(de)特點。亞磷(lin)酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成(cheng)(cheng)DNA鏈的合成(cheng)(cheng)的，合成(cheng)(cheng)的方向(xiang)是由(you)待合成(cheng)(cheng)引(yin)物的3′端(duan)向(xiang)5′端(duan)合成(cheng)(cheng)的，相鄰的核苷酸通過3′→5′磷酸二酯鍵連(lian)接。

引(yin)物(wu)合(he)成特點

1.引物合成的(de)純度高。

2.合成的序列長。

3.合成的效果好。

引物純(chun)化方式

1.C18柱(zhu)脫鹽：有人稱其為(wei)簡(jian)易反(fan)相柱(zhu)，它(ta)對DNA有特異性的(de)(de)(de)吸(xi)附，可以被有機溶解洗脫，但不(bu)會(hui)被水(shui)洗脫，所以能(neng)(neng)有效地去除(chu)鹽分。它(ta)不(bu)能(neng)(neng)有效去除(chu)比目的(de)(de)(de)片(pian)段短的(de)(de)(de)小片(pian)段。這種方法一(yi)般(ban)不(bu)會(hui)對普通PCR反(fan)應(ying)產生影響。對于需(xu)要用于測序、克(ke)隆的(de)(de)(de)引物不(bu)能(neng)(neng)使用這個。

2.OPC純化(hua)(hua)： OPC純化(hua)(hua)是根據(ju)DNA保護基(ji)（DMTr基(ji)）和Cartridge柱中(zhong)樹脂(zhi)間的親合力作用的原理(li)進(jin)行純化(hua)(hua)目的DNA的片(pian)段。

3.PAGE純(chun)：PAGE純(chun)化(hua)(hua)法(fa)是使用變(bian)性聚(ju)丙烯酰胺凝膠(jiao)電泳，對(dui)DNA的(de)(de)片段進(jin)行分離，然(ran)后從凝膠(jiao)中回收目的(de)(de)DNA的(de)(de)方法(fa)。PAGE純(chun)化(hua)(hua)法(fa)也是一種非常有效(xiao)的(de)(de)DNA純(chun)化(hua)(hua)方法(fa)，純(chun)化(hua)(hua)后的(de)(de)DNA純(chun)度大于(yu)95%，對(dui)長鏈Oligo DNA (大于(yu)50mer)的(de)(de)純(chun)化(hua)(hua)特別有效(xiao)。

4.HPLC純(chun)化(hua)：HPLC純(chun)化(hua)是使用高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)的(de)原理(li)，對DNA的(de)片段進行純(chun)化(hua)。純(chun)度(du)可(ke)以大于(yu)99%。主要用于(yu)短(duan)鏈和修(xiu)飾引物的(de)純(chun)化(hua)。

5引物的OD數的定量

用紫(zi)外分光(guang)光(guang)度計，波(bo)長260nm，石英(ying)比色杯，光(guang)程為1厘米，測(ce)定(ding)溶(rong)液的(de)光(guang)密度。測(ce)定(ding)時溶(rong)液的(de)光(guang)密度好稀(xi)釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用一定(ding)體積(ji)的(de)水(shui)充(chong)分振(zhen)蕩溶(rong)解以后(hou)，用1ml水(shui)稀(xi)釋測(ce)OD值。需要(yao)根據稀(xi)釋倍(bei)數換算出母液的(de)OD值。