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Z0020  引物合成2-OD  索萊寶自產 

引(yin)物合成是通過測定(ding)引(yin)物的(de)OD值(zhi)，溶解(jie)引(yin)物，終合成引(yin)物的(de)一個(ge)完善的(de)過程。

目前引物合成基本(ben)采用固相亞磷酰胺三酯(zhi)法。亞磷(lin)酰(xian)(xian)胺三酯(zhi)法合(he)成DNA的(de)片段，具有高效、快速(su)的(de)偶聯以及起始反(fan)應物比較(jiao)穩定(ding)的(de)特點。亞磷(lin)酰(xian)(xian)胺三酯(zhi)法是(shi)將DNA固定(ding)在(zai)固相載體上完成(cheng)DNA鏈(lian)的(de)合(he)成(cheng)的(de)，合(he)成(cheng)的(de)方(fang)向是由待合(he)成(cheng)引物的(de)3′端向5′端合(he)成(cheng)的(de)，相鄰的(de)核(he)苷酸通過(guo)3′→5′磷酸二酯鍵連接。

引物合成特點

1.引物合成的純(chun)度高。

2.合成(cheng)的序(xu)列長。

3.合成的效果好。

引物純化方式

1.C18柱(zhu)脫鹽：有(you)人稱其為簡易(yi)反相柱(zhu)，它對(dui)(dui)DNA有(you)特異性的(de)(de)吸附(fu)，可以(yi)被有(you)機溶解洗(xi)脫，但不(bu)會被水洗(xi)脫，所以(yi)能有(you)效地(di)去(qu)除鹽分。它不(bu)能有(you)效去(qu)除比(bi)目的(de)(de)片段短的(de)(de)小片段。這種方法一般不(bu)會對(dui)(dui)普通(tong)PCR反應產生影響(xiang)。對(dui)(dui)于需要(yao)用于測序、克隆的(de)(de)引物不(bu)能使用這個。

2.OPC純(chun)化(hua)： OPC純(chun)化(hua)是根據DNA保護(hu)基(ji)（DMTr基(ji)）和Cartridge柱(zhu)中樹脂(zhi)間的親合力作用的原(yuan)理進(jin)行純(chun)化(hua)目的DNA的片(pian)段。

3.PAGE純(chun)：PAGE純(chun)化(hua)(hua)法(fa)是(shi)使用(yong)變性聚丙烯酰(xian)胺凝(ning)膠電泳，對DNA的(de)(de)(de)片(pian)段進行(xing)分離，然后(hou)從凝(ning)膠中(zhong)回收(shou)目的(de)(de)(de)DNA的(de)(de)(de)方法(fa)。PAGE純(chun)化(hua)(hua)法(fa)也是(shi)一(yi)種非常有(you)(you)效的(de)(de)(de)DNA純(chun)化(hua)(hua)方法(fa)，純(chun)化(hua)(hua)后(hou)的(de)(de)(de)DNA純(chun)度大于95%，對長鏈Oligo DNA (大于50mer)的(de)(de)(de)純(chun)化(hua)(hua)特別有(you)(you)效。

4.HPLC純(chun)(chun)化：HPLC純(chun)(chun)化是使用(yong)高效液相色譜的(de)(de)原(yuan)理，對DNA的(de)(de)片段進行純(chun)(chun)化。純(chun)(chun)度可以(yi)大于(yu)99%。主(zhu)要用(yong)于(yu)短(duan)鏈和修飾引(yin)物的(de)(de)純(chun)(chun)化。

5引物的OD數的定量

用(yong)紫外分光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度(du)計(ji)，波長260nm，石英比色杯，光(guang)(guang)(guang)程為1厘(li)米，測定溶液的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)密度(du)。測定時溶液的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)密度(du)好稀(xi)釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用(yong)一定體(ti)積的(de)(de)水充分振蕩溶解(jie)以后，用(yong)1ml水稀(xi)釋測OD值。需要根據(ju)稀釋倍數換算(suan)出母液(ye)的(de)OD值。